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BiogradeTech诊断原料定制：牛纤维蛋白原

纤维蛋白原（Fibrinogen，Fg），即凝血因子I，分子量约340kDa，由α、β、γ三对不同多肽链组成，多肽链间以二硫键相连。α链分子量63.5 kDa，β链分子量56 kDa，γ链分子量47kDa，纤维蛋白原约含4%碳水化合物。

纤维蛋白原参与凝血的原理：在凝血酶作用下，α链与β链分别释放出A肽与B肽，生成纤维蛋白单体。在此过程中，由于释放了酸性多肽，负电性降低，单体易于聚合成纤维蛋白多聚体，但此时单体之间借氢键与疏水键相连，尚可溶于稀酸和尿素溶液中。进一步在Ca2+与活化的ⅩⅢ因子作用下，单体之间以共价键相连，则变成稳定的不溶性纤维蛋白凝块，完成凝血过程。

来源于不同物种（如来源于牛、猫、狗、豚鼠、人、绵羊、小鼠和大鼠等）的纤维蛋白原具有相似的结构和性质。因此，一般来源于一种哺乳动物的纤维蛋白原可与其他来源的凝血酶交叉反应，相反地来自一种哺乳动物蛋白的凝血酶液也可注入多种动物，发生凝血反应。

艾美捷牛纤维蛋白原：

目录号：A-CSH003

大小：100mg，1g

储存：-20°C（36个月）

分子量：340kDa

外观：白色至灰白色冻干粉或固体块

蛋白质含量：50～70%蛋白质（≥85%的蛋白质可凝结）

溶解度：溶于0.9%生理盐水（10mg/ml）

牛纤维蛋白原用法：

牛纤维蛋白原溶液在50°C以上的温度下发生变性；因此，加热温度不应超过50°C。此外，牛纤维蛋白原通常溶解在37°C的生理盐水（0.9%NaCl）中。溶解过程中的温度不应过低，因为在4°C或无盐溶液中很难溶解。牛纤维蛋白原可溶于0.9%的NaCl溶液，可制备为浓度为2.5-10mg/ml的溶液，并在-20°C下储存。无菌过滤后，可稳定储存约一周。

注意事项：

1.要溶解产品，请将其轻轻放入37°C预热的生理盐水中，慢慢搅拌直至溶解。在此过程中避免涡流混合。

2.建议使用0.2µm的滤膜进行过滤；不应使用0.1µm的滤膜。缓慢的使用注射器过滤是可以接受的，但应避免真空过滤。

该试剂仅用于科学研究领域，不适用于临床诊断或其他用途。

https://www.amyjet.com/products/A-CSH003-1g.shtml

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BiogradeTech高活力牛凝血酶>2000IU/mg方案说明

凝血酶是由大小分别为31KD和6KD的两条肽链通过二硫键组成的一种丝氨酸蛋白水解酶，可从动物血浆中利用已激活凝血酶原水解制得，可催化纤维蛋白原(flbrinogen)水解释放A肽和B肽，由此形成纤维蛋白单体，单体进一步聚合，在血小板、红细胞和白细胞等参与下形成血凝块，常用于诊断学中凝血化验、凝血因子检测、血液或血浆的脱纤维化等；另外，由于凝血酶切割序列专一，水解效率高，因此在分子生物学、生物化学或生物工程制药研究中也常作为工具酶用于重组融合蛋白(包含凝血酶识别位点)的特异性断裂。

牛凝血酶（>2000IU/mg）凝血酶（Thrombin）来源于牛血浆，分子量37KD，是由两条肽链（31KD和6KD）通过二硫键组成的。

艾美捷牛凝血酶（>2000IU/mg）：

目录号：A-CSH002

尺寸：1000U

储存：2-8°C（36个月）

分子量：37 kDa

外观：白色冻干粉或固体块

比活度：≥2000 |U/mg

纯度：SDS-PAGE分析中未观察到杂质带

pH（25℃）：5.0~6.0

牛凝血酶（>2000IU/mg）用法：

这种凝血酶是一种广泛应用的蛋白酶，可用于切割标签，并且可以高效地切割质量比低至1:2000的蛋白质。在20°C至37°C的温度范围内，切割时间为0.3至16小时。凝血酶的最佳切割位点是X4-X3-P-R[K]-X1'-X2'，其中X4和X3是疏水性氨基酸，X1'和X2'是非酸性氨基酸。一些常用的识别位点包括L-V-P-R-G-S、L-V-P-R-G-F和M-Y-P-R-G-N。X4-X3-P-R-G-X2'之间的切割比X4-X3-P-K-L-X2'更有效。另一个识别位点是X2-R[K]-X1'，其中X2或X1'是甘氨酸，比如A-R-G和G-K-A，切割发生在第二个残基之后。在凝血酶切割位点和N-末端标签之间插入五个甘氨酸残基可以改善切割效果。这种"甘氨酸连接肽"可使完全切割所需的酶量减少，并且还可以防止潜在的错误切割。有效的消化缓冲液是含有20 mM Tris-HCl缓冲液和150 mM氯化钠的pH 8.0的溶液。可以使用对氨基苯甲酰亚胺亲和纯化、苯甲酰亚胺亲和纯化或肝素亲和纯化去除切割产物中的凝血酶。

该试剂仅用于科学研究领域，不适用于临床诊断或其他用途。

https://www.amyjet.com/products/A-CSH002-1000U.shtml

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Biogradetech血浆/血清外泌体提取试剂盒Plasma/Serum Micro Exosome Isolation Kit

Exosome（外泌体）是由活细胞分泌的直径约为30-150 nm的小囊泡，具有典型的脂质双分子层结构；存在于细胞培养上清液、血清、血浆、唾液、尿液、羊水以及其它生物体液中；Exosome携带有多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息，不仅在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用，更有望成为多种疾病的早期诊断标志物。

本试剂盒基于自主研发的磁珠，可在不吸附杂质的情况下特异性捕获外泌体，实现外泌体分离的高纯度和高回收率。它具有操作简单、纯度高、回收率高的优点，特别适合于从血浆和血清中分离外泌体。隔离的外泌体可用于WB分析、NTA或纳米流粒度分析、电子显微镜检测、组学研究、细胞和动物功能研究等等。

艾美捷血浆/血清外泌体提取试剂盒：

目录号：A-EXO006

尺寸：50T

储存：收到后，按照储存说明储存套件组件。保质期为12月。

血浆/血清外泌体提取试剂盒组成：

套件组件尺寸               规格（50T）            储存条件

ExoMag Exosome珠子        500 mg                  4℃

洗脱缓冲液                 5 mL                   室温

溶液A                     2x125 mL                4℃

样品预处理：

1. 细胞去除：将样品在4℃下以300 g的速度离心5分钟，将上清液转移到一个新的离心管中。对于无细胞的样品，可以跳过这一步骤。

2. 细胞和细胞碎片去除：将样品在4℃下以2000 g的速度离心10分钟，将上清液转移到一个新的离心管中。

3. 大颗粒物去除：将从步骤2获得的上清液在4℃下以14000 g的速度离心30分钟，将上清液转移到一个新的离心管中。

富集外泌体：

1. 取500 μL预处理后的样品（如果处理的样品体积低于500 μL，只需使用溶液A将样品体积补至500 μL），加入10 mg（±10%变异）的ExoMag外泌体磁珠到一个1.5 mL的离心管中。将离心管固定在平台摇床上，在室温下以17 rpm的速度孵育30分钟。

2. 将上述离心管放在磁分离架上，静置5秒钟，倒掉上清液。

3. 加入1 mL溶液A，通过倒置离心管混合，将其放在磁分离架上静置5秒钟，倒掉上清液。

4. 重复步骤3两次，保留ExoMag外泌体磁珠。

分离外泌体：

1. 向ExoMag外泌体磁珠中加入100 μL洗脱缓冲液，涡旋30秒钟。将离心管固定在平台摇床上，在室温下以17 rpm的速度孵育30分钟。

2. 将离心管放在磁分离架上，静置5秒钟，将上清液转移到一个新的1.5 mL离心管中。这个上清液中含有外泌体。

外泌体不应长时间存放在洗脱缓冲液中。如果需要长期存储，请使用超滤管（分子量截留率10 kDa）用PBS溶液替换洗脱缓冲液。

注意事项：

1、使用前请将外泌体抽提试剂（41202-A）充分混匀。

2、产品只针对血清/血浆样本，不适用其它体液或者是细胞培养上清中外泌体的抽提；如果需要进行细胞上清外泌体分离，请选用细胞培养上清外泌体快速抽提试剂盒。

3、如果想要进一步纯化外泌体，可以使用相应抗体包被的磁珠进行亲和纯化。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

https://www.amyjet.com/products/A-EXO006-50T.shtml

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BiogradeTech 重组人胰岛素Insulin，细胞培养级探索

重组人胰岛素为重组DNA技术生产的由51个氨基酸残基组成的蛋白质，宿主细胞为大肠杆菌。按干燥品计算，每1mg含重组人胰岛素不得少于27.5单位。重组人胰岛素中残余宿主DNA和宿主细胞蛋白质为与生产过程相关的、潜在的特异性杂质，必须在生产过程中严格控制，其限度应符合有关规定。

重组人胰岛素在临床中有着广泛的应用。首先，它被用作糖尿病治疗的关键药物。糖尿病患者常常需要通过注射胰岛素来调节血糖水平，而重组人胰岛素可以有效替代自然胰岛素，帮助患者维持正常的血糖水平。其次，重组人胰岛素还被用于胰岛素泵的治疗。胰岛素泵是一种便携式装置，能够按照预设的胰岛素输送方案，持续地将胰岛素注入患者体内，以更好地控制血糖。此外，重组人胰岛素还可以用于研究和临床试验中，以探索新的糖尿病治疗方法和策略。

本重组人胰岛素为细胞培养级全长序列的人胰岛素，分子量大约为5808，结构与天然来源的人胰岛素相同，常用作细胞培养的辅助成分，纯度为95.0～105.0%。

艾美捷重组人胰岛素，Insulin（细胞培养级别）：

目录号：A-CSH001

规格：25mg、100mg

储存：-20°C（36个月）

分子式：C₂s₇H₃g₃N₆sO₇S₆

分子量：5808

外观：白色粉末

活性：≥15 U/mg

纯度：95.0～105.0%

细菌内毒素：<0.01 EU/μg

残留宿主细胞蛋白：<10 ng/mg

重组人胰岛素，Insulin（细胞培养级别）用法：

胰岛素在无血清培养基中的浓度通常在5-20mg/L的范围内。合适的应根据具体的细胞系来选择浓度。重组人胰岛素以粉末形式提供，应在低于-18°C的温度下储存。在使用之前，应将其溶解在盐酸溶液（10mM）中以制备含有1-2mg胰岛素/1 ml。然后应通过过滤对溶液进行消毒，过滤后的溶液可在-20°C下储存6月。避免重复冻融循环。

该试剂仅用于科学研究领域，不适用于临床诊断或其他用途。

https://www.amyjet.com/products/A-CSH001-100mg.shtml

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BiogradeTech Mallory磷钨酸苏木素染色液使用方法

肌纤维是肌肉组织的组成部分，由肌细胞组成。根据其形态和功能特征，肌纤维可以分为平滑肌（也称为非横纹肌）、骨骼肌和心肌。有许多染色肌纤维的方法，例如Mallory的PTAH方法、Aniline Blue方法和磷钨酸-血红素（PTAH）方法。最初，当磷钨酸-血红素染色溶液被发明时，Mallory的PTAH方法包括各种磷钨酸-血红素方法。大约在1900年左右，Mallory将磷钨酸溶液和血红素染料结合在一起，发现这种组合对肌纤维有良好的染色效果。

如今广泛使用的染色溶液是Mallory的磷钨酸-血红素染色溶液（PTAH自然氧化法）。血红素可以通过PTAH方法进行化学氧化，但其保存时间较短，染色力容易降低。尽管自然氧化需要时间，但所得到的血红素可以在两年以上的时间内保持染色力，成为理想的染色溶液。它适用于中枢神经系统、一般组织结构以及使用标准固定剂固定的组织的染色。染色时间根据制备方法、使用的固定剂和所展示的组织结构而有所不同。

Mallory的磷钨酸-血红素染色溶液（PTAH化学氧化法）主要由PTAH氧化剂、草酸溶液和Mallory的PTAH染色溶液组成。Mallory的PTAH染色溶液是一种经过化学成熟的染料，在短时间内提供良好的染色力，不应长时间存储。它常用于展示横纹肌的横纹和诊断横纹肌肉瘤。横纹肌肉瘤呈现出多样的组织学变化，很难与未分化的间叶性肿瘤区分开来。通过使用磷钨酸-血红素染色，如果在肿瘤细胞的细胞质中发现蓝色的横纹，可以确认肿瘤具有横纹肌分化。该染色试剂盒还可用于染色炎症渗出物中的纤维素、DIC毛细血管中的纤维素和神经组织学。

艾美捷Mallory磷钨酸苏木素染色液相关参数：

Mallory磷钨酸苏木素染色液使用方法：

1. 将组织固定在10%福尔马林固定剂中，并进行常规脱水和包埋。

2. 切割4μm厚的石蜡切片，并进行常规脱蜡至水。

3. 在新鲜配制的PTAH氧化剂中氧化5分钟。

4. 用水简单冲洗。

5. 在草酸溶液中漂白1-2分钟。

6. 用自来水冲洗2分钟，然后用蒸馏水冲洗。

7. 在Mallory的PTAH染色溶液（化学氧化法）中孵育24-48小时（覆盖容器）。

8. 取出玻片，并迅速用95%乙醇洗去多余的染色溶液。

9. 进行常规脱水、透明化处理，并使用中性封片介质封片。

注意事项：

1. 如果横纹的蓝色不足或呈现明亮的红色，说明氧化时间不足或可能过度氧化，需要更换或重新配制染色溶液。

2. 染色后不要用水冲洗Mallory的PTAH染色溶液。在用95%乙醇洗涤时，应迅速进行，因为长时间用水或乙醇洗涤会洗掉磷钨酸-血红素的染色。

3. Mallory的PTAH染色溶液是一种渐进染色，不要过度染色。染色24小时后，可以取出玻片，在显微镜下观察染色程度。

4. 为了您的安全和健康，请在操作过程中穿实验服和一次性手套。

https://www.amyjet.com/products/A-CSH272-3.shtml

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BiogradeTech Weigert铁苏木素染色液的染色原理说明

在狭义上，结缔组织是指它所包含的三种纤维：胶原纤维、网状纤维和弹性纤维。其中，胶原纤维分布最广，含量最丰富。魏格特铁苏木精染色液是一种染色能力较强的染色液，主要由苏木精和三价铁组成氯化物。它在使用前混合使用，通常用于结缔组织染色，如Masson三色染色染色和Van Gieson染色。

铁苏木素染色液是一种常用的染色方法，广泛应用于组织学和病理学领域。本文将介绍铁苏木素染色液的制备方法、染色原理以及在实验中的应用。

铁苏木素染色液的制备需要按照一定比例混合铁氯化物、苏木素溶液、盐酸和蒸馏水。这些试剂的混合反应能够产生铁苏木素染色液。在制备过程中需要注意的是，铁苏木素染色液应当在使用前立即配制，不宜提前配制并长时间存放。因此，在实验前要确保所有试剂和设备的准备工作充分完成。

铁苏木素染色液的染色原理基于苏木素和铁离子的相互作用。苏木素是一种碱性染料，在酸性条件下与铁离子结合形成复合物，能够染色细胞核和一些细胞器。这种染色方法可用于观察组织中的细胞核形态、细胞器分布以及其他细胞结构的特征。

艾美捷Weigert铁苏木素染色液相关参数：

目录号：A-CSH271

规格：4×25mL、4×50mL、4μ

储存：10-30°C，避免暴露在光线下（1年）

Weigert铁苏木素染色液使用方法：

1.按照具体的实验要求进行操作。

2.一般用魏格特铁苏木精染色液染色5-10分钟，酸化后进行鉴别过度染色时使用乙醇。

注意事项：

1. Weigert的铁血红素苏木精染色溶液应在使用前立即配制，不应预先配制并长时间存放。

2. 上述试剂具有刺激性，请小心操作。

3. 为了您的安全和健康，请在操作过程中穿实验服和一次性手套。

该试剂仅用于科学研究领域，不适用于临床诊断或其他用途。

https://www.amyjet.com/products/A-CSH271-2.shtml

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BiogradeTech 伊红染色液（醇溶，0.25%）使用方法

曙红，又称赤藓红，是一种黄嘌呤染料，属于合成染料的一类。它是粉红色或桃红色的

粉末，通常与苏木精结合用于染色，以可视化的形态结构正常或病理组织。Eosin染色溶液（醇溶性，0.25%）是使用高质量的醇溶性曙红，使用简单，不需要使用有毒试剂，如汞或

甲醇。它通常用于对组织切片或培养的细胞进行染色，在染色后产生粉红色或红色的细胞质

染色。

艾美捷伊红染色液相关参数：

货号：A-CSH263

规格：100mL、500mL

储存：10-30°C，避免暴露在光线下（1年）

伊红染色液（醇溶，0.25%）使用方法：

一、样本制备

A. 石蜡切片制备：

1. 将玻片烘烤30-60分钟，用二甲苯（I）脱蜡5-10分钟。

2. 用二甲苯（II）脱蜡5-10分钟。

3. 用绝对乙醇洗涤1-5分钟。

4. 用95%乙醇洗涤1-5分钟。

5. 用75%乙醇洗涤1-5分钟。

6. 用自来水或蒸馏水冲洗。

B. 冰冻切片制备：

1. 无需脱蜡。固定后，直接用蒸馏水冲洗2-3分钟。

C. 细胞样本制备：

1. 使用4%多聚甲醛固定10-20分钟。

2. 用自来水冲洗两次，每次2分钟。

3. 用蒸馏水冲洗两次，每次2分钟。

二、染色

1. 使用苏木精染色溶液进行染色（根据染色结果和要求调整时间）。

2. 用75-85%乙醇洗涤30秒。

注意：如果用于免疫组化或其他染色方法的对比染色，应在完成上述其他染色步骤后进行苏木精染色。

三、脱水、清除和封片（可选）

1. 用95%乙醇（I）洗涤0.5-2分钟。

2. 用95%乙醇（II）脱水2-5分钟。

3. 用绝对乙醇（I）脱水2-5分钟。

4. 用绝对乙醇（II）脱水2-5分钟。

5. 用二甲苯（I）清除1分钟。

6. 用二甲苯（II）清除1分钟，然后用中性树脂封片。

7. 在显微镜下观察，细胞质应呈现粉红色或红色。

四、进行其他染色：

1. 对于免疫荧光染色或使用荧光染料（如Hoechst）进行染色，在苏木精染色后用70%乙醇洗涤两次。

2. 在PBS、生理盐水、TBS、TBST或其他用于免疫染色或荧光染料染色的溶液中浸泡5分钟。

3. 进行免疫荧光染色或使用其他荧光染料染色。

该试剂仅用于科学研究领域，不适用于临床诊断或其他用途。

https://www.amyjet.com/products/A-CSH263-100mL.shtml

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BiogradeTech 天青石蓝苏木素染色液使用方法&注意事项

纯明矾苏木精染色细胞核的主要缺点是其对随后应用任何酸性染料，常见于Van Gieson染色和Masson三色染色。在Van中使用酸性品红时Gieson染色，它可以去除大部分苏木精的颜色，使细胞核几乎看不见。在这种情况下使用铁苏木精可以抵消酸性品红的影响，达到满意的效果。目前，一种可靠的方法是将Azure B和明矾苏木精相结合。它的优点在于酸性Azure B溶液中的高铁盐增强了明矾苏木精和细胞核，导致细胞核染色更深。因此，耐酸性的目的可以是实现。

艾美捷天青石蓝苏木素染色液相关参数：

货号：A-CSH261

规格：2×50mL

储存：2-8°C，避免暴露在光线下（1年）

天青石蓝苏木素染色液使用方法：

1.逐渐用乙醇至水的方式脱除石蜡包埋的组织切片中的石蜡。

2. 将切片浸泡在Azure B染色溶液中5分钟。

3. 用蒸馏水冲洗。

4. 将切片浸泡在Mayer's血红素染色溶液中5分钟。

5. 用水冲洗至蓝色。

6. 根据需要继续进行后续步骤。

注意事项：

1.长时间孵育会导致染色强度降低，相应地应延长染色时间。

2. 使用染色溶液次数增多会加快染色强度的降低，需要延长染色时间。

3. 冰冻切片的染色时间应缩短，而在无缓冲福尔马林溶液中浸泡时间较长的组织和去钙化组织可能需要延长染色时间。

4. 为了您的安全和健康，请在操作过程中穿戴实验室服装和一次性手套。

该试剂仅用于科学研究领域，不适用于临床诊断或其他用途。

https://www.amyjet.com/products/A-CSH261-2.shtml