重组血管内皮生长因子B（VEGFB）参数及文献参考

来宝网 2023/11/22点击608次

血管内皮生长因子（VEGF），又称血管通透因子，这是生长因子家族的另一大成员，主要作用于血管内皮细胞。

VEGF是一种血管内皮细胞的特异性有丝分裂原，有很多种功能，被人熟知的是促进内皮细胞增生，它可以：

1、促进新生血管形成，使血管通透性增加，

2、促进细胞外基质变性、血管内皮细胞迁移等作用。

当我们体内的当血液循环不足时，VEGF可参与到回复组织供氧系统中去，在胚胎形成期，调控内皮细胞的增殖、迁移和存活，从而调控血管密度和大小，进而促进新生毛细血管的形成。

除此之外，VEGF家族还在淋巴管生成、炎症反应、造血作用、神经保护作用等领域，有着广泛的应用。

艾美捷重组血管内皮生长因子B（VEGFB）基本参数：

物种：鼠

替代名称：VEGF-B型;VEGFL;VRF;VEGF相关因子

源：大肠杆菌

标签信息：N-terminal His 标签

蛋白质类型：原核重组蛋白

基因名称：血管内皮生长因子B

理论分子量：17kDa

纯度：SDS-PAGE大于97%

存储缓冲区：20mM Tris，150mM NaCl，pH8.0，含有1mM EDTA，1mM DTT，0.01%SKL，5%海藻糖和Proclin300。

内毒素水平：<1.0 EU/μg（通过LAL法测定）

应用：阳性对照;免疫原;SDS-页面;JBS公司

运输条件：冰袋

存储：短期：-20°C;长期：-80°C。最大限度地减少冻融循环。

有效期：如果储存得当，可稳定保存 12 个月。

研究领域：细胞因子;肿瘤免疫;感染免疫;神经科学;

仅供研究使用。不可用于诊断程序、药物使用或用于人类或动物。

重组血管内皮生长因子B（VEGFB）文献参考：

Deciphering the Functions of Collapsin Response Mediator Protein 2 (CRMP2) in Nociceptive Spinal Neurotransmission

Boinon

The University of Arizona?ProQuest Dissertations Publishing (2022)

SARS-CoV-2 spike protein co-opts VEGF-A/neuropilin-1 receptor signaling to induce analgesia

Moutal, Martin, Boinon et al

Pain (2021) 162 (1), 243-252 DOI: 10.1097/j.pain.0000000000002097

https://www.amyjet.com/brand/Biomatik.shtml

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Rho 激活剂 II的用途及生物活性检测说明

G-switch™系列小G蛋白工具系列的开发侧重于创建针对内源性Rho家族蛋白和信号通路的高效试剂。与依赖于过表达或敲降目标蛋白的方法（例如，DNA转染显性负性或常活性Rho突变体，RNAi敲降）相比，G-switch™试剂能够迅速作用于内源性目标蛋白（根据产品而定，时间范围为分钟至小时），从而优化产生更具生理学相关性的反应的机会。G-switch™产品系列包括直接和间接调节Rho家族信号传导的试剂，因此提供了广泛的机制工具来研究这些关键的细胞功能。请访问Cytoskeleton公司的网站获取最新的G-switch™信息。

CN03的活性位点基于细菌细胞毒性坏死因子（CNF）毒素的催化结构域。催化结构域与一种专有的细胞穿透基团共价结合。CN03通过脱氨酰胺化位于这些GTP酶的Switch II区域的谷氨酰胺-63来激活Rho GTP酶亚型（1）。这种修饰将谷氨酰胺-63转变为谷氨酸，从而阻断了固有和GAP刺激的GTP酶活性，导致Rho的常活性（2）。在添加到培养基后的2-4小时内，CN03显著增加了GTP结合的RhoA水平。此外，这种激活剂的有针对性作用使其比经典的间接激活剂（例如，LPA）更具吸引力，后者同时激活其他信号通路（例如，Ras、PI3K和PLC）。

艾美捷Rho 激活剂 II用途包括：

Rho通路激活剂

研究Rho活化对细胞运动的影响

研究Rho活化对肌动蛋白细胞骨架重排的影响

研究 Rho 激活对与其他信号转导通路串扰的影响

材料：

CN03是在细菌表达系统中制备的。重组蛋白的分子量为118 kDa，并在其氨基端含有六个组氨酸残基（His标签）。经过固定金属亲和层析（图1），已经纯化至80%以上的纯度。每个小瓶中提供的是白色冻干固体，含有20 µg的CN03蛋白。该物质已经在RhoA激活的生物学检测中显示出活性（见下文）。在RhoA激活的生物学检测中，一个包含单点突变的蛋白质失活突变体显示出零活性（未显示数据）。

储存和重溶：

在常温下运输。冻干的蛋白质可以在4°C下干燥储存6个月。CN03的冻干颗粒可能看起来松散且轻包装，但这不会影响CN03的质量或性能。为了重溶，简单离心以收集管底的产物，然后将每个小瓶中的产物重悬于200 µl无菌水中，放在冰上静置10分钟，轻轻上下吸移混匀，得到0.1 µg/µl的浓度。在使用之前，CN03应进一步与无血清培养基稀释至0.25至5 µg/ml的浓度（由用户确定，参见图2和表1）。通常，在3小时内，1 µg/ml的浓度能够在多种细胞类型中产生强大的RhoA激活。重溶的激活剂可以在液氮中快速冷冻，并在–70°C下储存长达6个月。

Rho 激活剂 II生物活性检测：

在37°C孵育2小时后，CN03（1 µg/ml / 相当于10 µl/ml）显示出在瑞士3T3细胞中引发了十倍的RhoA激活（图2和图3）和应力纤维诱导（图4）。在表1中详细介绍了在几种细胞类型中激活Rho的推荐条件。

活性检测方法：瑞士3T3细胞激活

1. 在两个含有10 ml DMEM / 10%胎牛血清（FBS）的10 cm²培养皿中，将瑞士3T3细胞以37°C / 5% CO2培养至30%的密度。

2. 将培养基更换为DMEM / 1% FBS，饥饿细胞24小时，然后转移到DMEM / 0% FBS培养24小时。

3. 简要离心CN03管，使其沉淀在管底。

4. 用200 µl无菌水（0.1 µg/µl）重溶CN03-请参见上面的储存和重溶部分。

5. 用温暖的DMEM将CN03稀释至1 µg/ml。

6. 吸去培养皿中的培养基，将含有CN03的培养基转移到一个培养皿中。

7. 只向第二个培养皿中加入温暖的DMEM。这是对照组，代表未刺激的细胞。

8. 在37°C和5% CO2下孵育2小时。通过G-LISA®分析（Cat. # BK124；图2和图3）或细胞形态学（Cat. # PHDG1；图4）来检测Rho活性。

Rho 激活剂 II文献参考：

1. Schmidt G., et al. 1997. Gln 63 of Rho is deamidated by Escherichia coli cytotoxic necrotizing factor-1. Nature. 387, 725-729.

2. Flatau G., et al. 1997. Toxin-induced activation of the G protein p21 Rho by deamidation of glutamine. Nature. 387, 729-733.

https://www.amyjet.com/products/CN03-A.shtml

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芬戈莫德（盐酸盐）技术信息说明及文献参考

芬戈莫德是一种免疫调节剂，是鞘氨醇-1-磷酸（S1P）受体激动剂FTY720磷酸的前药形式。10008639）和肉豆蔻素的衍生物（#63150）。1它选择性抑制钙依赖性胞质磷脂酶A2超过钙依赖性PLA2（iPLA2）和分泌型PLA2（V型）当以800pmol的浓度使用时，当以1.0至3μM的浓度使用时抑制S30P裂解酶。2,3芬戈莫德（1mg / kg）减少小鼠循环淋巴细胞的数量。3当以 0.3 至 3 mg/kg 的剂量给药时，它会增加大鼠的皮肤同种异体移植物存活率。4芬戈莫德（0.3mg / kg）可预防实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）大鼠模型中的疾病发展，该模型由完全弗氏佐剂中的牛脊髓乳液免疫诱导。1含有芬戈莫德的制剂已用于治疗多发性硬化症。（本品不适合人类或兽医使用。）

艾美捷芬戈莫德（盐酸盐）#10006292技术信息：

正式名称：2-氨基-2-[2-（4-辛基苯基）乙基]-1,3-丙二醇盐酸盐

CAS 编号：162359-56-0

同义词：FTY720型

分子式：C19H33NO2 • HCl

配方重量：343.9

纯度：≥98%

配方：结晶固体

溶解度：

DMF：20毫克/毫升

DMSO：20毫克/毫升

乙醇：20毫克/毫升

乙醇：PBS （pH 7.2）（1：1）： 0.2 mg/ml

存储：-20°摄氏度

航运：美国大陆的室温;其他地方可能有所不同

稳定性：≥ 4 年

芬戈莫德（盐酸盐）文献参考和产品引用：

Product Description References

1. Brinkmann, V., Davis, M.D., Heise, C.E., et al. The immune modulator FTY720 targets sphingosine 1-phosphate receptors. J. Biol. Chem. 277(24), 21453-21457 (2002).

2. Payne, S.G., Oskeritizian, C.A., Griffiths, R., et al. The immunosuppressant drug FTY720 inhibits cytosolic phospholipase A2 independently of sphingosine-1-phosphate receptors. Blood 109(3), 1077-1085 (2007).

3. Bandhuvula, P., Tam, Y.Y., Oskouian, B., et al. The immune modulator FTY720 inhibits sphingosine-1-phosphate lyase activity. J. Biol. Chem. 280(40), 33697-33700 (2005).

4. Shimizu, H., Takahashi, M., Kaneko, T., et al. KRP-203, a novel synthetic immunosuppressant, prolongs graft survival and attenuates chronic rejection in rat skin and heart allografts. Circulation 111(2), 222-229 (2005).

Product Citations

Smith, M.A., Plyler, E.S., Dengler-Crish, C.M., et al. Nodes of ranvier in glaucoma. Neuroscience 15(390), 104-118 (2018).

https://www.amyjet.com/products/10006292-1.shtml

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罗格列酮Rosiglitazone在心血管疾病及糖尿病中的潜力探索

罗格列酮是过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）的激动剂。1它在报告基因测定中激活 PPARγ1 和 PPARγ2 （EC50s = 30 和 100 nM）。罗格列酮在10mM的基于细胞的报告基因测定中选择性地激活含有PPARγ的配体结合域（LBD）的嵌合体，而不是PPARα和PPARδ。当以 3 μM 的浓度使用时，它会诱导 C10H1T2/1 干细胞分化为脂肪细胞。罗格列酮也是长链酰基辅酶A合成酶4（ACSL4;集成电路50= 0.5μM）。2,3当在饮用水中以 3.4 mg/ml 的浓度使用时，它抑制 Gpx1 Cre-lox 表达小鼠胚胎成纤维细胞（Pfa4）细胞和 Pparg 敲除（KO）细胞中 RSL0 诱导的铁死亡，并增加 Gpx0125 KO 小鼠模型的铁死亡存活率。它降低链脲佐菌素（STZ;商品编号1）和高碳水化合物和高脂肪饮食，当以1mg / kg的剂量给药时。4含有罗格列酮的制剂已被用于改善 2 型糖尿病治疗中的血糖控制。（本品不适合人类或兽医使用。）

艾美捷罗格列酮#71740技术信息：

正式名称：5-[[4-[2-（甲基-2-吡啶基氨基）乙氧基]苯基]甲基]-2,4-噻唑嘌啶二酮

CAS 编号：122320-73-4

同义词：巴西雷亚尔 49653

分子式：C18H19N3O3S

配方重量：357.4

纯度：≥98%

配方：结晶固体

溶解度：

DMF：25毫克/毫升

DMSO：34毫克/毫升

DMSO：PBS （7.2 pH）（1：3）：0.5 mg/ml

乙醇：1毫克/毫升

λmax：248， 311 纳米

运输和储存信息：

存储：-20°摄氏度

航运：美国大陆的室温;其他地方可能有所不同

稳定性：≥ 4 年

罗格列酮Rosiglitazone文献参考和产品引用：

Product Description References

1. Lehmann, J.M., Moore, L.B., Smith-Oliver, T.A., et al. An antidiabetic thiazolidinedione is a high affinity ligand for peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ). J. Biol. Chem. 270(22), 12953-12956 (1995).

2. Kim, J.-H., Lewin, T.M., and Coleman, R.A. Expression and characterization of recombinant rat Acyl-CoA synthetases 1, 4, and 5. Selective inhibition by triacsin C and thiazolidinediones. J. Biol. Chem. 276(27), 24667-24673 (2001).

3. Doll, S., Proneth, B., Tyurina, Y.Y., et al. ACSL4 dictates ferroptosis sensitivity by shaping cellular lipid composition. Nat. Chem. Biol. 13(1), 91-98 (2017).

4. Zhou, J.Y., Zhou, S.W., Zhang, K.B., et al. Chronic effects of berberine on blood, liver glucolipid metabolism and liver PPARs expression in diabetic hyperlipidemic rats. Biol. Pharm. Bull. 31(6), 1169-1176 (2008).

Product Citations

Schmidleithner, L., Thabet, Y., Schönfeld, E., et al. Enzymatic activity of HPGD in Treg cells suppresses Tconv cells to maintain adipose tissue homeostasis and prevent metabolic dysfunction. Immunity 50(5), 1232-1248 (2019).

Tiefenbach, J., Magomedova, L., Liu, J., et al. Idebenone and coenzyme Q10 are novel PPARα/γ ligands, with potential for treatment of fatty liver diseases. Dis. Model Mech. 11(9), (2018).

Schaedlich, K., Gebauer, S., Hunger, L., et al. DEHP deregulates adipokine levels and impairs fatty acid storage in human SGBS-adipocytes. Sci. Rep. 8(1), 3447 (2018).

https://www.amyjet.com/products/71740-10.shtml

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超灵敏小鼠胰岛素ELISA试剂盒；样品量小、高灵敏度高精确度

小鼠胰岛素 ELISA（超灵敏）用于仅使用 5 μL 样品体积来量化血清、血浆、细胞培养物和液体中的小鼠胰岛素水平。

艾美捷超灵敏小鼠胰岛素ELISA试剂盒（#90080）基本参数：

货号# 90080

样本量 5微升

样品类型血清、血浆、细胞培养物或液体

测试 96 孔（12 x 8 孔联排）

试剂液体形式（标准品除外）

敏感性 0.05纳克/毫升

检测范围低范围检测：0.1 - 6.4 ng/mL 宽范围检测：0.1 - 12.8 ng/mL 高范围检测：1 - 64 ng/mL

精度批内精密度 CV ≤ 10.0%

批间精密度 CV ≤ 10.0%

存储 2-8°摄氏度

仅供研究使用

超灵敏小鼠胰岛素ELISA试剂盒特点：

1、样品量小：仅需 5 μL 样品，是少量小鼠样品的理想选择。

2、高灵敏度和精确度：该检测方法使用5 µL样本，灵敏度为0.05 ng/mL，变异系数（CV）≤ 10.0%。

3、宽动态范围：范围为 0.1 - 64.0 ng/mL，仅使用 5 μL 样品。使用相同的试剂盒进行低胰岛素和高胰岛素检测。

4、具体而快速：这是一种易于使用的试剂盒，对小鼠胰岛素具有高度特异性，可在 3.5 小时内获得结果。

超灵敏小鼠胰岛素ELISA试剂盒典型标准曲线：

文献引用：

Wang, Dongdong, et al. “GDF15 Promotes Weight Loss by Enhancing Energy Expenditure in Muscle.” Nature 2023; 619: 143–150.

Slieker, Roderick C., et al. “Identification of Biomarkers for Glycaemic Deterioration in Type 2 Diabetes.” Nature Communications 2023; 14: 2533.

Inia, José A., et al. “Semaglutide Has Beneficial Effects on Non-Alcoholic Steatohepatitis in Ldlr-/-.Leiden Mice.” International Journal of Molecular Sciences2023; 24: 8494.

https://www.amyjet.com/brand/Crystal-Chem.shtml

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高效转染和高表达HEK293细胞转染用培养基

HEK293细胞是人胚肾细胞的一种细胞系，具有易于培养和高转染效率的特点，因此被广泛用于表达外源基因、蛋白表达和药物筛选等研究领域。然而，培养基的成分和条件对于HEK293细胞的生长和转染效率有着重要影响。因此，优化和选择适合HEK293细胞转染的培养基是实现高效转染和高表达的关键。

培养基成分的优化：

HEK293细胞转染用培养基的优化包括基础培养基的选择、补充物的添加和浓度的调整。常用的基础培养基包括DMEM、RPMI 1640和Opti-MEM等，其中每种培养基都有其特定的优点和适用范围。补充物如胎牛血清、FBS、抗生素和缓冲剂等的添加可以提供细胞所需的营养物质和稳定的环境，从而增强细胞的生长和转染效率。此外，调整补充物的浓度也是优化培养基的重要步骤，需要根据具体实验要求和细胞的特性进行调整。

转染效率的影响因素：

除了培养基的成分外，转染效率还受到多种因素的影响，包括细胞密度、转染试剂的选择和浓度、转染时间和温度等。细胞密度的控制是实现高效转染的关键之一，通常在细胞达到对数生长期时进行转染。转染试剂的选择和浓度也会对转染效果产生显著影响，常用的转染试剂包括聚合物转染试剂、脂质体和电穿孔等。此外，转染时间和温度的合理选择也能够提高转染效率和细胞存活率。

应用：

HEK293细胞转染用培养基的优化不仅可以提高基因转染和蛋白表达的效率，还可以用于功能性实验、蛋白互作研究和药物筛选等领域。通过合理选择和优化培养基，研究人员可以在HEK293细胞转染实验中获得更准确、可靠的结果，推动相关研究的进展。

艾美捷HEK293细胞转染用培养基基本参数：

目录号：A-EXO003

规格：500 mL

储存：在4°C的黑暗中储存。（12个月）

HEK293细胞转染用培养基的优化是实现高效转染和高表达的关键。通过选择适当的基础培养基、添加合适的补充物和调整其浓度，结合合理的转染条件，可以提高HEK293细胞的转染效率和表达水平。这为相关研究提供了重要的工具和方法，促进了HEK293细胞在生物医学研究中的应用。

HEK293细胞转染用培养基相关研究：

Cat # 名称规格储存条件培养及类型

A-EXO001 HEK293 Enhance Feed Medium 100 mL Store in dark at 4°℃ Feed medium

A-EXO002 HEK293 ExpEnhance SF Medium 1000 mL Store in dark at 4℃ Growth medium

A-EXO003 HEK293 TransferHelper SF Medium 500 mL Store in dark at 4°℃ Transfection medium

该试剂仅用于科学研究领域，不适用于临床诊断或其他用途。

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重组人FGF8b/成纤维细胞生长因子8b,无动物源&无载体蛋白助力科研

FGF8b是成纤维细胞生长因子（FGF）家族的成员。FGF家族成员具有广泛的促有丝分裂和细胞存活活性，并参与多种生物学过程，包括胚胎发育、细胞生长、形态发生、组织修复、肿瘤生长和侵袭。FGF8在正常成年人中表达有限，但在生殖和泌尿生殖道、外周白细胞和骨髓造血细胞中表达水平较低。FGF8b是FGF8的亚型之一，参与许多生物学过程，包括血管生成。

艾美捷重组人FGF8b/成纤维细胞生长因子8b,无动物源&无载体蛋白基本参数：

来源：大肠杆菌。

纯度：经SDS-PAGE和Ni-NTA层析测定，纯度>95%。

生物活性：通过其诱导3T3细胞增殖的能力进行测量。此效应的ED50为1.4-3.8 ng/mL。重组人FGF8b的比活性>2x10⁵ IU/mg。

内毒素：LAL方法测定，每1 μg蛋白内毒素<0.1 EU。

氨基酸序列：MQHVREQSLVTDQLSRRLIRTYQLYSRTSGKHVQVLANKRINAMAEDGDPFAKLIVETDTFGSRVRVRGAETGLYICMNKKGKLIAKSNGKGKDCVFTEIVLENNYTALQNAKYEGWYMAFTRKGRPRKGSKTRQHQREVHFMKRLPRGHHTTEQSLRFEFLNYPPFTRSLRGSQRTWAPEPR，C-末端带有多组氨酸标签

配方：从无菌过滤的1×PBS水溶液中冻干，pH 8.0。

重组人FGF8b的SDS-PAGE分析

重组人FGF8b/成纤维细胞生长因子8b,无动物源&无载体蛋白使用方法：

1.打开前，建议以3000-3500 rpm离心5分钟。

2.在无菌蒸馏水中重新配制至0.1-1.0 mg/mL的浓度。让溶液在室温下静置至少20分钟，以确保完全溶解。避免剧烈涡流。

3.复原溶液可在2-8°C下储存长达1周。

4.对于长期储存，建议用载体蛋白（如0.1%BSA、10%FBS或5%HSA）将溶液进一步稀释至不低于10μg/mL的浓度，并等分试样在-20°C至-80°C下储存3-6个月。如果需要无血清实验，可以使用5%海藻糖溶液作为载体。避免重复冻融循环

仅供研究使用。不可用于诊断程序、药物使用或用于人类或动物。

https://www.amyjet.com/products/C-CYP310.shtml

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制备方法丨重组人FGF8b/成纤维细胞生长因子8b,无动物源&无载体蛋白

成纤维细胞生长因子8b（FGF8b）是一种重要的细胞信号分子，对于胚胎发育、组织修复和再生过程中的细胞增殖和分化起着关键作用。然而，传统的获得FGF8b的方法通常依赖于动物源和载体蛋白，限制了其广泛应用。本文介绍了一种无动物源和无载体的重组人FGF8b的制备方法，并探讨了其在生物医学研究和临床应用中的潜力。

引言：

成纤维细胞生长因子家族是一类重要的细胞信号分子，参与了多种生物学过程，包括胚胎发育、细胞增殖和分化、血管生成等。FGF8b作为FGF家族的成员之一，在胚胎发育中起着特别重要的调控作用。然而，由于传统制备FGF8b的方法存在一些局限性，如动物源的污染和载体蛋白的不可避免性，研究人员一直在寻求一种更纯净、可靠的制备方法。

无动物源的重组人FGF8b制备方法：

近年来，通过基因工程技术和重组蛋白表达系统的进展，研究人员成功地开发了一种无动物源的重组人FGF8b制备方法。该方法利用大肠杆菌作为表达宿主，通过人工合成的FGF8b基因进行转染和表达。由于大肠杆菌的广泛应用和高效表达系统的成熟，这种方法能够高效地产生大量纯净的重组人FGF8b蛋白。

无载体的重组人FGF8b制备方法：

此外，为了避免载体蛋白对FGF8b的影响和副作用，研究人员还开发了一种无载体的重组人FGF8b制备方法。该方法利用特殊的表达系统和纯化技术，直接获得纯净的重组人FGF8b蛋白，而无需使用任何载体蛋白。这种方法不仅提高了FGF8b的纯度和活性，还避免了载体蛋白可能引起的免疫反应和其他不良影响。

潜力与应用：

无动物源和无载体的重组人FGF8b在生物医学研究和临床应用中具有广阔的潜力。首先，它可以用于研究FGF8b在胚胎发育和组织修复中的作用机制，为相关疾病的治疗提供理论基础。其次，无动物源和无载体的FGF8b可以作为治疗性蛋白用于组织工程、再生医学和干细胞治疗等领域。通过合理的剂量和途径，它可以促进细胞增殖和分化，加速组织修复和再生过程。

艾美捷重组人FGF8b/成纤维细胞生长因子8b,无动物源&无载体蛋白基本参数：

来源：大肠杆菌。

纯度：经SDS-PAGE和Ni-NTA层析测定，纯度>95%。

生物活性：通过其诱导3T3细胞增殖的能力进行测量。此效应的ED50为1.4-3.8 ng/mL。重组人FGF8b的比活性>2x10⁵ IU/mg。

内毒素：LAL方法测定，每1 μg蛋白内毒素<0.1 EU。

配方：从无菌过滤的1×PBS水溶液中冻干，pH 8.0。

无动物源和无载体的重组人FGF8b是一种潜力巨大的成纤维细胞生长因子。通过无动物源的制备方法和无载体的纯化技术，研究人员可以获得高纯度、高活性的FGF8b蛋白，为其在生物医学研究和临床应用中的广泛应用提供了可行的方案。未来的研究将进一步探索其作用机制和应用领域，推动相关领域的发展和创新。

仅供研究使用。不可用于诊断程序、药物使用或用于人类或动物。

https://www.amyjet.com/products/C-CYP310.shtml

推荐仪器

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