来宝网 2023/9/28点击830次
高活性荧光素——异硫氰酸荧光素
异硫氰酸荧光素分子式：
艾美捷异硫氰酸荧光素规格：
分子式：C21H11NO5S
分子量：389.38
包装规格：100mg
纯度：≥95%（HPLC）
光谱特性：Ex/Em=490/525 nm
稳定性：-20°C下1年，干燥，避光。
反应特点：
异硫氰酸荧光素（FITC）具有比较高的活性，通常来说，在固相合成过程中引入该种荧光基团相对于其他荧光素要更容易，并且反应过程中不需要加入活化试剂。可以用来修饰蛋白质、多肽以及其他活性基团材料或者小分子。
异硫氰酸荧光素相关研究：
AT 655琥珀酰亚胺酯 AT 655 NHS Ester
别藻蓝蛋白-链垂亲和素 APC-Streptavidin
VIC琥珀酰亚胺酯 VIC
RPE-Cy7串联染料 RPE-Cy7 Tandem
R-PE链霉亲和素(0.5 mg/mL) R-PE Streptavidin (0.5 mg/mL)
ROX参比染料 ROX Reference Dye
预活化，RPE-Cy7 Preactivated RPE-Cy7
预活化，RPE-Cy5.5 Preactivated RPE-Cy5.5
预活化，RPE-Cy5 Preactivated RPE-Cy5
预活化，PerCP-Cy5.5 Preactivated PerCP-Cy5.5
预活化的PE[R-藻红蛋白] Preactivated PE [R-Phycoerythrin]
预活化，APC-AF750 Preactivated APC-AF750
预活化，APC-AF700 Preactivated APC-AF700
https://www.amyjet.com/products/B-CHM100-100mg.shtml
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Calcein-AM/PI，活细胞/死细胞双染试剂盒染色方案
Calcein-AM是一种常用的对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂，发绿色荧光（Ex=490 nm, Em=515 nm）。 因其在传统的Calcein（钙黄绿素）基础上引入乙酰甲氧基甲酯（AM）基团，增加了疏水性，使其能够轻易穿透活细胞膜。一旦进入细胞后Calcein-AM（本身不发荧光）被细胞内的酯酶剪切形成膜非渗透性的极性分子Calcein，从而被滞留在细胞内并发出强绿色荧光。与其它同类试剂（如BCECF-AM和CFDA)相比，由于Calcein, AM细胞毒性极低，适合用于活细胞染色的荧光探针，而且不会抑制任何的细胞功能，如增殖和淋巴球的趋化性。
由于死细胞缺乏酯酶，Calcein-AM仅用于对活细胞的细胞生存能力测试和短期标记。因此，Calcein-AM常常与死细胞荧光探针如碘化丙啶（PI）等联合使用，同时进行活细胞和死细胞的荧光双重染色。碘化丙啶（Propidium iodide，PI）不能穿过活细胞的细胞膜，仅能穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核，并嵌入细胞的DNA双螺旋从而产生红色荧光（Ex=535 nm, Em=617 nm），因此PI仅对死细胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激发，因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。而用545 nm激发，仅可观察到死细胞。本试剂盒适用于荧光显微镜、荧光酶标仪、流式细胞仪以及其他荧光检测系统。
艾美捷的一款基于Calcein AM和PI的活死细胞双染试剂盒(B-CHK103)，本染色方法适用于荧光显微镜、荧光酶标仪等微孔板荧光扫描设备、流式细胞仪或其他的荧光设备。本染色方法适用于大多数真核细胞，包括贴壁细胞和某些组织样本，但不包括细菌和酵母样本。
Calcein-AM/PI，活细胞/死细胞双染试剂盒组件和存储：
注：500T是指当使用Calcein AM的2μmol/L工作溶液/PI的Landa工作溶液4.5μmol/L时可实现的检测次数，每次使用总计100μL。
Calcein-AM/PI，活细胞/死细胞双染试剂盒染色方案：
1、制备1mM Calcein AM储备溶液。将200μL二甲基亚砜加入含有200μg Calcein AM粉末的试管中，并使用移液管涡旋溶解。将溶液储存在避光的地方，并尽快使用，以避免重复的冻融循环。
2、使用前将Calcein AM储备溶液和PI储备溶液置于室温。使用PBS制备工作溶液。
1）Calcein AM工作溶液的推荐浓度为2μmol/L，PI工作溶液的建议浓度为4.5μmol/L
2）工作溶液浓度可以根据细胞的具体要求进行调整，建议在使用前立即准备染色工作溶液。
3）将100μL染色工作溶液与200μL细胞悬浮液混合，在37°C下孵育15分钟。
4）观察显示黄绿色荧光的活细胞和显示红色荧光的死细胞，同时在490±10nm的激发下。此外，在545的激发下单独观察死细胞nm。
仅供研究使用，不用于人类或临床诊断。
https://www.amyjet.com/products/B-CHK103-500T.shtml
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脂肪酸摄取试剂盒应用：快速和敏感，简单方便
脂肪酸摄取
长链脂肪酸(LCFA)作为β-氧化的底物是动物重要的燃料来源，是许多不同细胞结构的基石。长链未酯化脂肪酸(LCFA)通过膜转运蛋白(CD36、FABP等)转运到细胞中，细胞中LCFA水平升高在糖尿病、肥胖相关疾病、心血管疾病和某些形式的癌症中很常见。因此，脂肪酸摄取是代谢性疾病治疗的重要靶点，也是代谢研究的重要课题。Assay Genie的基于细胞的脂肪酸摄取检测试剂盒（cat#BA0184）利用荧光脂肪酸类似物，该类似物被脂肪酸转运蛋白摄取并在细胞内积累。加入荧光猝灭试剂以阻断培养基中细胞外的荧光信号。细胞摄取脂肪酸类似物，通过检测λex/em = 488/523nm处荧光信号的增加评估细胞中的脂肪酸摄取活性，并进行激活剂和抑制剂的筛选。
艾美捷脂肪酸摄取试剂盒：
货号 BA0184
名称 Fatty Acid Uptake Assay Kit 脂肪酸摄取试剂盒
规格 100 Tests
样本 脂肪细胞和其他脂肪酸转运细胞
脂肪酸摄取试剂盒应用：
① 全细胞长链脂肪酸摄取的测定。
② 评价配体或药物对脂肪酸运输的影响。
优势：
安全：非放射性测定。
快速和敏感：同质“添加-读取”试验。无需洗涤，裂解或染色步骤。
简单方便：可以自动作为高通量分析脂肪酸运输和调节筛选细胞。
图. 3T3-L1细胞脂肪酸摄取测定：将3T3-L1细胞以每孔60,000个细胞的密度接种，并进行饥饿处理。左上方：在无胰岛素和存在160 nM胰岛素以及30 μM竞争剂2-溴棕榈酸酯的情况下，3T3-L1细胞的分化和未分化活性。右上方：3T3-L1脂肪细胞对胰岛素的脂肪酸摄取增加。左下方：2-溴棕榈酸酯的脂肪酸转运抑制曲线。抑制剂与工作试剂一起加入，而不是在30分钟的预孵育期间加入。右下方：槲皮素的脂肪酸转运抑制曲线。抑制剂在运行前孵育30分钟。
https://www.amyjet.com/products/BA0184.shtml
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脂肪酸氧化检测试剂盒，助力脂质代谢
脂肪酸氧化
脂肪酸氧化（Fatty Acid Oxidation，FAO）是肉碱棕榈酰转移酶 1和2（CPT1和CPT2）将长链脂肪酸转运到线粒体基质后经羟酰基辅酶a氧化为乙酰辅酶a、NADH和FADH2并生成能量的过程，脂肪酸氧化分为四步：
1）酰基辅酶A脱氢酶催化脱氢反应。
2）烯酰辅酶A水合酶催化水合作用，通过双键添加水。
3）3-羟酰基-辅酶A脱氢酶催化脱氢反应，产生NADH。
4）β-酮硫解酶催化硫酯裂解，裂解末端乙酰基辅酶A基团并形成新的酰基辅酶 A，新酰基辅酶A比原酰基辅酶A短两个碳原子。
脂肪酸β-氧化系统在人类中的重要性通过一组称为脂肪酸氧化障碍（FAODs）的遗传疾病得到了体现。FAODs是一类脂肪酸运输和氧化缺陷的异质性疾病群，以常染色体隐性遗传方式传递，临床表现范围广泛。此外，证据表明，胎儿发育期间对FAO活性的调节不仅对胎儿生命至关重要，而且对成年期的健康和疾病也有影响。因此，FAO活性的测量为许多疾病的病理生理和代谢基础提供了有价值的见解。Assay Genie的非放射性FAO检测试剂盒基于底物辛酰辅酶A的氧化反应。产生的NADH与还原反应产生的四唑盐INT结合形成甲瓒。甲醛产物在492nm处表现出最大吸收，因此甲瓒的吸收强度与增加的FAO活性成正比。
艾美捷脂肪酸氧化检测试剂盒：
货号 BR00001
名称 Fatty Acid Oxidation Assay 脂肪酸氧化检测试剂盒
规格 48 assays
样本 细胞裂解液，组织裂解液
脂肪酸氧化检测试剂盒研究领域：
对健康和病理状态下的代谢途径和过程进行研究（脂质代谢）。 研究信号转导途径； 研究遗传性疾病，例如脂肪酸氧化障碍（FAODs）； 研究心血管疾病，例如心力衰竭； 研究胎儿发育期间的细胞能量代谢； 研究脂肪酸氧化在癌症代谢中的意义。
图：脂肪酸氧化检测:从健康仓鼠心脏和与心力衰竭相关的TO2仓鼠模型心脏制备组织裂解物。裂解物被用于测定，脂肪酸氧化水平被量化。
https://www.amyjet.com/products/BR00001.shtml
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游离脂肪酸检测试剂盒荧光测定法
除了脂肪酸摄取和脂肪酸氧化检测试剂盒，Assay Genie的游离脂肪酸检测试剂盒提供了一个简单的，一步和高通量测定游离脂肪酸。在这个实验中，游离脂肪酸被酶转化为酰基辅酶a，随后转化为H2O2。所得的H2O2与特定的染料反应形成粉红色的产物。570nm处的光密度或荧光强度(530/585 nm)与样品中游离脂肪酸浓度成正比。
艾美捷游离脂肪酸检测试剂盒：
货号 BA0101
名称 Free Fatty Acid Measurement Kit 游离脂肪酸检测试剂盒
规格 100 assays
样本 血清，血浆，尿液，唾液，牛奶，细胞培养，食品
应用 用于脂肪酸的定量测定及药物对其代谢作用的评价
游离脂肪酸检测试剂盒荧光测定法：
荧光测定程序类似于比色程序，不同之处在于0、30、60和100μM标准和使用黑色96阱板。读取λex=530 nm和λem=585 nm时的荧光强度。
注：如果比色法测定中计算的样品游离脂肪酸浓度高于1000μM或荧光法测定中的游离脂肪酸含量高于100μM，则在测定缓冲液中稀释样品并重复测定。将结果乘以稀释系数n.CALCULATION从标准值中减去空白值（#4），并根据标准浓度绘制AOD或AF。
RsaMpue和Rmuk分别是样品和缓冲空白的光密度或荧光强度读数。n是样品稀释因子。需要但未提供的材料移液装置、离心管、透明平底无涂层96孔板（例如VWR目录号82050-760）、光密度读板器；黑色平底无涂层96孔板（例如VWR目录号82050-676）、荧光板读取器。对于牛奶固体样品，0.45μm PTFE注射器过滤器和5%异丙醇，5%Triton X-100溶液。
出版物参考：
1. Hwang I et al (2012) Catalase deficiency accelerates diabetic renal injury through peroxisomal dysfunction. Diabetes61(3):728-738.
2. Jelinek D et al (2012) The Niemann-Pick C1 gene is downregulated in livers of C57BL/6J mice by dietary fatty acids, butnot dietary cholesterol, through feedback inhibition of the SREBP pathway. J Nutr 142(11):1935-1942.
3. Seo, CW et al (2011). Antihyperlipidemic and body fat-lowering effects of silk proteins with different fibroin/sericincompositions in mice fed with high fat diet. J Agric Food Chem 59(8):4192-4197.
https://www.amyjet.com/products/BA0101.shtml
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细胞增殖/凋亡/毒性衰老损伤检测，全面了解细胞状态
艾美捷丨Biogradetech全面覆盖细胞增殖、细胞毒性、细胞凋亡、细胞老化、氧化损伤等方面的检测应用。
一、细胞增殖试验
细胞增殖导致许多重要的变化，包括DNA合成、细胞代谢增加和增殖特异性蛋白表达。基于荧光染色技术，Biogradetech细胞增殖产品可以直接从DNA水平准确检测细胞增殖状态，同时还可以通过细胞代谢水平高通量检测细胞增殖状态。该试剂盒包含一个专/利的增殖阴性对照，是一个好的解决非标准化的增殖试验结果。目前主要包括EdU和CCK8两种常用的检测方法。
图： CCK8检测原理图
1、EdU法细胞增殖成像分析试剂盒（绿色荧光） 100T D-AKK2030
2、EdU法细胞增殖成像分析试剂盒（红色荧光） 100T D-AKK2031
3、超敏型细胞增殖检测试剂（CCK-8） 10000T D-AKE106
二、细胞凋亡检测
细胞凋亡是细胞对环境的生理和病理刺激信号、环境条件的变化或对姑息性损伤的有序变化作出反应的一种死亡过程。细胞凋亡涉及DNA断裂、细胞膜结构、线粒体膜电位和蛋白表达等一系列形态学和分子变化。Biogradetech开发了一系列用于细胞凋亡多维分析的试剂盒。
1、一步法，TUNEL细胞凋亡检测试剂盒（绿色荧光） 50T D-AKK2010
2、一步法，TUNEL细胞凋亡检测试剂盒（红色荧光） 50T D-AKK2011
3、Annexin V-AF 488/PI双染细胞凋亡检测试剂盒 50T D-AKE0002
三、细胞毒性衰老损伤的检测
除了常见的增殖、凋亡指标外，Biogradetech还拥有细胞毒性、衰老、迁移、侵袭、DNA损伤等流行指标的检测产品。
1、细胞毒性检测试剂盒（乳酸脱氢酶法） 480T D-AKK1030
2、细胞衰老检测试剂盒（β-半乳糖苷酶法） 100T D-AKE3030
3、彗星法DNA损伤分析试剂盒（3孔载玻片）15T/75T D-AKE3040
https://www.amyjet.com/brand/cell-proliferation-kit.shtml
