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高品质肽N-糖苷酶 F(His标签)介绍

来宝网 2023/9/14点击489次

链霉亲和素磁珠-灵敏度高,结合效率高

 

链霉亲和素磁珠是将链霉亲和素(streptavidin)固定在磁性微球上,借助链霉亲和素-生物素高亲和力结合特性,与生物素化蛋白、抗体及核酸(统称生物素化分子)等形成固定层,进而分离和与生物素化分子相互作用的靶分子,可用于亲和纯化,细胞分选,蛋白互作,DNA-蛋白质相互作用,探针捕获和mRNA分离等多方面应用。

 

链霉亲和素磁珠C-BETA2002-100mL优势

1.能够快捷、与多种生物素标记物结合,如:肽类,蛋白,抗体,糖类,凝集素,DNA/RNA等。

2.灵敏度高,检测限低,结合效率高。

3.沉降速度低,迁移率低。

 

艾美捷链霉亲和素磁珠组分

目录:C-BETA2002

产品名称:链霉亲和素磁珠-2.8μm

平均直径:2.8μm

浓度:10 mg/ml

共轭:链亲和素

无菌/内毒素:无菌,无内毒素

蛋白质浓度:0.6 mg/10 mg珠子

规格2mL/10mL/100mL

特异性:生物素化配体

缓冲液:1×PBSpH 7.40.1%BSA2mM EDTA

储存温度:2℃至8

保质期:2

 

相关研究:

T激活剂CD3/CD28珠:促进人T细胞活化和扩增

链霉亲和素磁珠(StreptavidinSA-磁珠)-4.5um

链霉亲和素磁珠(StreptavidinSA-磁珠)-2.8 um

IgY HP 亲和层析介质,5mL 预装柱

Sephadex G25,葡聚糖凝胶G-25

Immunotag™ Rat Akt2 (RAC-beta serine/threonine-protein kinase) ELISA

2\'-C-β-甲基鸟苷

 

https://www.amyjet.com/products/C-BETA2002-100mL.shtml

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方便的线粒体DNA提取试剂盒,简单,快速、可靠

 

线粒体(mitochondrion)是细胞内的一种细胞器,大概是一根短棒的样子;它们从周遭的细胞液中摄入氧气和“燃料”,让它们在其内部“燃烧”,用得来的化学能量为细胞内所有需要能量的活动供能——就像发动机一样。

 

线粒体供能的方式是将ADP(二磷酸腺苷)变成ATP(三磷酸腺苷)——ATP被细胞使用后,少了一个磷酸根,又变成ADP,然后再进入线粒体获得能量(磷酸根)变回ATP……

 

一个线粒体在状态良好、运转正常的时候,每秒钟可以循环制造600ATP——在一个时间点上,整个人体内全部的ATP分子大约总重50克——但一天内可能需要循环制造超过150公斤的ATP!——这就是线粒体每天的(主要)工作。

 

怎么把线粒体完整的提取出来呢?

Biogradetech线粒体分离提取试剂盒(细胞样品)能够从培养的哺乳动物细胞中快速便捷分离组织/细胞线粒体,获得的线粒体纯度较高,且绝大部分都含有完整的内膜和外膜,可用于线粒体的生理功能等方面的研究。

 

Biogradetech线粒体分离提取试剂盒(细胞样品)应用:

适合于哺乳动物软组织(肝或脑组织)和硬组织(肌肉)以及培养细胞的线粒体的分离提取。其制备物产量高,可用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。

 

英文名称    中文名称     规格     货号

Mitochondria Extraction Kit, for Cell   线粒体分离提取试剂盒(细胞样品) 50T   D-AKE4003

Mitochondria Extraction Kit, for Tissue 线粒体分离提取试剂盒(组织样品)50T   D-AKE4004

 

产品原理:

利用专门试剂温和匀浆组织和细胞,再采用差速离心法从匀浆中分离完整线粒体;利用专门试剂,配合超声波破碎线粒体,可以得到保持活性的线粒体酶。

 

内部的线粒体DNA也是一个非常有意思的存在!

 

产品扩展:

与此同时,因为线粒体DNAmtDNA)几乎不发生基因重组,所以在遗传学探究中,也将mtDNA作为研究群体遗传学与进化生物学的信息来源。使得系统进化,生物地理,群体遗传,人类学及法医鉴定等领域的研究得到前所未有的发展。

 

随着对线粒体基因组遗传特性的了解不断加深,mtDNA作为分子标记的潜在问题便逐渐暴露出来.对今后线粒体基因的应用前景有着很重要的作用。线粒体DNAmtDNA)的突变率非常高,并且mtDNA上的突变似乎与某些疾病有关,例如糖尿病,阿尔茨海默氏病和肌肉疾病。通常需要对mtDNA进行分离和定量研究,才能研究疾病与mtDNA之间的关系。

 

艾美捷为大家顺便提供了一个更为方便的线粒体DNA提取试剂盒,简单,快速、可靠的分离完整的线粒体DNA,而不会受到基因组DNA的污染。回收的线粒体DNA兼容各种下游应用,包括PCR,克隆等。

英文名称   中文名称   规格   货号

Mitochondrial DNA Isolation Kit  线粒体DNA分离试剂盒  50 isolations  PI-0105

 

https://www.amyjet.com/brand/Mitochondria-Extraction-Kit.shtml

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NAD/NADH比率测定试剂盒主要功能

 

吡啶核苷酸在代谢中起着重要作用,因此,人们对监测其浓度水平一直感兴趣。NAD+/NADH的定量测定在细胞或组织的能量转化和氧化还原状态的研究中有应用。测量NAD+/NADH浓度的简单、直接和自动化程序是非常理想的。Assay Genie ChromaDazzle NAD/NADH比率检测试剂盒基于乳酸脱氢酶循环反应,其中形成的NADH还原甲氮(MTT)试剂。在565nm处测量的降低的产物颜色的强度与样品中的NAD+/NADH浓度成比例。该测定法对NAD+/NADH具有高度特异性,NADP+/NADPH的干扰小(<1%)。我们的测定法是一种测量NADNADH及其比值的方便方法。

 

艾美捷 NAD/NADH比率测定试剂盒

目录代码:BA0067

包装尺寸:100assays

仅供研究使用

 

应用直接分析:细胞或组织提取物中NAD+/NADH的浓度和比率。

 

NAD/NADH比率测定试剂盒主要功能

1灵敏准确。在96孔板法中,检测限为0.05 mM,线性高达10μM NAD/NADH。实用的该程序包括添加一种工作试剂,并在室温下读取时间零点和15分钟的光密度。

2高吞吐量。可作为每天数千个样品的高通量96孔板法容易地自动化。

 

储存条件。这套装备是用冰块装运的。将所有试剂储存在-20°C温度下。保质期:收到后6个月。

注意事项:试剂仅供研究使用。使用试剂时,应采取实验室试剂的常规预防措施。有关详细信息,请参阅材料安全数据表。

 

一般注意事项

1.在这些浓度下,NADNADH的标准曲线是相同的。由于溶液中的NADH不稳定,我们只提供NAD作为标准品。

2.该测定基于酶催化的动力学反应。工作试剂的添加应迅速,混合应简短但彻底。建议使用多通道移液器。

3.以下物质会干扰样品制备,应避免使用。EDTA>0.5 mM)、抗坏血酸、SDS>0.2%)、叠氮化钠、NP-40>1%)和Tween-20+1%)。

4.对于丙酮酸盐含量高于100μM的样品,我们建议使用内标。

 

96孔板法的标准曲线

41.png

https://www.amyjet.com/products/BA0067.shtml

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高吞吐量NADP/NADPH 检测试剂盒

 

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotidephosphate,简称NADP)与NAD的不同之处只在于其分子有一个额外的磷酸基,NADPH是它的还原形式。NADP+参与生物合成反应,如脂质和核酸的合成。在动物细胞中,戊糖磷酸途径的氧化阶段是NADPH重要来源。NADP/NADPH的定量测定在细胞或组织的能量转化和氧化还原状态的研究中具有重要应用价值。

 

艾美捷 NADP/NADPH 检测试剂盒(荧光法)

目录代码:BA0107

包装尺寸:100assays

仅供研究使用

 

NADP/NADPH 检测试剂盒应用程序

直接测定:细胞或组织提取物中NADP/NADPH的浓度和比率。

 

NADP/NADPH 检测试剂盒主要功能

1灵敏准确。96孔板法检测限为0.01μM,线性高达1μM NADP+/NADPH。实用的该程序包括添加一种工作试剂,并在时间030读取荧光

Zui低室温测定。

2高吞吐量。可作为每天数千个样品的高通量96孔板法容易地自动化。

 

储存条件这套装备是用冰块装运的。将所有试剂储存在20°C的温度下。保质期:收到后6个月。

注意事项:试剂仅供研究使用。使用试剂时,应采取实验室试剂的常规预防措施。有关详细信息,请参阅材料安全数据表。

 

一般注意事项

1.在这些浓度下,NADP’和NADPH的标准曲线是相同的。由于溶液中的NADPH不稳定,我们只提供NADP作为标准。

2.该测定基于酶催化的动力学反应。工作试剂的添加应迅速,混合应简短但彻底。建议使用多通道移液器。

3.以下物质会干扰样品制备,应避免使用。EDTA>0.5 mM)、抗坏血酸、SDS>0.2%)、叠氮化钠、NP-40>1%)和Tween-20+1%)。

程序

1.样品制备。对于每个样品重量约为20 mg的组织,用冷PBS清洗。对于细胞样品,用冷PBS洗涤细胞,每个样品用约105个细胞沉淀。将样品(组织或细胞)在1.5 mL Eppendorftube中用100μL NADP提取缓冲液(用于NADP测定)或100μL NADPH提取缓冲液均匀化(用于NADPH测定)。将提取物在60°C下加热5分钟,然后加入20μL测定缓冲液和100μL反向提取缓冲液以中和提取物。短暂涡旋并以14000rpm旋转样品5分钟。使用上清液进行NADP/NADPH测定。NADP+NADPH浓度的测定需要从两个单独的样品中提取。

2.校准曲线。准备500mL 1µM NADP+预混物,混合5mL 1mM标准和4995mL蒸馏水。稀释标准品如下

51.png

3.样品。在单独的孔中,每孔添加50μL样品。

4.试剂制备。对于每个反应井,通过混合40μL测定缓冲液、1μLA1μL-B10μL葡萄糖和5μL探针来制备工作试剂。建议重新配制。

5.反应。每孔快速加入50μL工作试剂。轻敲盘子搅拌。

6.在室温下孵育30分钟后,在λev/em=530/585 nm下读取时间“零”(Fo)和F3o的荧光。在培养过程中,请保护培养板免受光照。

 

文献参考:

1.Zhao, Z, Hu, X and Ross CW (1987). Comparison of Tissue Preparation Methods for Assay of Nicotinamide Coenzymes.Plant Physiol.84:987-988.

2.Matsumura, H. and Miyachi S (1980). Cycling assay for nicotinamide adenine dinucleotides. Methods Enzymol. 69:

465-470.

3. Vilcheze, C et al.(2005). Altered NADH/NAD+ Ratio Mediates Coresistance to lsoniazid and Ethionamide inMycobacteria. Antimicrobial Agents and Chemotherapy.49(2): 708-720.

 

https://www.amyjet.com/products/BA0107.shtml

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ADP/ATP比率测定试剂盒应用程序说明

 

ADP/ATP比率的变化已被用于区分细胞死亡和存活的模式。ATP水平升高和ADP水平降低表示细胞增殖。相反,ATP水平的降低和ADP水平的增加导致细胞凋亡或坏死,其中ATP的减少和ADP的增加在坏死中比在细胞凋亡中更明显。Assay Genie LumiDazzle ADP/ATP比率检测试剂盒提供了一种快速测量ADPATP水平的方法,用于筛选哺乳动物细胞的凋亡、坏死和细胞增殖。化验包括两个步骤。在第一步中,工作试剂裂解细胞以释放ATPADP。在荧光素酶存在的情况下,ATP立即与底物D-荧光素反应产生光。光强度是细胞内ATP浓度的直接测量。

 

艾美捷 ADP/ATP比率测定试剂盒

目录代码:BA0127

包装尺寸:100assays

仅供研究使用

 

ADP/ATP比率测定试剂盒要功能

1安全非放射性化验。

2均匀方便。“混合培养测量”型测定。不涉及清洗和试剂转移步骤。坚固且适用于HTS:在96孔和384孔板中常规观察到0.5及以上的Z’因子。可以在HTS液体处理系统上实现

3完全自动化,每天处理数千个样本。

 

应用程序

细胞凋亡和坏死的测定。

细胞增殖:细胞因子、生长因子、营养物质的影响。药物发现:抗癌药物的高通量筛选。

试剂盒内容

测定缓冲液:10 mL

基质:120μl

共基质:120μl

ATP酶:120μl

ADP酶:120μL

储存条件:试剂盒在冰上运输。将所有试剂储存在-20℃。本产品以干冰装运。保质期:12

收到后数月。

 

注意事项:试剂仅供研究使用。使用试剂时,应采取实验室试剂的常规预防措施。有关详细信息,请参阅材料安全数据表。

化验程序

可以在试管或96孔板中进行分析。为了保持一致性,建议三个发光测量对于所有样品是相同的。

 

测试程序

可以在试管或96孔板中进行测试。为了保持一致性,建议所有样品的三次发光测量之间的时间相同。

1.样品制备。对于悬浮细胞,将10μL培养的细胞(10³-10')转移到白色不透明的96孔板中。

粘附细胞:在白色不透明微孔板中培养10³-104个细胞。在测定时,在加入90μL ATP试剂之前立即除去培养基(见下文)。

2.ATP测定。将测定缓冲液、底物和共底物置于室温。在冰上或4℃下解冻酶。建议进行FreshReconstitution。将未使用的试剂(包括酶)储存在20°C下。

ATP试剂。对于每个96孔,将95μL测定缓冲液与1μL底物、1μL共底物和1μL ATP酶混合。向每个孔中添加90μL ATP试剂,并通过轻敲平板进行混合。1分钟后,读取铝量计上的发光(RLU A)。

3.ADP测定。制备ADP试剂:对于每个96孔,混合5μL dHO1μL ADP酶作用。

在读取ATPRLU A)的发光后10分钟,再次读取样品(RLU B)的发光。该测量在测量ADP(即残余ATP信号)之前提供背景。

读取RLU B后,立即向每个孔中添加5μL ADP试剂,并通过轻敲板或上下移液进行混合。1分钟后,在光度计上读取发光(RLU C)。

4.ADP/ATP比值的计算。从RLU C中减去RLU B,然后除以RLU ARLUC-RLUB ADP/ATP比率=RLU A

61.png

文献参考:

1.Schafer ZT,et al.(2009). Antioxidant and oncogene rescue of metabolic defects caused by loss of matrix attachment.Nature.461(7260):109-113.

2.Bekeredjian R, et al.(2010). Conditional HIF-1alpha expression produces a reversible cardiomyopathy. PLos One. 5(7):

e11693.

3. Chandak PG, et al.(2010). Efficient phagocytosis requires triacylglycerol hydrolysis by adipose triglyceride lipase.JBiolChem.285(26):20192-201.

 

https://www.amyjet.com/products/BA0127.shtml

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全能核酸酶应用程序、质量控制说明

 

全能核酸酶(同 Benzonase)制品经过基因工程改造重组表达获得,是由粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)分泌的、由两个大小为 26 kDa 的亚基组成的一种广谱核酸酶,又称非限制性核酸内切酶,其活力比 DNase I 34 倍,能以相同的效率酶切单链和双链 DNA RNA,将其消化成 3~5 碱基长度(杂交限度以下)的 5'-单磷酸寡核苷酸。其发挥活性需要 Mg²⁺,合适活性 pH 范围为 6~10适反应温度为 37℃。

 

艾美全能核酸酶

Cat #: C-BSM2907

Size: 25 KU / 50 KU / 100 KU

Storage: -20°C

 

全能核酸酶组分:

71.png

酶活性定义:

一个单位(U)的活性被定义为在2.625 ml反应体系中,在37°CpH 8.0的条件下,在30分钟的反应内引起A260吸收峰变化1.0所需的酶的量(相当于将37μg鲱鱼精子DNA完全消化为寡核苷酸)。

 

应用程序:

1.降解各种形式的DNARNA,使其成为在制备疫苗、抗体、细胞疗法和其他生物产品时去除核酸(DNARNA)污染的合适工具,以满足美国食品药品监督管理局的标准,即用于治疗的生物制药中核酸残留量不超过10 pg/剂。

2.通过降解核酸降低细胞裂解物的粘度,促进溶液过滤/超滤过程,缩短处理时间,提高病毒、AAV载体和来源于细胞的包涵体纯化过程中沉淀物和上清液的分离效率,提高色谱纯化效率,zui终提高产量和产品纯度。

3.在生物分析中的应用:可用于制备ELISA样品、色谱法、二维电泳(蛋白质图谱)和蛋白质印迹分析,以提高分辨率和样品回收率。

 

质量控制

蛋白质纯度检测:产品经SDS-PAGE测试,纯度≥95%

蛋白酶残留检测:将产品与蛋白质底物在37°C下孵育16小时,并使用SDS-PAGE凝胶电泳检测底物。蛋白质底物应该没有显著变化。

内毒素残留检测:内毒素残留量<10 EU/ml

 

注意事项:

1. 使用RNA样品时,将其加入无RNase的试管中

2. 超级核酸酶(苯甲酸酶)的有效工作温度范围为0~42°C适工作温度为37°C。酶活性在低温下可能会降低,但这可以通过添加25倍于苯甲酸酶核酸酶的量或延长消化时间(23小时)来补偿。

3. 含有大量蛋白质、细胞壁或其他盐的粗产物可能部分抑制酶的活性。在这种情况下,有必要增加

4. 酶活性250U/μl。对于小体积制剂,在将酶加入系统之前,可将其在稀释缓冲液(20mM Tris-Cl pH 8.02mM MgCl22mM NaCl)中稀释至一定浓度。稀释后的溶液只能在4°C下储存几天

5. 该产物以液体形式提供,并且可以直接添加到裂解缓冲液中以供共同使用。

6. 为了您的安全和健康,请在实验过程中穿戴实验服、一次性手套和口罩。

 

该试剂仅用于科学研究领域,不适用于临床诊断或其他用途。

 

https://www.amyjet.com/products/C-BSM2907-25KU.shtml

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一举两得抗小鼠CD48抗体,体内阻断,体外中和

 

CD48CD2分子家族中以糖基-磷脂酰-肌醇(GPI)为锚定的细胞表面蛋白,最初是在病毒诱导的B细胞中发现的,现已在多种造血细胞中发现,其表达受病毒和细菌产物以及免疫相关蛋白的调节。CD48作为粘附蛋白,参与细胞与细胞之间的黏附和相互作用。它与其他分子如CD2CD2442B4)结合,介导细胞间的黏附和信号传导。

 

作为一种粘附和共刺激分子,CD48B淋巴细胞和T淋巴细胞、自然杀伤细胞、肥大细胞和嗜酸性粒细胞中参与调节免疫应答和炎症过程,其中一些效应依赖于通过2B4-CD48结合的细胞间相互作用。尽管缺乏胞内结构域,刺激CD48可诱导脂筏信号因子重排、Lck激酶活性和酪氨酸磷酸化。

 

总的来说,CD48分子在细胞间相互作用、免疫调节和细胞信号传导中发挥重要作用,对于维持免疫系统的正常功能和调节免疫应答具有重要意义。  

 

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艾美捷 抗小鼠CD48抗体,体内阻断,体外中和,一举两得:

货号 BE0147

名称 InVivoMAb anti-mouse CD48 抗小鼠CD48抗体

应用 in vivo CD48 blockade   CD48体内阻断 in vitro CD48 blocking   CD48体外封闭

克隆号 HM48-1

纯度 >95%

内毒素 <2EU/mg (<0.002EU/μg)

免疫原 MBL2小鼠T淋巴瘤细胞

备注 据报道,该HM48-1抗体在体内阻断CD48/CD2CD48/CD244的相互作用,抑制丝裂原活化的脾细胞的增殖反应,在体外为活化的T细胞提供共刺激信号,并在体内延长同种异体心脏移植物的存活时间。

 

https://www.amyjet.com/products/BXC-BE0147-1mg.shtml

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高品质N-糖苷酶 FHis标签)介绍

 

背景:

PNGase F(肽 N- 糖苷酶 F)来源于 Elizabethkingia miricola,是一种高效的酰胺水解酶,可以裂解由天冬酰胺接的高甘露糖、杂合和复杂的寡糖糖蛋白。PNGase F 的切割位点为糖蛋白内侧 N- 乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨残基之间的酰胺键,同时将酶解后蛋白上的天冬氨酰转化为天冬氨酸。

 

艾美捷N-糖苷酶 FHis标签)

Cat #: C-BSM3303

Size: 15000 U / 75000 U

Storage: -20°C

 

N-糖苷酶 FHis标签)组分:

11.png

 

酶活性定义:

一个单位(U)的酶活性是指在10μl反应系统中,在37°C1小时,从10μg变性RNase B中去除95%以上的碳水化合物所需的酶量。

 

灭活条件:

75°C下培养10分钟。

质量控制

蛋白质纯度检测:

产品经SDS-PAGE检测,纯度≥95%。糖苷酶和蛋白酶活性检测:

没有可检测的内切糖苷酶F1F2F3活性;没有可检测的蛋白酶活性。

使用说明:

1.在变性条件下的脱糖基化:

① 将1-20μg糖蛋白、1μl 10×变性缓冲液和ddH20(如有必要)混合至总体积为10μl

注:10倍变性缓冲液在低温下储存时可能会有白色沉淀。使用前在37°C下培养即可溶解。

② 在100°C下孵育10分钟,使糖蛋白变性,然后在冰上冷却并离心10秒。

③加入2μl 10×PNGase F缓冲液,2μl 10%NP-40,并补充ddH20,使总反应体积为20μl。④加入1-2μl PNGase F,轻轻搅拌,在37℃下孵育1-3小时。

2.在非变性条件下的脱糖基化:

① 将1-20μg糖蛋白、2μl 10×PNGase F缓冲液和ddH20(如有必要)混合至总体积为20μl

② 加入2-5μl PNGase F,轻轻混合。

③ 在37°C下培养4-24小时。

PNGase F的去除:

该产物含有His标签,反应后,PNGase F可以通过亲和层析从靶糖蛋白中使用不同的标签去除。

 

本试剂仅用于科学研究领域,不适用于临床诊断或其他用途。

 

https://www.amyjet.com/products/C-BSM3303-15000U.shtml

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