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DAB Substrate Kit/DAB显色试剂盒（B-IMWRS51-100T）

DAB辣根过氧化物酶显色液(DABHorseradishPeroxidaseColorDevelopmentKit)是一种依据辣根过氧化物酶(HRP)结合显色，用于免疫组化显色、原位杂交显色或Western、Southern、Northern、EMSA等膜显色的试剂盒。DAB即3,3N-DiaminobenzidineTertrahydrochloride,是辣根过氧化物酶的常用底物。

DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒可以用于细胞或组织在免疫组化或原位杂交时结合的辣根过氧化物酶显色，也可用于Western等结合有辣根过氧化物酶的膜的显色检测以及细胞或组织内源性的辣根过氧化物酶显色。该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

艾美捷 Biogradetech DAB显色试剂盒：

中文名称：DAB显色试剂盒

英文名字：DAB Substrate Kit (DAB staining)

Biogradetech货号：B-IMWRS51-100T

规格：100T

保存建议：DAB显色试剂盒储存条件：2-8°C避光

操作步骤(仅供参考)：

1. 常规组织切片、细胞样品、膜与辣根过氧化物酶标记的抗体或其它形式的探针孵育后，用适当洗涤液洗涤3～5次，每次3～5min。对于检测内源性辣根过氧化物酶的组织或细胞样品，在适当固定后，也可用洗涤液洗涤3～5次，每次3～5min。

2. 按(A):试剂(B):蒸馏水=的比例混合,即为DAB显色工作液，即配即用。

3. 洗涤过组织后，去除洗涤液，加入适量DAB显色工作液，确保覆盖样品。

4. 室温避光孵育或更长时间，直至显色至预期深浅。

5. 去除DAB显色工作液，用蒸馏水清洗1～2次即可终止显色反应。

6. 对组织切片或细胞样品，反应终止后，如有必要可用中性红染色液染色，便于观察。对于膜染色，反终止后可室温晾干避光保存。

注意事项：

1. DAB是致癌物，请注意适当防护。

2. 试剂(A)、试剂(B)避免反复冻融，以免效率下降。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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Calcein-AM/PI，活细胞/死细胞双染试剂盒使用方法

钙黄绿素-AM (Calcein-AM) 和碘化丙啶 (PI) 溶液，分别对活细胞和死细胞染色，可同时使用，对活细胞和死细胞进行荧光染色。Calcein-AM 的乙酸甲基酯亲脂性很高，使其可透过细胞膜。尽管 Calcein-AM 本身并不是荧光分子，但通过活细胞内的酯酶作用，Calcein-AM 能脱去 AM 基，产生的 Calcein 能发出强绿色荧光 (激发: 490 nm，发射: 515 nm)，因此 Calcein-AM 仅对活细胞染色。另一方面，作为核染色染料的 PI 不能穿过活细胞的细胞膜，它穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核，并嵌入细胞的 DNA 双螺旋从而产生红色荧光 (激发: 535 nm，发射: 617 nm)。由于 Calcein 和PI-DNA都可被 490 nm 激发，因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。用 545 nm 激发，仅可观察到死细胞。

艾美捷 Biogradetech Calcein-AM/PI，活细胞/死细胞双染试剂盒：

中文名称：Calcein-AM/PI，活细胞/死细胞双染试剂盒

英文名字：Calcein-AM/PI, Live/Dead Cell Double Staining Kit

Biogradetech货号：B-CHK103-500T

规格：500T

保存建议：Calcein-AM/PI，活细胞/死细胞双染试剂盒保存：-20℃干燥避光 有效期一年。

Calcein-AM/PI，活细胞/死细胞双染试剂盒使用方法：

以 HeLa 细胞染色为例，请注意不同的细胞种类、不同浓度，有不同的观察条件。

1. 染色工作液的配制

添加 2.5 µl Calcein-AM 储备液（4mM）和 12.5 µl PI（2mM）储备液至 5 ml PBS 中配制成染色溶液。Calcein-AM的终浓度为 2 µM，PI 的终浓度为 5 µM。

注意：由于 Calcein-AM 的稳定性比较差，此染色工作液必须现配现用，并且在当天用完。

2. 细胞染色

1) 染色 HeLa 细胞等贴壁细胞时，先用 Trypsin-EDTA 等消化细胞，制备成细胞悬液。

2) 将细胞悬液离心 3 分钟 (1,000 rpm)。

3) 去除上清液，加入 PBS 缓冲液，细胞数量调整至 1×105-1×106个/ml。再用移液器充分混匀。

4) 由于培养基中的血清等成分含有酯酶，Calcein-AM 会分解，会导致空白上升，所以需要离心数次，用PBS 洗涤数次直到完全洗净。

5) 将 200 µl 细胞悬液移至小试管中，加入 100 µl 染色溶液，在 37℃下孵育 15 分钟。

6) 在盖玻片上滴加适量的染色的细胞溶液。

7) 在荧光显微镜下，先用 490±10 nm 波长激发，观察黄绿色的活细胞，还可以同时观察到红色的死细胞，然后用545 nm波长激发，能够看到红色的死细胞。

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Covalab针对斑马鱼的抗体研究及相关应用方案

斑马鱼（zebrafish，Danio rerio），又名蓝条鱼，是淡水水族观赏鱼，原产于印度、孟加拉国，因全身布满多条深蓝色纵纹似斑马而得名。斑马鱼身体延长而略呈纺锤形，头小而稍尖，吻较短。由于斑马鱼养殖方便、繁殖周期短、产卵量大、胚胎体外受精、体外发育、胚体透明，已成为生命科学研究的新宠。

斑马鱼拥有与人相似的组织器官和系统，基因和信号通路与人类高度保守：>85%；生理、发育和代谢与哺乳动物高度相似。个体小，成鱼体长3-4cm，幼鱼体长只有1-2mm，适合于高通量药物筛选。发育周期短 (24 小时器官便可形成）、实验周期短 (筛选结果在一周内即可得出)、费用低（约为鼠类的 1/10～1/100）、体外受精、透明（可直接观察药物对内部器官的作用）、单次产卵数较高（150～200 枚）以及实验用药量小（为小鼠用药量的 1/100～1/1000）。  

目前，斑马鱼已经成为继小鼠和大鼠之后的第三大脊椎类模式生物，在发育生物学、遗传学、基础医学、药理学、毒理学、药物研发以及生态环境评价等诸多领域得到了广泛应用。利用斑马鱼，可以研究生命科学的基础问题，揭示胚胎和组织器官发育的分子机理；可以构建人类的各种疾病和肿瘤模型，建立药物筛选和治疗的研究平台；可以建立毒理学和水产育种学模型，研究和解决环境科学和农业科学的重大问题。  

艾美捷Covalab针对斑马鱼的抗体（部分）：  

货号 名称 宿主 应用类型

mab20361 Actin antibody (HHF35) 小鼠 ELISA, EM, ICC, IHC - F, IHC - P, WB

pab72198 AMPD1 (aa140-190) antibody 兔 IHC - P, WB

pab72199 AMPD1 (aa500-550) antibody 兔 IHC - P, WB

pab74475 ATG4B antibody 兔 IHC - P, WB

pab50264 ATG5 antibody 兔 ICC, IF, IHC - P, WB

pab50234 CAAX prenyl protease 1 homolog antibody 兔 WB

pab0412 Collagen alpha-3 (IV) chain (COL4A3) antibody 兔 ELISA, ICC, IF, WB

pab70092 CRTC1 / MECT1 (aa19-34) antibody 兔 ELISA, IHC - P, WB

pab0736 Cxcr4B antibody 兔 ELISA, IF, WB

mab60115 DNMT1 (4G11-C7) antibody 小鼠 ELISA, WB

pab70910 EPHB2 (Internal) antibody 兔 IHC - P

pab0999-P Fibrinogen alpha chain antibody 兔 ELISA, WB

pab0992-P Fibrinogen antibody 兔 ELISA, WB

pab72593 FOXC1 (C-Terminus) antibody 山羊 ELISA, IHC - P, WB

pab76203 FTHFSDC1 / MTHFD1L (Internal) antibody 山羊 ELISA, IHC - P, WB

pab71237 GPR22 (Cytoplasmic Domain) antibody 兔 IHC - P

pab71375 GPR85 (Extracellular Domain) antibody 兔 IHC - P

pab50112 High affinity copper uptake protein 1 antibody 兔 IHC - P

pab52834 JMJD6 antibody 兔 ICC, WB

pab72287 KDM1A / LSD1 (aa100-150) antibody 兔 IHC - P, WB

pab52451 Kv1 antibody 兔 IP, WB

pab52458 Kv1.2 antibody 兔 ICC, WB

pab50207 LC3A antibody 兔 ICC, IF, IHC - P, IP, WB

pab52327 LC3A antibody 兔 FC, ICC, IF, FC, IHC, WB

pab50206 LC3B antibody 兔 FC, ICC, IF, IHC, IP, WB

pab72188 MARCH4 (aa300-350) antibody 兔 IHC - P, WB

pab71719 MCT1 (aa3-14) antibody 兔 ELISA, IHC - P, WB

pab76186 MICU1 / CBARA1 (Internal) antibody 山羊 ELISA, IHC - P, WB

pab72784 MLL4 (C-Terminus) antibody 山羊 ELISA, IHC - P

mab0102-P Na(+)/K(+) ATPase alpha-1 subunit antibody (A1F6) 小鼠 IHC, IP, WB

pab73827 NTN1 / Netrin 1 (C-Terminus) antibody 山羊 ELISA, IHC - P, WB

pab76086 ORC3L / ORC3 (C-Terminus) antibody 山羊 ELISA, IHC - P, WB

pab0693-IP P540 Aromatase (Cyp19b) antibody 兔 ELISA, WB, IHC

pab0831-P Paired box protein Pax-6 antibody 兔 ELISA, WB

pab72933 PPAR Delta (aa430-441) antibody 山羊 ELISA, IHC - P, WB

pab72181 RAB7 (aa90-140) antibody 兔 IHC - P, WB

pab52551 SNX27 antibody 兔 ICC, IF, IHC - P, WB

pab0016 Sodium- and chloride-dependent GABA transporter 2 (GAT-2) antibody 兔 ELISA, IHC, WB

pab50273 TARDBP antibody 兔 ICC, IF, IHC, WB

pab0809-P Toll-interacting protein antibody 兔 ELISA, WB, IHC

pab0907-P Tpcn1 antibody 兔 WB, ELISA

pab0908-P Two pore calcium channel protein 2 (tpcn2) antibody 兔 ELISA, WB

pab0868-P Two pore channel 3 (TPC3) antibody 兔 ELISA, WB

pab0928-P VEGF165 antibody 兔 ELISA, WB, IHC

斑马鱼抗体应用类型：

ChIP：Chromatin immunoprecipitation 染色质免疫沉淀

ELISA：Enzyme-linked immunosorbent assay 酶联免疫吸附测定

EM：Electron microscopy 电子显微镜

FC：Flow cytometry 流式细胞术

IF: Immunofluorescence 免疫荧光

IHC：Immunohistochemistry 免疫组化（IHC-P：IHC, paraffin section 石蜡切片的免疫组化；

IHC-F: IHC, frozen section冰冻切片的免疫组化）

ICC:  Immunocytochemistry免疫细胞化学

IP：Immunoprecipitation 免疫沉淀

WB：Western blot 蛋白质印迹

GS: gel shift 凝胶迁移

https://www.amyjet.com/brand/actin-antibody.shtml

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OligoGreen ssDNA定量试剂盒操作流程

OligoGreen ssDNA定量试剂盒*2000次*包括OligoGreen试剂、稀释缓冲液和ssDNA定量标准品，还包括浓缩的测定缓冲液和寡核苷酸标准品。短的合成寡核苷酸用于许多分子生物学技术，如DNA测序、定点突变、DNA扩增和原位杂交。

艾美捷 Biogradetech OligoGreen ssDNA定量试剂盒：

中文名称：OligoGreen ssDNA定量试剂盒*2000次*

英文名字：OligoGreen ssDNA Quantification Kit *2000T*

Biogradetech货号：B-CHK002-1mL

规格：1mL

保存建议：OligoGreen ssDNA定量试剂盒*2000次*保存： -20°C& 4℃。

OligoGreen ssDNA定量试剂盒操作流程：

1. OligoGreen ssDNA 定量检测试剂盒 *2000次* 根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。

2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;

3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。

4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。

OliGreen染料在与poly（dT）结合时显示出大的荧光增强，但在与poly（dG）结合时仅显示出相对小的荧光增强并且与poly和poly（dC）的信号很小。因此，在生成标准曲线时，使用具有相似碱基组成的寡核苷酸是重要的。

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APC-Streptavidin/别藻蓝蛋白-链霉亲和素

链霉亲和素是一种细菌来源的生物素结合蛋白，据报告非特异性结合比例低于亲和素。别藻蓝素是一种非常明亮的藻胆蛋白，具有较宽的吸收光谱（峰值在 ∼650 nm 处），最大荧光发射波长 ∼660 nm。Biogradetech的别藻蓝蛋白-链霉亲和素特别适合需要额外纯度的应用。

艾美捷 Biogradetech 别藻蓝蛋白-链霉亲和素：

中文名称：别藻蓝蛋白-链霉亲和素

英文名字：APC-Streptavidin

Biogradetech货号：B-CHM302-10mg

规格：10mg

产品形式：溶液

保存建议：别藻蓝蛋白-链霉亲和素储存条件：4°C避光。n稳定性：在适宜条件下至少可以储存6个月。

Biogradetech 别藻蓝蛋白-链霉亲和素特点：

-亮度比有机染料高510倍

-在水溶液中具有极高的溶解度

-没有未结合的链霉亲和素；在大多数情况下，没有未结合的APC

-非常适合流式细胞术、微孔板和微阵列的应用

-对于大多数荧光链霉亲和素的应用，推荐浓度为110 μg/ mL，具有最佳条件由用户决定。

别藻蓝蛋白-链霉亲和素常见问题解答：

Q：我应该如何储存我的别藻蓝蛋白（APC）偶联抗体？

A：与藻蓝蛋白结合的抗体必须在2-8摄氏度下储存。与藻胆蛋白（APC、R-PE）结合的抗体不得冷冻。一旦冻结，即使是短暂冻结，它们也不再可用。

Q：对于高级别藻蓝蛋白缀合物链亲和素，每个链亲和素分子缀合了多少个APC分子？

A：高级链亲和素APC具有一定程度的一个APC分子对一个链亲和素分子的标记。

相关研究：

链霉素亲和素、R-藻红蛋白偶联物(SAPE)-1mg/mL

Alexa FluorTM 488链霉亲和素偶联物

链毒亲和素，(APC)

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Biogradetech人T 细胞激活磁珠，CD3/CD28单抗偶联磁珠

目前市场主流的T细胞分选激活产品通过在磁珠上偶联抗 CD3 和抗 CD28 单克隆抗体，提供调节 T 细胞激活和扩增需要的初级和协同刺激信号，实现 T 细胞的激活和扩增。由于磁珠具有更强的结合能力和更强的激活效果，所以可将T细胞的分选及激活步骤整合，实现集分选激活于一体CD3/CD28抗体偶联磁珠，方便分离并可高效扩增T细胞。

人T激活剂CD3/CD28，珠用于人T细胞分离和体外扩增。这可应用于CAR-T等T细胞培养技术的应用。人T激活剂CD3/CD28，Beads由4.5μm磁珠与抗人CD3和抗人CD28抗体偶联而成，为分离和扩增人T细胞提供了一种简单的方法。首先，人T激活剂CD3/CD28，Beads能够容易地从PBMC中分离和浓缩CD3+T细胞。分离后，抗CD3和抗CD28抗体在磁珠上的共价结合提供了调节T细胞活化和扩增所需的初级和共刺激信号。在细胞扩增过程中，细胞培养需要额外添加其他细胞因子，如人IL-2、IL-7和IL-15，以更有效地激活。激活的细胞可以在10-13天的培养期内膨胀1000倍。

艾美捷 Biogradetech 人T细胞激活磁珠，CD3/CD28单抗偶联磁珠：

中文名称：人T 细胞激活磁珠，CD3/CD28单抗偶联磁珠

英文名字：Human T-Activator CD3/CD28, Beads

Biogradetech货号：C-BETA2001-10mL

规格：10mg

产品形式：磷酸盐缓冲液(PBS)，含人血清白蛋白(HSA)， pH7.4

保存建议：人T 细胞活化增殖CD3/CD28免疫磁珠AcnoviaBeads Human T-Activator CD3/CD28建议保存于2-8℃保存

反应性：人类

浓度：2×10°珠/mL

粒径：4.5μm

内毒素：1EU/mL

用途：富集T细胞或PBMC中的体外T细胞活化和扩增

配方：磷酸盐缓冲盐水（PBS），含有人血清白蛋白（HSA），pH 7.4。

稳定性：24个月

人T 细胞激活磁珠，CD3/CD28单抗偶联磁珠：集分选和激活功能于一体，适用于人T细胞的分选、激活和扩增。适用于CAR-T等多种T细胞培养技术的应用。特点：

集分选激活于一体，省时高效

超顺磁珠，与细胞大小匹配

分选效率高，并可高效激活扩增T细胞

方便分离，易操作

高稳定性，高安全性

产品符合ISO9001和ISO13485质控要求

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PicaGreen dsDNA定量试剂盒的原理&特点

在分子生物学的试验过程中，PicoGreen dsDNA 定量试剂盒是荧光检测双链 DNA 并进行定量的一种产品，这种方法非常灵敏。常用于分子生物学技术中的：cDNA 文库的构建；用于亚克隆的 DNA 片段纯化及应用，比如进行 DNA 定量、产物扩增和引物的进一步检测。 疫苗是现代疾病预防中常用的控制方式。如今许多疫苗是细胞培养疫苗，比如重组乙肝疫苗、狂犬病疫苗等大多数疫苗都采用细胞培养的方法生产。其中，疫苗的纯化是关键问题，我们需要尽可能的去除宿主细胞DNA和宿主蛋白。假若宿主细胞的DNA和蛋白同疫苗一起注入人体将会产生不可预料的后果。

艾美捷 Biogradetech PicaGreen dsDNA定量试剂盒：

中文名称：PicaGreen dsDNA定量试剂盒*2000次*

英文名字：PicaGreen dsDNA Quantification Kit *2000T*

Biogradetech货号：B-CHK001-1mL

规格：1mL

保存建议：PicaGreen dsDNA定量试剂盒*2000次*储存条件：4°C&室温避光。 稳定性：在适宜条件下可以储存6个月。

PicaGreen dsDNA定量试剂盒*2000次*试剂盒可用于在存在RNA、蛋白质和常见污染物的情况下定量测量样品中的双链DNA。PicaGreen允许对低至低ng/mL的dsDNA进行定量。 试剂盒包含PicaGreen染料、缓冲液和用于测量的DNA标准品。它与荧光计、荧光板读数器、比色杯和微体积荧光计兼容。

原理:

PicoGreen与DNA双链结合后才发出的荧光,无DNA不发荧光;所发荧光与DNA浓度成正比。在2010年《中国药典》中提出,PicoGreen定量DNA的方法检出限约0.3ng/ml,DNA含量在1.25-80ng/mL范围时线性较好(R2>0.99).

特点：

1.该方法可以测定来源于任何表达宿主样品中的双链DNA。

2.可以直接定量PCR扩增产物而无需从反应混合物中纯化DNA。

3.远远超出传统紫外A260的检测方法和Hoechst33258的灵敏度。

4.较高浓度的盐,尿素,乙醇,氯仿,去垢剂,蛋白或琼脂糖对测定无影响。

5.在等摩尔浓度 ssDNA 和 RNA 存在的条件下测定 dsDNA,其影响很小。

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PKH26红色荧光细胞链接试剂盒操作注意事项

PKH26荧光细胞连接试剂盒采膜标记技术，能够将带有较长脂质尾巴的⻩⾊-橙⾊荧光染料结合到细胞膜脂质区域上。染⾊⽅式依赖于细胞与膜的类型，主要⽤于细胞体外标记、体外细胞增殖研究及体内外细胞示踪研究。

艾美捷 Biogradetech PKH26红色荧光细胞链接试剂盒：

中文名称：PKH26红色荧光细胞链接试剂盒

英文名字：PKH26 Cell Linker Kit

Biogradetech货号：B-CHK104-0.1mL

规格：0.1mL

保存建议：PKH26红色荧光细胞链接试剂盒室温保存

试剂盒提供染⾊过程所需溶剂（稀释液），该溶剂可以可以在染⾊过程中，增加染料溶解度和染⾊效率，同时维持细胞活⼒。稀释液与哺乳动物细胞等渗，不含去垢剂或有机溶剂，也不含⽣理盐⽔和缓冲盐。根据细胞类型及标记后细胞膜内在的变化，标记后的细胞表⾯会由均⼀透亮变得有点状凸起或补丁状。但在⽣理范围内，PKH26荧光不受pH的影响，每个细胞的荧光强度与染料标记位置⽆关。PKH26 荧光稳定性强，在⻩⾊-橙⾊区域（λex=551nm, λem=567nm），可⽤来标记追踪体内外多种细胞。在细胞毒性分析，荧光蛋⽩、抗体或 DNA 染料在该区域发出的紫⾊、绿⾊、红⾊和远红外等，不会与 PKH26 产⽣⼲扰。

组份：

PKH26 染料：0.1ml 稀释液：10ml

储存条件：

避光冷藏，⽤前检查结晶，如有结晶需在 37℃⽔浴溶晶。因在⼄醇中贮藏，所以要盖紧防挥发。稀释液 C：常温或冰箱保存，⽆防腐剂和抗⽣素，保持⽆菌。

所需材料：

均匀的单细胞悬液；含⾎清培养基；⽆⾎清培养基或不含 Ca2+Mg2+的PBS 液；⾎清、⽩蛋⽩或与培养基兼容的蛋⽩源；聚丙烯锥形离⼼管；温度可控的离⼼机（0-1000g）；荧光分析仪（荧光计，荧光显微镜，流式细胞仪， 荧光图象分析仪）；超净台；细胞计数仪；载玻⽚。

操作注意：

快速均匀的混合对标记也很重要，为获得最佳效果应采取下述措施：

1）混合时细胞悬液和⼯作染液应等量；

2）避免染太多(>5ml)或太少（<100ul）的液体。避免⽤沾⾎清的移液管加染料；

3）液体量应尽可能精确以保证细胞和染料浓度被精确复制。

4）染料和稀释液作⽤于细胞的时间尽量短，可⽤稀释液按上述步骤作⽤于细胞看其受损程度。

5）加等量⾎清终⽌反应，在终⽌染⾊反应前别离⼼稀释液中的细胞，清洗时⽤含⾎清培养基可增加清洗效果。6）细胞应单独移⾄新试管中离⼼，清洗 3 次时不⽤稀释液⽽⽤培养基。

7）可⽤于体外⼲细胞、淋巴细胞、单核细胞、内⽪细胞等的标记较理想。

8）全细胞标记应先于单抗染⾊的标记，当 4℃单抗染⾊时细胞跟踪探针将保持稳定；如后于单抗染⾊的标记，很可能出现“盖帽”现象。

9）染⾊细胞⽤ 2%多聚甲醛固定稳定性达高。

https://www.amyjet.com/products/B-CHK104-0.1mL.shtml