来宝网 2023/7/14点击535次
PD-L1（BE0101），肿瘤免疫治疗方案
单克隆抗体一直都是免疫治疗的热点，也是医药巨头竞争的前沿阵地，因为单抗药物的利润非常可观。从1997年FDA批准的针对CD20的利妥昔单抗，到后来的针对HER2、CD52、EGFR和VGFR的单抗，每一个都是重磅炸弹。2014年最热的抗体当属BMS和Merk的针对免疫治疗的明星分子PD-1的单抗，BMS的单抗在日本获批用于晚期黑色素瘤，Merk的单抗在美国获FDA批准，也是用于治疗晚期黑色素瘤。
PD-1主要在激活的T细胞和B细胞中表达，功能是抑制细胞的激活，这是免疫系统的一种正常的自稳机制，因为过度的T/B细胞激活会引起自身免疫病，所以PD-1是我们人体的一道护身符。但是，肿瘤微环境会诱导浸润的T细胞高表达PD-1分子，肿瘤细胞会高表达PD-1的配体PD-L1和PD-L2,导致肿瘤微环境中PD-1通路持续激活，T细胞功能被抑制，无法杀伤肿瘤细胞。PD-1的抗体可以阻断这一通路，部分恢复T细胞的功能，使这些细胞能够继续杀伤肿瘤细胞。
PD-1抗体的抗癌效果是前所未有的，一次次地在美国临床肿瘤年会上刮起黑色旋风。据权威期刊《新英格兰医学杂志》编委表述：PD-1抗体的效果是过去30年里抗癌效果最好的。根据目前的临床试验，PD-1抗体能控制50%的皮肤癌病人的癌症进展，治愈10%左右的皮肤癌病人；对于顽固的非小细胞肺癌病人，也能对24%的病人起到控制效果。BMS最新的临床试验显示他们的PD-1单抗能使41%的患者存活超过一年。目前，利用PD-1抗体针对肾癌，胃癌，乳腺癌，膀胱癌，血癌，头颈癌、肠癌和脑瘤等癌症的临床疗效也正在临床试验之中。有分析认为，PD-1抗体的市场可能会达到350亿美元
艾美捷BioXCell在体内抗体这一块非常擅长，可以提供多种不同的抗小鼠 PD-L1 抗体克隆：10F.9G2 、10F.2H11和368A.4H1，这三种抗体都可通过在体内与 PD-L1结合，从而阻断PD-L1。
①PD-L1 #BE0101：
名称 anti-mouse PD-L1
克隆号 10F.9G2
亚型 Rat IgG2b, κ
应用 体内阻断PD-L1, IF, IHC(frozen), FC, WB
免疫原 小鼠CD274
纯度 >95%
同型对照 BE0090
专用稀释液 IP0065
②PD-L1体内抗体#BE0361：
名称 anti-mouse PD-L1
克隆号 10F.2H11
亚型 Rat IgG2b, κ
应用 体内阻断PD-L1/CD80 (B7-1)相互作用, 体外阻断PD-L1/CD80 (B7-1)相互作用，ELISA，FC
免疫原 CHO细胞表达的PD-L1
纯度 >95%
同型对照 BE0090
专用稀释液 IP0070
③PD-L1体内抗体#BE0383：
名称 anti-mouse/human/rat PD-L1
克隆号 368A.4H1
亚型 Mouse IgG1, κ
应用 体内阻断PD-L1, 体外阻断PD-L1, FC
免疫原 人PD-L1-Fc融合蛋白
纯度 >95%
同型对照 BE0083
专用稀释液 IP0070
以上，就是有关PD-L1体内抗体（BE0101）的相关研究。
https://www.amyjet.com/featured/anti-mouse-pd-l1-3.shtml
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PD-1免疫疗法：如何对肿瘤细胞产生杀伤？
PD-1免疫疗法背景：
2015年12月，美国第39届总统吉米·卡特在接受放疗和免疫抗癌新药KEYTRUDA（PD-1抑制剂）治疗后发表声明说，医生在给他做完最近一次脑MRI后，没有发现此前在他大脑中出现的黑色素瘤或新的癌细胞。由此，PD-1抑制剂被民间称为“治愈总统的抗体”。
PD-1抑制剂的诞生，确实为肿瘤医学的进步带来了巨大的跨越：它实现了横跨多个癌种的突破性进展：部分晚期患者实现了长期生存，可以说在现代抗肿瘤的拉锯战中取得了惊人的成绩，医学研究者们甚至断定：免疫治疗将会是未来攻克癌症的主要方向。
PD-1抑制剂的治疗机理有哪些？
PD-1（programmed cell death protein 1）程序性死亡受体1，是一种重要的免疫抑制分子。免疫T细胞是人体健康的安全卫士。在人体内，一些小分子常常能与免疫T细胞上的受体结合，抑制它们的活性。这在一般的情况下能够避免安全卫士攻击自己人，避免乌龙事件。但不幸的是，一些肿瘤细胞也会利用这一点，它会很狡猾地产生一种叫做PD-L1的配体，把它当成自己的保护伞，逃过T细胞的攻击。当它与T细胞上的PD-1受体结合后，会抑制T细胞的活性，让它们进入“休眠”状态。
PD-1抑制治疗是通过解除肿瘤细胞逃避免疫系统的新型免疫疗法。PD-1免疫疗法的作用机制是针对PD-1或PD-L1设计特定的蛋白质抗体，阻止PD-1和PD-L1的识别过程，使睡眠中的T细胞唤醒，部分恢复其细胞功能，从而使T细胞可以识别和杀死肿瘤细胞。
简而言之，这类药物阻断了肿瘤细胞对T细胞的“欺骗”，脱掉肿瘤细胞身上的保护伞，让T细胞能够得以保持活性，对肿瘤细胞产生杀伤。
不同于小分子靶向药物的抗癌谱相对较窄，PD-1抑制治疗为癌症治疗带来了多癌种的突破性进展，部分晚期患者因此长期生存，甚至临床治愈。它帮助晚期恶黑患者将5年生存率从17%提高到34%；经过自体干细胞移植和brentuximab vedotin治疗后复发或难治的经典型霍奇金淋巴瘤患者达到了66%的有效缓解。
目前PD-1抑制剂已被以严格闻名于世的美国FDA批准用于近十种肿瘤的治疗，包括：恶黑、非小细胞肺癌、膀胱癌、肾癌、头颈癌、胃癌、肝癌、霍奇金淋巴瘤和MSI-H的实体瘤……
对于PD-1抑制剂起效的疗效预测因子也在不断探索中，期待将来使用该治疗药物时，能更精准地找出相应获益人群。
艾美捷BioXCell在体内抗体这一块非常擅长，可以提供多种不同的抗小鼠 PD-L1 抗体克隆：10F.9G2 、10F.2H11和368A.4H1，这三种抗体都可通过在体内与 PD-L1结合，从而阻断PD-L1。
①PD-L1 #BE0101：
名称 anti-mouse PD-L1
克隆号 10F.9G2
亚型 Rat IgG2b, κ
应用 体内阻断PD-L1, IF, IHC(frozen), FC, WB
免疫原 小鼠CD274
纯度 >95%
同型对照 BE0090
专用稀释液 IP0065
②PD-L1体内抗体#BE0361：
名称 anti-mouse PD-L1
克隆号 10F.2H11
亚型 Rat IgG2b, κ
应用 体内阻断PD-L1/CD80 (B7-1)相互作用, 体外阻断PD-L1/CD80 (B7-1)相互作用，ELISA，FC
免疫原 CHO细胞表达的PD-L1
纯度 >95%
同型对照 BE0090
专用稀释液 IP0070
③PD-L1体内抗体#BE0383：
名称 anti-mouse/human/rat PD-L1
克隆号 368A.4H1
亚型 Mouse IgG1, κ
应用 体内阻断PD-L1, 体外阻断PD-L1, FC
免疫原 人PD-L1-Fc融合蛋白
纯度 >95%
同型对照 BE0083
专用稀释液 IP0070
以上，就是有关PD-L1体内抗体（BE0101）的相关研究。
https://www.amyjet.com/featured/anti-mouse-pd-l1-3.shtml
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PD-1（BE0101）体内阻断PD-L1, IF, FC, WB
PD-1抑制剂和传统化疗、小分子靶向治疗相比，各自的优势和局限：
PD-1抑制剂免疫治疗与化疗、小分子靶向治疗是患者及医生同行经常讨论的一个热门话题。当前我们应用的阻断PD-1的免疫检查点抑制剂方法，实际上以解放免疫T细胞，来抵抗肿瘤，在于激发自身的免疫潜能。然而PD-1抑制剂仅对部分患者有效，但它一旦起效，疗效可能持续很长时间。不过也有可能矫枉过正，攻击自身的正常组织。
化学治疗为一种抗增殖治疗，主要杀伤生长活跃的组织细胞，选择性相对较差。因此在杀灭肿瘤细胞同时有可能会杀灭正常组织细胞。
小分子靶向治疗则是改变了化疗的缺点，为一种选择性杀伤，类似于生物学导弹，对于有靶点的患者进行精准治疗，这些靶点都是存在于正常组织，有些靶点甚至先天存在。因此，靶向治疗毒性可能小于化疗，但靶向治疗造成的毒性也不能忽视。
这三种治疗方法各有优缺点。相对来讲，免疫治疗与靶向治疗副作用，一般小于化学治疗副作用。
PD-1抑制剂和靶向治疗、传统化疗的联合治疗：
要真正实现治愈肿瘤的目标，当务之急是提高PD-1抑制剂的有效率。所有研究者们都在对这个目标不断奋进。随着研究的深入，免疫联合治疗展现了非常优越的有效性，通过特定的组合，部分肿瘤的控制率达到较好的效果。
举例来说： 2017年6月份召开的美国ASCO年会，PD-1抑制剂Keytruda联合化疗一线用于胃癌的临床数据，令人印象深刻。胃癌：有效率60%，控制率92%。 E7080，又叫乐伐替尼，是一个多靶点的抑制剂。在2017年的欧洲肿瘤学协会年会（ESMO）上， 公布了PD-1抗体Keytruda联合E7080针对肾癌的临床数据，一线使用有效率高达83%。
艾美捷BioXCell在体内抗体这一块非常擅长，可以提供多种不同的抗小鼠 PD-L1 抗体克隆：10F.9G2 、10F.2H11和368A.4H1，这三种抗体都可通过在体内与 PD-L1结合，从而阻断PD-L1。
①PD-L1 #BE0101：
名称 anti-mouse PD-L1
克隆号 10F.9G2
亚型 Rat IgG2b, κ
应用 体内阻断PD-L1, IF, IHC(frozen), FC, WB
免疫原 小鼠CD274
纯度 >95%
同型对照 BE0090
专用稀释液 IP0065
②PD-L1体内抗体#BE0361：
名称 anti-mouse PD-L1
克隆号 10F.2H11
亚型 Rat IgG2b, κ
应用 体内阻断PD-L1/CD80 (B7-1)相互作用, 体外阻断PD-L1/CD80 (B7-1)相互作用，ELISA，FC
免疫原 CHO细胞表达的PD-L1
纯度 >95%
同型对照 BE0090
专用稀释液 IP0070
③PD-L1体内抗体#BE0383：
名称 anti-mouse/human/rat PD-L1
克隆号 368A.4H1
亚型 Mouse IgG1, κ
应用 体内阻断PD-L1, 体外阻断PD-L1, FC
免疫原 人PD-L1-Fc融合蛋白
纯度 >95%
同型对照 BE0083
专用稀释液 IP0070
以上，就是有关PD-L1体内抗体（BE0101）的相关研究。
https://www.amyjet.com/featured/anti-mouse-pd-l1-3.shtml
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PD-1（BE0101）体内抗体，抑制肿瘤细胞的生长
免疫检查点本是人体免疫系统中起保护作用的分子，起类似刹车的作用，防止T细胞过度激活导致的炎症损伤等。
肿瘤细胞利用人体免疫系统这一特性，通过过度表达免疫检查点分子，抑制人体免疫系统反应，逃脱人体免疫监视与杀伤，从而促进肿瘤细胞的生长。
肿瘤通过多种机制发生免疫逃逸
·肿瘤抗原表达下调
·与免疫细胞Cross-talk导致微环境中的免疫抑制增强
·免疫抑制性细胞因子水平升高
·免疫检查点蛋白(checkpointprotein)过表达，如PD-1/PD-L1
PD-L1蛋白广泛表达于抗原提呈细胞(APCs)、活化T、B细胞、巨噬细胞、胎盘滋养层、心肌内皮和胸腺皮质上皮细胞。在许多人类肿瘤组织中均可检测到PD-L1蛋白的表达，且许多癌组织较正常组织中的PD-L1表达水平明显上调。应用免疫组织化学方法，已先后在乳腺癌、肺癌、胃癌、肠癌、食管癌、卵巢癌、宫颈癌、肾癌、膀胱癌、胰腺癌、神经胶质瘤、黑素瘤等人类肿瘤组织中检测到PD-L1蛋白的表达，且PDL1的表达水平和患者的临床及预后紧密相关。
第1款PD-1抗体药物-Keytruda (pembrolizumab)
艾美捷BioXCell在体内抗体这一块非常擅长，可以提供多种不同的抗小鼠 PD-L1 抗体克隆：10F.9G2 、10F.2H11和368A.4H1，这三种抗体都可通过在体内与 PD-L1结合，从而阻断PD-L1。
①PD-L1 #BE0101：
名称 anti-mouse PD-L1
克隆号 10F.9G2
亚型 Rat IgG2b, κ
应用 体内阻断PD-L1, IF, IHC(frozen), FC, WB
免疫原 小鼠CD274
纯度 >95%
同型对照 BE0090
专用稀释液 IP0065
②PD-L1体内抗体#BE0361：
名称 anti-mouse PD-L1
克隆号 10F.2H11
亚型 Rat IgG2b, κ
应用 体内阻断PD-L1/CD80 (B7-1)相互作用, 体外阻断PD-L1/CD80 (B7-1)相互作用，ELISA，FC
免疫原 CHO细胞表达的PD-L1
纯度 >95%
同型对照 BE0090
专用稀释液 IP0070
③PD-L1体内抗体#BE0383：
名称 anti-mouse/human/rat PD-L1
克隆号 368A.4H1
亚型 Mouse IgG1, κ
应用 体内阻断PD-L1, 体外阻断PD-L1, FC
免疫原 人PD-L1-Fc融合蛋白
纯度 >95%
同型对照 BE0083
专用稀释液 IP0070
以上，就是有关PD-L1体内抗体（BE0101）的相关研究。
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PD-1（BE0101）在肿瘤免疫治疗中的作用
PD1/PDL1在肿瘤免疫治疗中的作用
-PD-L1单抗能有效抑制局部肿瘤生长；
-阻断PD-1/PD-L1信号可以促进肿瘤抗原特异性T细胞的增值，发挥杀伤肿瘤细胞的作用；
-阻断肿瘤细胞上相关PD-L1信号可上调浸润CD8T细胞IFN-R的分泌，表明PD-1/PD-L1信号通路的阻断在以诱导免疫应答为目的的肿瘤免疫应答中发挥作用；
-选择抗PD-L1单抗配合肿瘤疫苗进行肿瘤免疫治疗可有效加强肿瘤疫苗的免疫激活作用，减弱肿瘤微环境对疗效的影响；
随着对该通路在肿瘤免疫逃逸现象中所起作用的深入研究，该信号通路在免疫细胞中的作用逐渐被了解。通过阻断T淋巴细胞表面的PD-1蛋白与肿瘤细胞表面的PD-L1蛋白的结合，从而激发免疫系统清除肿瘤细胞的潜力，对肿瘤细胞发起攻击的治疗方法。现已取得一定的临床疗效。
PD-1或PDL-1抗体治疗肿瘤其特应性、安全性更高。
艾美捷BioXCell在体内抗体这一块非常擅长，可以提供多种不同的抗小鼠 PD-L1 抗体克隆：10F.9G2 、10F.2H11和368A.4H1，这三种抗体都可通过在体内与 PD-L1结合，从而阻断PD-L1。
①PD-L1 #BE0101：
名称 anti-mouse PD-L1
克隆号 10F.9G2
亚型 Rat IgG2b, κ
应用 体内阻断PD-L1, IF, IHC(frozen), FC, WB
免疫原 小鼠CD274
纯度 >95%
同型对照 BE0090
专用稀释液 IP0065
②PD-L1体内抗体#BE0361：
名称 anti-mouse PD-L1
克隆号 10F.2H11
亚型 Rat IgG2b, κ
应用 体内阻断PD-L1/CD80 (B7-1)相互作用, 体外阻断PD-L1/CD80 (B7-1)相互作用，ELISA，FC
免疫原 CHO细胞表达的PD-L1
纯度 >95%
同型对照 BE0090
专用稀释液 IP0070
③PD-L1体内抗体#BE0383：
名称 anti-mouse/human/rat PD-L1
克隆号 368A.4H1
亚型 Mouse IgG1, κ
应用 体内阻断PD-L1, 体外阻断PD-L1, FC
免疫原 人PD-L1-Fc融合蛋白
纯度 >95%
同型对照 BE0083
专用稀释液 IP0070
以上，就是有关PD-L1体内抗体（BE0101）的相关研究。
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BE0101：PD-L1特应性、安全性更高
为避免过度活跃的免疫应答导致过度的炎症反应和自身免疫性疾病，人体进化出免疫检查点(immune checkpoint)机制来控制免疫反应的强度和持续时间，最大限度地减少免疫应答对健康组织的损害，主要有CTLA4-B7通路和PD-1/PD-L1通路。
但是肿瘤细胞入侵后，会利用这一抑制性的通路来压制T细胞激活，从而逃脱免疫系统的围剿，即免疫逃逸。
而目前临床上研究和应用最广泛但免疫检查点抑制剂包括CTLA-4、PD-1和PD-L1单抗，通过抑制免疫检查点活性，释放肿瘤微环境中的免疫刹车，重新激活T细胞对肿瘤的免疫应答效应，从而达到抗肿瘤的作用。
PD-1与PD-L1中PD的意思是Programmed Cell Death,程序性的细胞死亡，其实每一个细胞都会定期死亡，比如人体的红血球120天后就会死掉，但接着会有新的红血球生长替代。这些都是有程序的。这个程序中，白细胞起着很关键的作用，它决定红血球的死亡更替。
T细胞作为“人体卫士”,可以识别人体的肿瘤细胞并进行杀伤攻击。在生存压力下，肿瘤细胞会根据T细胞上的蛋白PD-1,产生PD-L1蛋白(PD-1的配体),与T细胞上的蛋白PD-1结合后发出抑制信号，从而阻止T细胞正常运作，并诱导T细胞凋亡。
PD-1/PD-L1
●PD-1是一个诱导表达的蛋白，只有在T细胞活化之后，PD-1才会被诱导表达。此外，PD-1还在胸腺的双阴性(CD4-CD8-)T细胞、活化的NK细胞、单核细胞和未成熟的朗格汉斯细胞上呈低表达。
●PD-1的配体包括PD-L1和PD-L2,两者表现为不同的表达模式。
PD-L1组成性的低表达于抗原递呈细胞(APCs)、以及非造血细胞如血管内皮细胞、胰岛细胞以及免疫豁免部位(如胎盘、睾丸和眼睛)。炎性细胞因子如I型和I型干扰素、TNF-α和VEGF等均可以诱导PD-L1的表达。PD-L2只在被激活的巨噬细胞和树突细胞中有表达。
利用抗PD-1/PD-L1的单克隆抗体阻断PD-1/PD-L1信号通路，在多种实体瘤中显示出卓-越的抗肿瘤疗效。
艾美捷BioXCell在体内抗体这一块非常擅长，可以提供多种不同的抗小鼠 PD-L1 抗体克隆：10F.9G2 、10F.2H11和368A.4H1，这三种抗体都可通过在体内与 PD-L1结合，从而阻断PD-L1。
①PD-L1 #BE0101：
名称 anti-mouse PD-L1
克隆号 10F.9G2
亚型 Rat IgG2b, κ
应用 体内阻断PD-L1, IF, IHC(frozen), FC, WB
免疫原 小鼠CD274
纯度 >95%
同型对照 BE0090
专用稀释液 IP0065
②PD-L1体内抗体#BE0361：
名称 anti-mouse PD-L1
克隆号 10F.2H11
亚型 Rat IgG2b, κ
应用 体内阻断PD-L1/CD80 (B7-1)相互作用, 体外阻断PD-L1/CD80 (B7-1)相互作用，ELISA，FC
免疫原 CHO细胞表达的PD-L1
纯度 >95%
同型对照 BE0090
专用稀释液 IP0070
③PD-L1体内抗体#BE0383：
名称 anti-mouse/human/rat PD-L1
克隆号 368A.4H1
亚型 Mouse IgG1, κ
应用 体内阻断PD-L1, 体外阻断PD-L1, FC
免疫原 人PD-L1-Fc融合蛋白
纯度 >95%
同型对照 BE0083
专用稀释液 IP0070
以上，就是有关PD-L1体内抗体（BE0101）的相关研究。
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操作步骤丨皮质醇ELISA试剂盒简单精准定量
皮质醇ELISA试剂盒运用双抗体夹心ELISA法定量测定其他血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体中皮质醇含量。
艾美捷皮质醇ELISA试剂盒#K003-H1：
检测范围：0.375nmol/L~12nmol/L
灵敏度：0.1
实验原理：将皮质醇(Cor)抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的皮质醇(Cor)与连接于固相载体上的抗体结合，然后加入生物素化的皮质醇(Cor)抗体，将未结合的生物素化抗体洗净后，加入HRP标记的亲和素，再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的皮质醇呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(0.D.值),计算样品浓度。
皮质醇ELISA试剂盒组分：
皮质醇ELISA试剂盒需自备的设备及试剂：
1. 450±10m滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热)
2. 单道或多道微量加液器及吸头
3. 稀释样品的印管
4. 蒸馏水或去离子水
5. 吸水纸
6. 盛放洗液的容器
试剂盒的储存及有效期：
1. 未开封的试剂盒：所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意，收到试剂盒后请尽快将TMB洗涤液，终止液保存于4℃,其他试剂保存于-20℃。
2. 使用后的试剂盒：剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存，开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20°℃,避免潮湿。
注意：
试剂盒内酶标条可拆卸，按实验需求可分多次使用；使用后的剩余试剂盒建议在*实验后1个月内使用完毕。产品过期时间以盒子上的标签为准，保质期内所有组分都确保是稳定的。
皮质醇ELISA试剂盒标本的采集与保存：
1. 血清：
将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4°℃过夜，然后1000×g离心20分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80°℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：
用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8°℃1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20°℃或-80°℃保存，但应避免反复冻融。
3.组织匀浆：
1)取适量组织块，于预冷PBS(0.01mol/L.pH 7.0-7.2)中清洗去除血液，称重后备用(组织块较大需先剪碎后再匀浆);
2)可同时选用多种匀浆方法达到较好的破碎效果：首先将组织块移入玻璃匀浆器，加入5-10mL预冷PBS进行充分研磨，该过程需在冰上进行(有条件实验室可选用机器匀浆);得到的匀浆液可再利用超声破碎或反复冻融进一步处理(超声破碎过程中注意冰浴降温；反复冻融法可重复2次)。
3)将制备好的匀浆液于5000×g离心5分钟，留取上清即可检测。
4.细胞裂解液：
1)贴壁细胞需要先用胰酶消化，离心收集细胞(悬浮细胞可直接离心收集);
2)将收集到的细胞用冷PBS洗3次；
3)物理方法裂解细胞(可先超声破碎细胞，再反复冻融):
i超声破碎：取适量PBS重悬细胞，用一定功率的超声波处理细胞悬液，使细胞急剧震荡破裂。
ii反复冻融：将待破碎的细胞在-200C以下冰冻，室温融解，反复3次，使细胞溶胀破碎。
4)将标本于2-8 °℃1500×g离心10分钟，收集上清备用。
5.细胞培养上清或其它生物标本：
请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20°℃或-80°℃保存，但应避免反复冻融。注意：
1. 以上标本均需密封保存，4℃保存应小于1周，-20℃不应超过1个月，-80°℃不应超过2个月。
2. 标本使用前应缓慢均衡至室温，不应加热使之融解。
3. 实验前红细胞裂解液必须用标准品稀释液稀释。
皮质醇ELISA试剂盒试剂准备
1. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-250C),试剂不能直接在370C溶解。
2. 标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为1000ng/mL。准备7个稀释标准品的印管，每个EP管中加入150μL的标准品稀释液，依次倍比稀释成不同的梯度， 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
3. 浓洗涤液：用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL,进行30倍稀释。
皮质醇ELISA试剂盒操作步骤：
1. 加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μ1,待测样品孔中先加样品
稀释液40μ1,然后再加待测样品10μ (样品*终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
2. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
3. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
4. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
5. 加酶：每孔加入酶标试剂50μ1,空白孔除外。
6. 温育：操作同3。
7. 洗涤：操作同5。
8. 显色：每孔先加入显色剂A50μ1,再加入显色剂B50μ1,轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。
9. 终止：每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
10. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(0D值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
特异性
本试剂盒用于检测皮质醇(Cor),经检测与其它相似物质无明显交叉反应。
由于受到技术及样本来源的限制，不可能完成对所有相关或相似物质交叉反应检测，因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。
精密度
精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%)= SD/mean×100
批内差：取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测.每份样本连续测定20次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批间差：选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批内差： CV<10%
批间差： CV<12%
皮质醇ELISA试剂盒稳定性：
经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂金破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。
https://www.amyjet.com/products/K003-H1.shtml
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三碘甲状腺氨酸 (T3) ELISA试剂盒/Triiodothyronine (T3) ELISA Kit
三碘甲状腺原氨酸（T3）系甲状腺分泌的一种激素。由L-3-单碘酪氨酸与L-3.5-二碘酪氨酸缩合而成。在甲状腺组织中及血液中含量远较甲状腺素少，但其生物活性则比其高5～Chemicalbook10倍。T3有促进物质代谢及能量释放的作用；亦能促进生长与发育。正常成人甲状腺每天分泌30μgT3，血浆中20%的T3来自甲状腺直接分泌，80%来自血浆T4在外周的转化。
三碘甲状腺原氨酸就是T3 ，它是在血里面总体的T3水平。它的升高可能和人体的白蛋白水平有关系。因为它主要是游离的甲状腺素，和甲状腺结合球蛋白相结合，T3在人体内是一般不发挥生物学效应的，只有一些游离的，没有和这些甲状腺球蛋白结合的游离的FT3，它才有这个生物学功能，所以说因为所有的疾病影响到人体白蛋白的水平，都可能会影响T3水平。
药物相互作用：
1.糖尿病患者服用甲状腺激素应视血糖水平适当增加胰岛素或降糖药剂量。
2.甲状腺激素与抗凝剂如双香豆素合用时，后者的抗凝作用增强，可能引起出血。应根据凝血酶原时间调整抗凝药剂量。
3.本类药与三环类抗抑郁药合用时，两类药的作用及毒副作用均有所增强，应注意调整剂量。
4.服用雌激素或避孕药者，因血液中甲状腺素结合球蛋白水平增加，合用时甲状腺激素剂量应适当调整。
5.考来烯胺或考来替泊可以减弱甲状腺激素的作用，两类药配伍用时，应间隔4～5小时服用，并定期测定甲状腺功能。
6.β受体阻滞剂可减少外周组织T4向T3的转化，合用时应注意。
生物活性：
三碘甲状腺原氨酸(T3,Liothyronine,3,3',5-Triiodo-L-thyronine)是一种甲状腺激素，会影响人体的各种生理过程，包括生长发育、新陈代谢、体温和心率等。该药物溶于DMSO，冻存后易析出。可以尝试用NaOH配成储备液。
靶点：
HumanEndogenousMetabolite
体外研究：
锂离子（T3100nM）刺激人甲状腺激素受体hTRβ1表达的肿瘤细胞的增殖化学记录。锂离子与人β1甲状腺激素受体h TRβ1结合，并改变其构象。锂离子促进生长、诱导分化和调节代谢。
艾美捷三碘甲状腺氨酸 (T3) ELISA试剂盒#K056-H检测原理：
DetectX®三碘甲状腺原氨酸（T3)酶免疫测定试剂盒用于定量测量T3目前在提取的血清和血浆、尿液、提取的干燥粪便样品和组织培养基样品中。在进行此测定之前，请阅读完整的试剂盒说明书。该试剂盒测量T3总量提取血清中以及血浆和提取的粪便样品。一个T3提供储备溶液以生成测定的标准曲线，并且应读取所有样品偏离标准曲线。用移液管将标准品或稀释样品移到涂有抗体捕获绵羊抗体。一个T3-将过氧化物酶缀合物添加到标准品和样品中井。结合反应是通过向T3中添加绵羊抗体而引发的每个井。两个小时后孵育，洗涤板并加入基质。底物与结合的T3反应-过氧化物酶标记。短时间培养后，停止反应并检测产生的颜色的强度在能够测量450nm波长的微量滴定板读取器中。T3的浓度在在对样品稀释度进行适当校正后，使用可用软件计算样品大多数读板器。
三碘甲状腺氨酸 (T3) ELISA试剂盒相关研究：
尿肌酐检测试剂盒（2个或10个平板）K002-H1/H5
Throxine（T4）EIA试剂盒K050-H1/H5
皮质醇酶免疫测定试剂盒（Strip Wells）K003-H1/H5
皮质醇酶免疫测定试剂盒（全板）K003-H1W/H5W
葡萄糖比色检测试剂盒（2板）K039-H1
葡萄糖荧光检测试剂盒（2板）K039-F1
https://www.amyjet.com/products/K056-H1.shtml
