来宝网 2023/7/12点击534次
Poly (ADP-Ribose) ELISA试剂盒化验原理&文献参考
聚ADP-核糖基化（Poly ADP-ribosylation，标准杆数）是真核细胞中的一种翻译后修饰，可调节修饰后蛋白质的活性，并将其与其他蛋白质结合他们与其他人的互动。这种修饰是由聚ADP核糖聚合酶介导的（PARPs）和ADP核糖基转移酶2（ART2），其使用烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）作为基底ADP-核糖基化可被PAR降解酶如聚（ADP-核糖）逆转糖水解酶（PARG）和ADP核糖水解酶3（ARH3）（图1）。
聚ADP核糖基化参与不同的生物学功能，如致癌、分化以及细胞死亡。ADP核糖基化活性的失调与诸如癌症、病毒感染和神经变性等疾病。ADPribosation最受研究的作用之一是产生标准杆数链以应对DNA损伤。使用这些标准杆数链募集修复蛋白和染色质重塑因子。因此，DNA修复过程增强。这可能是肿瘤逃避细胞凋亡的一种机制。最近PARP家族成员在治疗某些癌症方面表现出了希望，有三种药物可在美国和欧洲买到，主要用于治疗BRCA突变卵巢癌症
图1：聚ADP核糖基化反应。PARP酶水解NAD+并将ADPribose基团（ADPr）转移到蛋白质受体上。几个相互连接的ADPr单元生成一个长带负电的聚合物。这些聚合物被PARG和ARH3降解。
艾美捷Cell Biolabs Poly (ADP-Ribose) ELISA试剂盒#XDN-5114是一种为快速检测而开发的酶免疫测定试剂盒以及细胞或组织样本中标准杆数水平的定量。通过比较未知样品的吸光度和已知标准曲线的吸光度，确定未知样品中标准杆数的数量。该套件有一个每个试剂盒提供足够的试剂进行多达96次测定，包括标准曲线和未知样本。
Poly (ADP-Ribose) ELISA试剂盒化验原理：
Poly（ADP-核糖）ELISA试剂盒是一种夹心ELISA试剂，用于定量测定标准杆数。首先将样品或标准杆数标准品添加到单克隆抗PAR抗体涂层微孔板中。在短暂培养后，添加抗PAR多克隆检测抗体，然后添加HRP结合的第二抗体。添加基质后，发生比色反应用比色板读数器测量。未知样品中的标准杆数含量由以下公式确定将此吸光度与标准杆数聚合物标准曲线中的吸光度进行比较。
Poly (ADP-Ribose) ELISA试剂盒组分：
箱子1（在室温下装运）
1.96孔蛋白质结合板（零件号231001）：一个带孔96孔板
2.抗聚（ADP核糖）涂层抗体（零件号51146C）：一个20µL小瓶
3.抗聚ADP核糖检测抗体（零件号51142C）：一个15µL小瓶
4.第二抗体，HRP缀合物（1000X）（零件号51143C）：一个15µL小瓶
5.含量测定稀释剂（零件号310804）：一瓶50 mL
6.10X洗涤缓冲液（零件号310806）：一瓶100毫升
7.基质溶液（零件号310807）：一个12 mL琥珀色瓶子
8.停止溶液（零件号310808）：一瓶12 mL
9.100X PARP抑制剂（零件号51145C）：一瓶3 mL琥珀色3-氨基苯甲酰胺（3-AB）
在二甲基亚砜中为100 mg/mL（735 mM）
箱子2（蓝色冰袋装运）
1.聚（ADP核糖）标准品（零件号51144D）：一个10µL小瓶，2.5µM。
Poly (ADP-Ribose) ELISA试剂盒文献参考：
1. Miwa, M. and Masutani, M. (2017). PolyADP-ribosylation and cancer. Cancer Sci. 98(10):1528-
35.
2. Lüscher, B. et al. (2018). ADP-Ribosylation, a Multifaceted Posttranslational Modification
Involved in the Control of Cell Physiology in Health and Disease. Chem Rev. 118(3):1092-1136.
3. Martin-Hernandez, K. et al. (2017). Expanding functions of ADP-ribosylation in the maintenance
of genome integrity. Semin Cell Dev Biol. 63:92-101.
https://www.amyjet.com/products/XDN-5114.shtml
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降血钙素(Calcitonin)ELISA试剂盒试验原理
降血钙素(Calcitonin)ELISA试剂盒适用于猴子血清、血浆中CT浓度的体外定量测定和其他生物流体。
艾美捷降血钙素(Calcitonin)ELISA试剂盒#EKE61934参数说明：
规格：96孔板
目标同义词：猴子CT
物种反应性：猴子
样品类型：血清、血浆、生物体液
检测范围：15.63-1000皮克/毫升
敏感性：9.38 皮克/毫升
预计周转时间：7-11 个工作日
检测方法：色度
检测时间：4.5小时
应用：酶联免疫吸附法
检测类型：三明治
运输条件：冰袋
存储：短期：4°C;长期：见手册。
使用注意事项：终止液是酸性的。不要让皮肤或眼睛接触。
有效期：6个月
仅供研究使用。不适用于诊断程序。不用于人类或动物药物或食品用途。
降血钙素(Calcitonin)ELISA试剂盒试验原理：
该 ELISA 试剂盒使用三明治 ELISA 作为方法。该试剂盒中提供的微型 ELISA 板已预先包被 Monkey CT 特异性抗体。 将标准品或样品添加到适当的微型 ELISA 板孔中并与特异性抗体结合。然后将Monkey CT和亲和素-辣根过氧化物酶（HRP）偶联物特异性生物素化检测抗体依次加入到每个微孔板中并孵育。游离的成分被冲走。将底物溶液加入到每个孔中。只有那些含有猴子CT，生物素化检测抗体和亲和素-HRP偶联物的孔才会显示为蓝色。通过加入终止溶液终止酶-底物反应，颜色变为黄色。光密度（OD）在450nm±2nm的波长下通过分光光度法测量。OD值与猴CT的浓度成正比。通过将样品的OD与标准曲线进行比较，可以计算样品中Monkey CT的浓度。
https://www.amyjet.com/products/EKE61934.shtml
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IgA (Mouse) ELISA试剂盒试剂准备&应用分析
IgA (Mouse) ELISA试剂盒内包含了IgA （小鼠源） ELISA所需的所有试剂和相关组份。简单快捷的方案设计和优化的试剂配比，为科研工作者提供优质的IgA （小鼠源） ELISA实验分析方案。
艾美捷IgA (Mouse) ELISA试剂盒#KA1943参数说明：
描述：IgA（小鼠）ELISA 试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定法，用于定量测定小鼠血浆或血清中的 IgA。
适合样品：血浆，血清，尿液。
样品量：100 uL
标签：HRP偶联物
检测方法：色度
检测类型：定量的
校准范围：12.5 至 400 纳克/毫升
检测限：1.167
反应：鼠
监管状态：仅供研究使用 （RUO）
储存说明：将试剂盒储存在 4°C。
试剂准备
使用前，将所有试剂置于室温（16°C至25°C）。
浓缩稀释剂
提供的稀释液为5倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水稀释1/5（1份缓冲浓缩物，4份dH2O）。
浓缩洗涤液
提供的洗涤液为20X浓缩液，必须用蒸馏或去离子水稀释1/20水（1份缓冲浓缩物、19份dH2O）。当储存温度低。稀释前将浓缩液加热至30-35°C即可溶解晶体。
酶抗体结合物
通过添加10µL酶抗体缀合物至990µL 1X稀释剂，用于测试的每个测试条。稀释使用前立即使用，并避光。搅拌均匀，但要轻柔。避免起泡。
预涂ELISA微板
随附随用。
分析程讯：
1.所有样品和标准品应一式两份进行分析。
2.应尽快将标准品和试样装入ELISA孔中，以避免OD读数发生变化。使用多通道移液管可以减少这种情况的发生。移液管100μL
标准品0（0.0 ng/mL），一式两份
标准品1（6.25 ng/mL），一式两份
标准品2（12.50 ng/mL），一式两份
标准品3（25 ng/mL）一式两份
标准品4（50 ng/mL），一式两份
标准品5（100 ng/mL），一式两份
标准品6（200 ng/mL），一式两份
标准品7（400 ng/mL）一式两份
3.用移液管将100μL样品（一式两份）移入预先指定的孔中。
4.将微量滴定板在室温下培养六十（60±2）分钟。保持平板覆盖并保持水平在孵化过程中。
5.培养后，吸出孔中的内容物。
6.用适当稀释的洗涤液完全填充每个孔，并抽吸。重复三次，对于总共四次洗涤。如果手动洗涤：用洗涤缓冲液完全填充井，翻转板，然后把废物容器里的东西倒出来。接下来，在吸收剂上剧烈敲击井纸张去除残留的缓冲液。重复3次，总共清洗4次。
7.用移液管将100μL适当稀释的酶抗体缀合物移到每个孔中。在室内孵化温度保持三十（30±2）分钟。培养过程中，将培养皿覆盖在黑暗中并保持水平。
8.如步骤5/6中所述，洗涤并印迹孔。
9.用移液管将100μL TMB底物溶液移到每个孔中。
10.在室温下在黑暗中培养精确十（10）分钟。
11.10分钟后，向每个孔中加入100μL停止溶液。
12. 在30分钟内测定每个孔的内容物的吸光度（450nm）。校准铭牌制造商规范的阅读器
IgA (Mouse) ELISA试剂盒特点：
1、试剂盒内含有分析所需的所有必需试剂，操作简单便捷；
2、试剂盒内组分经实验优化，确保更高的检测灵敏度
https://www.amyjet.com/products/KA1943.shtml
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IgG1 (Mouse) ELISA试剂盒，简单快捷的方案设计
IgG1 （小鼠源） ELISA试剂盒内包含了IgG1 （小鼠源） ELISA所需的所有试剂和相关组份。简单快捷的方案设计和优化的试剂配比，为科研工作者提供优质的IgG1 （小鼠源） ELISA实验分析方案。
艾美捷IgG1 (Mouse) ELISA试剂盒#KA2468参数说明：
描述：IgG1（小鼠）ELISA试剂盒用于定量测量小鼠血清和血浆中的IgG1。
适合样品：血浆、血清
样品量：100 uL
标签：HRP 偶联
检测方法：色度
检测类型：定量的
校准范围：1.56 至 50 纳克/毫升
反应：鼠
仅供研究使用 （RUO）
IgG1 (Mouse) ELISA试剂盒分析原理：
该方法使用山羊抗鼠IgG固相（微量滴定孔）固定和辣根过氧化物酶（HRP）结合山羊抗鼠IgG1抗体进行检测。捕获抗体为小鼠IgM和IgA琼脂糖柱交叉吸附，检测抗体交叉吸附对小鼠IgM、IgA、IgG2a、IgG2b和IgG3进行琼脂糖染色，从而确保对IgG1的特异性。交叉反应性其他物种的免疫球蛋白尚未研究。将供试品稀释并与制备的小鼠IgG1一起在微量滴定孔中孵育45分钟标准。随后冲洗微量滴定孔。加入HRP结合物，孵育30分钟。因此，IgG1分子夹在固定抗体和检测抗体之间。水井然后清洗以去除未结合的HRP标记抗体，添加TMB试剂并培养20室温下的分钟。这会产生蓝色。颜色显影被停止加入停止溶液，改变颜色为黄色。分光光度法测量光密度在450 nm处。IgG1的浓度与试样的光密度成正比从标准曲线。
IgG1 (Mouse) ELISA试剂盒标准曲线：
https://www.amyjet.com/products/KA2468.shtml
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皮质酮ELISA试剂盒/Corticosterone ELISA Kit
皮质酮（肯德尔化合物'B'）是一种由肾上腺皮质分泌的类固醇激素。肾上腺皮质在促肾上腺皮质激素刺激下产生这种醛固酮前体皮质酮。皮质酮（CORT）是压力的重要指标，是非人类哺乳动物中产生的突出压力类固醇。
在“战斗或逃跑”反应中观察到急性水平的CORT，而慢性水平与严重的健康问题有关。CORT是一种记忆调节激素，可以穿过血脑屏障与多个大脑区域相互作用并影响记忆巩固。严重的烧伤和严格的饮食限制会导致皮质酮水平升高。除了压力水平外，皮质酮还通过其警觉性支持作用在睡眠 - 觉醒模式中起着决定性的作用，增加了觉醒能力。皮质酮在鸟类中也起着显着的发育和行为功能。
艾美捷皮质酮ELISA试剂盒/Corticosterone ELISA Kit#K014-H1规格：
检测类型：有竞争力的酶联免疫球蛋白
样品类型：血清，血浆，尿液，呼吸蒸气，组织培养基，羽毛，头发，粪便提取物
敏感性：20 μL 规格为 9.50 pg/mL，14 μL 规格为 4.100 pg/mL
物种：皮质酮在不同物种之间是相同的
检测持续时间：1.5 小时
样品/板：37 一式两份
读数：比色法，450 nm
标准曲线：
皮质酮ELISA试剂盒/Corticosterone ELISA Kit检测原理：
皮质酮多格式 ELISA 试剂盒可定量测量血清、血浆、尿液、呼吸蒸气、组织培养基、羽毛、头发和粪便提取物中的皮质酮。皮质酮多格式 ELISA 试剂盒是一种有竞争力的 ELISA，运行时间为 1.5 小时。该多格式试剂盒允许您根据检测的预期灵敏度使用不同的样品起始量。使用 50 μL 输入，预期灵敏度为 20.9 pg/mL，使用 100 μL 的预期灵敏度为 14.4 pg/mL。在进行此测定之前，请阅读完整的试剂盒说明书以获取更多信息。
使用我们提供的皮质酮标准品生成测定的标准曲线。将标准品或稀释的样品移液到涂有我们的驴抗羊IgG抗体的透明微量滴定板中。加入皮质酮过氧化物酶偶联物和皮质酮多克隆绵羊抗体。然后将混合物孵育1小时，在室温下振荡。免疫反应发生在抗皮质酮多克隆抗体、样品或标准品中的皮质酮抗原和皮质酮-过氧化物酶偶联物之间。随着样品中皮质酮浓度的增加，结合的皮质酮-过氧化物酶偶联物减少，导致信号降低，反之亦然。
孵育1小时后，洗去多余的皮质酮-过氧化物酶偶联物并加入TMB底物。TMB底物与结合的皮质酮-过氧化物酶偶联物反应，产生由酶标仪在450nm处检测到的信号。使用强度和标准曲线计算样品中的皮质酮浓度。
https://www.amyjet.com/products/K014-H1.shtml
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Corticosterone Multi-Format ELISA Kit定量检测
Corticosterone Multi-Format ELISA Kit定量测量血清、血浆、尿液、呼吸蒸汽、组织培养基、羽毛、头发和粪便提取物中的皮质酮。皮质酮多格式ELISA试剂盒是一种竞争性ELISA试剂盒，运行时间为1.5小时。该多格式试剂盒允许您根据分析的预期灵敏度使用不同的样品起始量。使用50μL输入，预期灵敏度为20.9 pg/mL，使用100μL输入灵敏度为14.4 pg/mL。
使用Arbor Assays的Corticosterone Multi-Format ELISA Kit生成用于测定的标准曲线。用移液管将标准品或稀释的样品移到涂有我们的驴抗羊IgG抗体的透明微量滴定板中。加入皮质酮过氧化物酶偶联物和皮质酮多克隆绵羊抗体。然后将混合物温育1小时，在室温下摇动。免疫反应
艾美捷Corticosterone Multi-Format ELISA Kit#K014-H1规格：
化验类型：竞争ELISA
样本类型：血清、血浆、尿液、呼吸蒸汽、组织培养基、羽毛、毛发、粪便提取物
规格：50µL格式20.9 pg/mL，100µL格式14.4 pg/mL
种：皮质酮在不同物种之间是相同的
化验持续时间：1.5小时
样品/平板：37一式两份
读数：比色法，450 nm
Corticosterone Multi-Format ELISA Kit相关研究：
促肾上腺皮质激素（ACTH）ELISA试剂盒K072-H1/H5
皮质酮化学发光ELISA试剂盒K014-C1/C5
皮质醇ELISA试剂盒（带孔和全板）K003-H1/H5/H1W/H5W
可的松化学发光ELISA试剂盒K017-C1/C5
可的松ELISA试剂盒K017-H1/H5
血红蛋白高灵敏度检测试剂盒K013-HX1/HX5
尿肌酐检测试剂盒K002-H1/H5
https://www.amyjet.com/products/K014-H1.shtml
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EvaGreen染料——定量实时PCR的重要作用
EvaGreen 染料是一种绿色荧光核酸染料，其特征使得该染料可用于多种应用，包括qPCR和DNA熔解曲线分析、嗜热解旋酶依赖性扩增（tHDA）的实时监测和毛细管凝胶电泳。染料本身基本上是非荧光的，但在与dsDNA结合时变得高度荧光。DNA结合的染料具有与荧光素（FAM）或SYBR非常接近的激发和发射光谱 绿色I，使其易于与配备有488 nm氩激光器或具有该区域波长的任何可见光激发的仪器兼容。
艾美捷EvaGreen#31000染料在热和水解方面都非常稳定，在常规处理过程中提供了便利。EvaGreen 与SYBR不同，染料不渗透细胞膜，因此无致突变性和细胞毒性 绿色I，它迅速进入细胞，是一种强大的突变增强剂。
EvaGreen的独特性能 染料使其在定量实时PCR（qPCR）应用中特别有用。与广泛使用的SYBR相比 绿色I，EvaGreen 染料通常对PCR的抑制性较小，并且不太可能引起非特异性扩增。因此，EvaGreen 染料可以以比SYBR高得多的染料浓度使用 绿色I，产生用于液滴数字PCR、实时PCR和熔解曲线分析的高分辨率信号。
EvaGreen qPCR主混合液，用于灵敏、价格有竞争力的qPCR试剂。Biotium还有噻唑绿色，1000 X的DMSO溶液。
EvaGreen特点：
低PCR抑制：显示出比SYBR低得多的PCR抑制 绿色I通过智能“按需释放”DNA结合技术
高灵敏度：染料的低PCR抑制允许较高的染料浓度用于大得多的qPCR和熔解曲线分析信号
无致突变性和无细胞毒性：标准艾姆斯试验无致突变性和细胞毒性; 完全不透细胞膜 与快速PCR方案兼容 对PCR的最小干扰使得可以显著缩短链延伸时间
与多重PCR兼容：当以推荐浓度使用时，扩增子之间无染料迁移
优质的热稳定性、化学稳定性和光稳定性：在PCR缓冲液中在95-100°C下持续48小时没有可检测的染料分解; 在碱性或酸性条件下高度稳定; 可承受反复冻融循环
光谱与SYBR相似 绿色岛：兼容所有主要品牌的qPCR仪器和酶系统
EvaGreen属性：
探测细胞定位：PCR/qPCR, HRM
对于活细胞或固定细胞：500/530 nm（含 DNA）
检测类型/选项：20X（25 微米）
细胞渗透性：储存在 -10 至 -35 °C
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EvaGreen Dye：更安全、更稳定的PCR染料
EvaGreen Dye 是一种获得专利的绿色荧光核酸染料，它本身基本上不发荧光，但在与 dsDNA 结合后会发出高度荧光。它非常适合各种应用，包括 qPCR 和 DNA 熔解曲线分析、HRM、LAMP、数字 PCR、嗜热解旋酶依赖性扩增 (tHDA) 的实时监测、毛细管凝胶电泳等。染料在水中以 20X (25 uM) 的浓度提供。
艾美捷EvaGreen Dye / EvaGreen荧光定量PCR染料#31000优点：
比 SYBR Green 更亮且抑制更少
环境安全、非诱变和无细胞毒性
无与伦比的热稳定性、化学稳定性和光稳定性
与多重 PCR 具有出色的兼容性
直接可视化凝胶中的扩增产物
兼容常见的qPCR仪器和酶系统
EvaGreen Dye / EvaGreen荧光定量PCR染料特色：
EvaGreen Dye 采用新颖的“按需释放”机制设计。在没有 DNA 的情况下，染料呈现无活性的构象。当 DNA 可用时，染料会转变为结合 DNA 以发射荧光的活性构象。染料的这种特性提供了一种独特的机制，可以从非活性储备中持续提供活性形式的染料，因为在 PCR 过程中会产生更多的 DNA。因此，EvaGreen Dye 可以在比 SYBR Green I 高得多的染料浓度下使用，从而通过 DNA 熔解曲线分析为数字 PCR、实时 qPCR、HRM 和多重 qPCR 产生高分辨率信号。
EvaGreen Dye：更安全、更稳定的PCR染料：
EvaGreen Dye 环保、无诱变和无细胞毒性，因为它不渗透细胞膜，与 SYBR Green I 不同，SYBR Green I 可快速进入细胞并被认为是一种强大的突变增强剂。EvaGreen Dye 处理更方便，因为它在 PCR 缓冲液中 95-100°C 48 小时没有可检测到的染料分解；在碱性或酸性条件下高度稳定；并经受反复的冻融循环。
Biotium的Forget-Me-Not™ EvaGreen qPCR Master Mix with ROX以及Forget-Me-Not™ EvaGreen qPCR Master Mix with 2-Color Tracking在方便的即用型 qPCR Master Mix 中使用 EvaGreen Dye出色的灵敏度和有竞争力的价格。
EvaGreen Dye / EvaGreen荧光定量PCR染料参考：
1. Lab Chip (2010) Oct 21;10(20):2666-72 doi: 10.1039/c004521g
2. Anal Chem (2010) 82, 6, 2310-2316 doi: 10.1021/ac902510u
3. J Am Chem Soc (2011) 133, 44, 17705-17712 doi: 10.1021/ja2060116
4. Anal Chem (2013) 85, 23, 11619-11627 doi:10.1021/ac403061n
5. Anal Chem (2013) 85, 2 , 11129-11136 doi: 10.1021/ac4030413
6. Nucleic Acids Res (2013) Oct;41(18):e175 doi:10.1093/nar/gkt684
7. Analyst (2014) Jun 7;139(11):2695-701 doi : 10.1039/c3an02334f
