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AntiFix通用抗原修复缓冲液，简化 HIER 优化

Abcam通用HIER抗原检索试剂10XnBiocare Diva Declaker 10XnR&D系统VisUCyte抗原检索试剂通用，10XnBioLegend检索所有抗原解锁系统1：通用，10X

艾美捷抗原修复液#BTM-22030：

中文名称：AntiFix 通用抗原修复缓冲液，10 X，50 mL

英文名字：AntiFix Universal Antigen Retreival Buffer, 10X, 50 mL

Biotium编号：BTM-22030-50mL

规格:50ug

保存建议：室温

AntiFix™ 通用抗原修复缓冲液在中性 pH 条件下为多种目标提供出色的热暴露，减少了对缓冲液优化的需求。

AntiFix™ 通用抗原修复缓冲液特征：

在中性 pH 条件下对多种靶标进行出色的抗原修复

简化 HIER 优化

通过使用酪胺扩增的荧光染色进行验证

无毒不易燃

来源：https://www.amyjet.com/products/BTM-22030-50mL.shtml

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AntiFix通用抗原修复缓冲液，10 X，50 mL解决方案

AntiFix 通用抗原检索缓冲液专为热诱导表位设计福尔马林固定、石蜡包埋（FFPE）组织的回收（HIER）。缓冲器使用一种专有试剂来催化甲醛交联的逆转以恢复抗原反应性。

用福尔马林（甲醛）固定组织可以保持组织形态，但通过甲醛交联蛋白质可以修饰抗体结合位点或表位，因此它们不再可通过免疫组织化学检测。传统上表位反应性通过使用蛋白酶处理或通过在低pH柠檬酸盐缓冲液或高pH Tris缓冲液。抗原的最佳方法不同表位的检索不同，需要使用多个缓冲液不同的目标。

AntiFix 通用抗原回收缓冲液的配方可提供在中性pH下对各种目标进行出色的热揭，降低需要优化缓冲区。它已在免疫荧光染色中得到验证使用HRP-介导的酪胺信号放大，用我们的下一代荧光CF®染料对FFPE组织进行染色。

艾美捷抗原修复液#BTM-22030：

中文名称：AntiFix 通用抗原修复缓冲液，10 X，50 mL

英文名字：AntiFix Universal Antigen Retreival Buffer, 10X, 50 mL

Biotium编号：BTM-22030-50mL

规格:50ug

保存建议：室温

AntiFix 通用抗原修复缓冲液在中性 pH 条件下为多种目标提供出色的热暴露，减少了对缓冲液优化的需求。

AntiFix 通用抗原修复缓冲液特征：

在中性 pH 条件下对多种靶标进行出色的抗原修复

简化 HIER 优化

通过使用酪胺扩增的荧光染色进行验证

无毒不易燃

AntiFix 通用抗原修复缓冲液相关研究：

23007 TrueBlack Lipofuscin Autofluorescence Quencher

23012 TrueBlack IF Background Suppressor System (Permeabilizing)

23013 TrueBlack WB Blocking Buffer Kit

40083 NucSpot 470 Green Nuclear Counterstain

40061 RedDot 2 Far Red Nuclear Counterstain

23001-

23002 EverBrite Mounting Medium (with or without DAPI)

23003-

23004 EverBrite Hardset Mounting Medium (with or without DAPI)

23005 CoverGrip Coverslip Sealant

22005 Mini Super HT Pap Pen 2.5 mm tip, ~400 uses

22006 Super HT Pap Pen 4 mm tip, ~800 uses

33000

33020 CF Dye or Biotin Tyramide Amplification Kits

22029 Tyramide Amplification Buffer Plus

92300-

92302 Mix-n-Stain  HRP Antibody Labeling Kits

22023 Paraformaldehyde, 4% in PBS, Ready-to-Use Fixative

22016 Permeabilization Buffer

22017 Permeabilization and Blocking Buffer

22020 10X Phosphate Buffered Saline (PBS) (4L Cubitainer)

22013 Bovine Serum Albumin Fraction V

22014 Bovine Serum Albumin 30% solution

22010 10X Fish Gelatin Blocking Agent

22011 Fish Gelatin Powder

30015 DAB Substrate Kit

来源：https://www.amyjet.com/products/BTM-22030-50mL.shtml

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免疫组化笔的多种应用范围及操作方案

免疫组化笔 SuperHT PAP Pen广泛使用于各大小医院、癌症医疗研究中心、动物检疫中心以及大专院校的病理、细胞、化学、免疫组化等实验室，它适用于玻璃切片的各种免疫组织化学染色实验，如PAP 法, ABC法，免疫荧光法，冰冻切片及原位杂交技术， 可减少抗体和试剂用量，避免染色时液体流淌和扩散，提高操作速度。

应用范围：免疫组化染色、免疫荧光染色、原位杂交、特殊染色等实验。

艾美捷免疫组化笔 SuperHT PAP Pen#BTM-22006在载玻片组织周围绘制防水圈，并通过将液体汇集在单个液滴中来防止浪费宝贵的试剂。Mini SuperHTPAP Pen具有更细的2.5 mm尖端，可用于约400次应用。Biotium还提供常规尺寸的SuperHT巴氏笔，其尖端为4 mm，可用于约800次应用。  Super HTPap Pen屏障不溶于水性缓冲液、洗涤剂、乙醇和丙酮，但可用二甲苯去除。屏障在高达120°C的温度下是稳定的。

图1：第一次使用前先填充笔尖。A、 笔尖包装干燥。B、 新闻提示向下靠在显微镜载玻片上，直到尖端完全充满绿色液体（C）。

图2：制造障碍。A、 在剖面周围画一个不间断的圆圈用巴氏笔。B、 将缓冲液移液到屏障中。添加足够的缓冲区填充屏障而不溢出（C）。

免疫组化笔 SuperHT PAP Pen特征：

在载玻片上的组织样本周围绘制防水屏障

保存珍贵的抗体和试剂

屏障不溶于水性缓冲液、洗涤剂、酒精和丙酮

阻隔层在高达 120°C 的温度下保持稳定

笔含有疏水性有机溶剂

免疫组化笔 SuperHT PAP Pen相关研究：

23001 EverBrite™ Mounting Medium 10 mL

23002 EverBrite™ Mounting Medium with DAPI 10 mL

23003 EverBrite™ Hardset Mounting Medium 10 mL

23004 EverBrite™ Hardset Mounting Medium with DAPI 10 mL

23005 CoverGrip™ Coverslip Sealant 15 mL

40061-T RedDot™2 Far Red Nuclear Counterstain, 200X

in DMSO, Trial Size (15-20 tests) 25 uL

22015 Fixation Buffer 100 mL

22016 Permeabilization Buffer 100 mL

22017 Permeabilization and Blocking Buffer (5X) 100 mL

22010 10% Fish Gelatin Blocking Buffer 100 mL

22011 Fish Gelatin Powder 2 x 50 g

22014 30% Bovine Serum Albumin Solution 100 mL

22002 Tween®-20 50 mL

来源：https://www.amyjet.com/products/BTM-22006.shtml

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免疫组化笔SuperHT PAP Pen，保存珍贵的抗体和试剂

Cat.# Product Name Unit Size

Catalog Number:

Mini Super HT Pap Pen: 22005

Super HT Pap Pen: 22006

Unit Size: 1 pen

Size:

Mini Super HT Pap Pen: 2.5 mm tip, ~400 applications Super HT Pap Pen: 4 mm tip, ~800 applications

Number of applications varies depending on barrier size

Storage and handling: Store at room temperature. The pens contain organic solvents. Avoid skin and eye contact and keep away from open flame. Cap tightly after each use.

Product Description

Super HT Pap Pens are used to create hydrophobic barriers around tissue sections on glass slides to hold staining solutions in place on the slide. This allows the conservation of antibody staining solution or staining of two sections on the same slide with different solutions. The Mini Super HT Pap Pen has a fine point that is useful for separating multiple sections on the same slide. Super HT Pap Pen barriers

are insoluble in aqueous buffers, detergents, alcohol and acetone, but can be removed with xylene. Barriers are stable at temperatures up to 120oC.

Directions

Before first use, fill the tip with barrier fluid. Press the tip down on a clean glass microscope slide to open the tip valve (Figure 1). Keep pressing down until you see the tip fill completely with green liquid. Stop pressing as soon as the tip is completely filled.

Barriers should be created after deparaffinization and rehydration for paraffin sections. For frozen sections, create barriers when slides are dry, before the first buffer incubation step. To create a barrier, dry the area around the section with a cotton swab if necessary. Draw an unbroken circle of Pap Pen fluid around the section (Figure 2). Do not press the valve down while drawing the barrier. Take care to prevent the Pap Pen fluid from touching the tissue section. Let the barrier dry 15-30 seconds before immersing slides or adding buffer. Dry the area immediately outside the barrier if necessary and add just enough buffer to fill the barrier without overflowing. A square of Parafilm can be placed on top of the section to spread the buffer evenly and prevent evaporation. For overnight incubations, slides should be placed in a humidified chamber to prevent evaporation.

艾美捷免疫组化笔 SuperHT PAP Pen#BTM-22006使用方法：

图1：第一次使用前先填充笔尖。A、 笔尖包装干燥。B、 新闻提示向下靠在显微镜载玻片上，直到尖端完全充满绿色液体（C）。

图2：制造障碍。A、 在剖面周围画一个不间断的圆圈用巴氏笔。B、 将缓冲液移液到屏障中。添加足够的缓冲区填充屏障而不溢出（C）。

免疫组化笔 SuperHT PAP Pen特征：

在载玻片上的组织样本周围绘制防水屏障

保存珍贵的抗体和试剂

屏障不溶于水性缓冲液、洗涤剂、酒精和丙酮

阻隔层在高达 120°C 的温度下保持稳定

笔含有疏水性有机溶剂

免疫组化笔 SuperHT PAP Pen规格：

迷你超高温巴氏笔：2.5毫米笔尖，约400次使用

Super HT Pap笔：4毫米笔尖，约800次使用

应用程序的数量因屏障大小而异

来源：https://www.amyjet.com/products/BTM-22006.shtml

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NGS Normalizer Kit：使用离心机快速、高通量且易于处理

NGS Normalization 96-Well Kit Product Insert

Product# 61900

Norgen的NGS Normalizer Kit允许高通量NGS文库PCR扩增子NGS文库PCR产物浓度的净化和标准化（~5±1 ng/µL）。清理去除了所有PCR副产物，包括引物、二聚体、酶和未合并的核苷酸。纯化基于96孔柱色谱法，使用Norgen的专有树脂作为分离基质。金额每个96孔中的Norgen矩阵被优化为具有有限的结合能力，因此每个孔可以洗脱相等浓度的PCR产物。

该过程包括首先添加3卷将缓冲液SK加入到PCR产物中，然后将混合物装载到96孔标准化上盘子然后用所提供的洗涤溶液A洗涤结合的PCR扩增子，以便除去任何残留的杂质，并用洗脱缓冲液B洗脱纯化的PCR扩增子。纯化和标准化的文库PCR扩增子可以用于NGS工作流程和其他测序应用。

艾美捷NGS Normalizer Kit（NGB-61900）组分：

成分       #61900（192种制剂）

缓冲液    SK 30 mL

洗涤液A  2x 38 mL

洗脱缓冲液B 30 mL

胶带       1

96井正火板 2

96井收集板 2

96井洗脱板 2

插件       1

NGS Normalizer Kit优势：

•去除NGS文库PCR过程中留下的引物二聚体

•同时清理和规范库

•使用离心机快速、高通量且易于处理

•足够的洗脱体积（100µL）用于重复或未来的测定

•非磁珠净化

试剂和设备：

•带转子的离心机，用于96孔板组件（如Eppendorf 5810R，Thermo

Fisher IEC Centra CL3系列或Beckman GS-15R）

•微量移液器和多通道移液器

•无DNA酶、气溶胶屏障移液管尖端

•96-100%乙醇

储存条件：

所有溶液应保持密封，并在室温下储存。此套件可稳定使用2装运日期后的年。

此试剂盒仅用于研究目的。它不用于人类或诊断用途。工作时确保穿戴合适的实验服、一次性手套和护目镜使用化学品。

缓冲液SK含有胍盐，应小心处理。胍鎓盐形式与漂白剂结合使用时具有高度反应性的化合物，因此必须小心处理掉这些溶液中的任何一种。

来源：https://www.amyjet.com/products/NGB-61900.shtml

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NGS Normalizer Kit（NGB-61900）使用前注意事项

NGS Normalizer Kit（NGB-61900）：去除引物二聚体；同时清理和规范PCR产品；使用离心法快速（不到20分钟）、高通量且易于处理；足够的洗脱体积（100µL）用于重复或未来的测定；非磁珠净化。

艾美捷NGS Normalizer Kit允许高通量NGS文库PCR扩增子NGS文库PCR产物浓度的净化和标准化（~5±1 ng/µL）。清理去除了所有PCR副产物，包括引物、二聚体、酶和未合并的核苷酸。纯化基于96孔柱色谱法，使用Norgen的专有树脂作为分离基质。金额每个96孔中的Norgen矩阵被优化为具有有限的结合能力，因此每个孔可以洗脱相等浓度的PCR产物。

该过程包括首先添加3卷将缓冲液SK加入到PCR产物中，然后将混合物装载到96孔标准化上盘子然后用所提供的洗涤溶液A洗涤结合的PCR扩增子，以便除去任何残留的杂质，并用洗脱缓冲液B洗脱纯化的PCR扩增子。纯化和标准化的文库PCR扩增子可以用于NGS工作流程和其他测序应用。

NGS Normalizer Kit使用前注意事项：

•应使用变速离心机以获得最大的套件性能。如果变量高速离心机是不可用的，可以使用固定速度的离心机，但减少可以观察到产率。

•通过添加90 mL 96-100%乙醇制备工作浓度的洗涤溶液a（由用户提供）至供应的含有浓缩洗涤溶液的瓶子

A.这将提供128毫升的最终体积。瓶子上的标签有一个盒子，可以检查以表明已添加乙醇。

1.将3体积的缓冲液SK直接添加到包含文库PCR延伸的每个孔中产品（例如：将60µL缓冲液SK添加到20µL文库PCR产物中）。混合方式上下吸移或用胶带涡旋密封板并短暂离心盘子。

2.将96孔归一化板放置在所提供的96孔收集板的顶部。

3.将混合物加入96孔正火板的孔中。

4.以最大速度或3200 x g（约4000 RPM）离心组件2分钟。

5.丢弃流通。重新组装96井正火板和96井收集板。

注：确保每个孔中的所有裂解物都已进入底部盘子如果整个裂解液体积未通过，则再离心2分钟。

6.将400µL洗涤溶液A涂抹在96孔正火板的每个孔上。以最大速度或3200 x g（约4000 RPM）离心组件2分钟。

注：确保每个孔中的所有裂解物都已进入底部盘子如果整个裂解液体积未通过，则再离心2分钟。

7.丢弃流通。重新组装96井正火板和96井收集板。

8.重复步骤6和7，再次清洗盘子。

9.以最大速度或3200 x g（约4000 RPM）离心组件15分钟以使板完全干燥。

10.在纸巾上轻轻拍打96孔正火板的底部。

11.堆叠96孔正火板和96孔洗脱板（提供）。

12.向96孔板的每个孔中加入100µL洗脱缓冲液B。

13.以200 x g（~1000 RPM）离心组件1分钟，然后离心3200 x g（约4000转/分）持续4分钟。

DNA的储存：

使用提供的胶带密封洗脱板。纯化的DNA样品可以在–20°C下储存几天。建议将样品放置在–70°C的温度下用于长期储存

来源：https://www.amyjet.com/products/NGB-61900.shtml

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完全弗氏佐剂（CFA）：提供抗原持续免疫反应

CFAVax完全弗氏佐剂（CFA）是一种含有结核分枝杆菌的油包水乳液（1mg/mL）。CFAVax有三种量：#CFA0010:10mL，#CFA0050:5x10毫升和#CFA0100:10x10毫升。

艾美捷完全弗氏佐剂（CFA）#OZB-CFA0100是一种油包水每毫升含1毫克热杀干乳剂结核分枝杆菌。CFA和IFA使用最多的佐剂广泛应用于实验免疫学。完成弗氏佐剂在实用的兽医疫苗接种。

CFAVax由矿物油和乳化剂的混合物组成以85%v/v油和15%v/v乳化剂的比例。每10个mL CFA小瓶含有10 mg分枝杆菌。重要的是，CFAVax不是预先形成的乳液因此它必须与相等体积的抗原水溶液，随后乳化在使用之前。乳化剂是单油酸曼尼酯由甘露醇作为亲水残基组成的酯和油酸（不饱和C18脂肪酸）作为疏水部分。即使油的作用机制乳液仍然鲜为人知，一些证据建议对NOD2进行部分要求。此外，这些乳液在注射，从而在坏死细胞死亡也可能是它们的佐剂活动免疫反应显著增强分枝杆菌成分的存在吸引巨噬细胞和免疫细胞注射CFA主要诱导Th1应答可引起肉芽肿和严重炎症接种部位的反应。

弗氏佐剂旨在提供释放刺激强细胞所必需的抗原持续的免疫反应。CFA的使用应负责任且谨慎以避免或尽量减少过度炎症。对于大多数应用程序，CFA通常仅用于初始免疫，而IFA是

选择后续免疫接种。

完全弗氏佐剂（CFA）结果示例：

以下结果证明了CFA佐剂对免疫系统反应的影响：

图1：用卵清蛋白（OVA）或OVA+CFA免疫的小鼠的免疫应答。（A） 在没有佐剂（OVA/Sal）、明矾（OVA/alum）或CFA（OVA/CFA）的IP OVA免疫后小鼠血清中OVA-IgE的平均浓度（mg/mL）。（B） 在没有佐剂（OVA/Sal）、明矾（OVA/alum）或CFA（OVA/CFA）的情况下进行IP OVA免疫后，小鼠BAL液中巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞的平均总数 (adapted from Nakada et al. Respiratory research 2014;15:90)

图2：CFA佐剂有利于强Th1应答。用OVA+IFA或OVA+CFA免疫BALB/c小鼠7天后采集引流淋巴结。（A） IFN-和（B）IL-4的产生在与OVA体外孵育72小时后通过ELISA测量。(adapted from Shibaki et al. Exp Derm. 2002;11:163-134).

来源：https://www.amyjet.com/products/OZB-CFA0100.shtml

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多规格不完全弗氏佐剂（IFA）的应用说明

IFAVax不完全弗氏佐剂（IFA）是一种不含分枝杆菌的油包水乳液。IFAVax有三种量：#IFA0010：10mL，#IFA050:5x10毫升和#IFA0100:10x10毫升。

艾美捷不完全弗氏佐剂（IFA）#OZB-IFA0100是一种油包水类似完全弗氏佐剂的乳液（CFA），不添加热杀分枝杆菌（丁酸分枝杆菌）。IFA和CFA是最常用的佐剂，已广泛用于实验免疫学。IFA已用于数十年的兽医疫苗接种实践。IFAVax由矿物油和乳化剂的混合物组成85%v/v油和15%v/v乳化剂的比例。重要的是IFAVax不是预先形成的乳液，因此必须与等体积的抗原，随后在使用前乳化。这个乳化剂是单油酸曼尼酯，一种由以下成分组成的酯亲水性残基甘露醇与油酸（不饱和C18脂肪酸）作为疏水部分。即使油乳液的作用机制仍然存在不太清楚，一些证据表明NOD2的要求。

此外，这些乳液是容易在注射时引起细胞损伤，因此，坏死细胞死亡过程中释放的内源性信号也可能有助于它们的佐剂活性。像与主要诱导Th1应答的CFA相反，IFA缺乏分枝杆菌成分，启动Th2因此炎症性较小。Th2结果的部分原因是库效应允许抗原在注射和抗体滴度的有效提高。弗氏佐剂旨在提供刺激强持久性所必需的抗原免疫反应

CFA的使用应负责任且谨慎以避免或尽量减少过度炎症。对于大多数应用程序，CFA通常仅用于初始免疫，而IFA是选择后续免疫接种。

不完全弗氏佐剂（IFA）结果示例：

图1：用卵清蛋白（OVA）或OVA+IFA免疫的小鼠中的抗体应答。OVA特异性所有同种型（A）或IgG1亚类（B）的抗体在几天后通过ELISA显示用可溶性OVA或用IFA吸附的OVA免疫（adapted from Albuquerque D et al. VacciM 2011;20(2): 1-5)

图2：使用或不使用IFA佐剂的血清抗体对免疫原反应的比较。老鼠用PBS或IFA中的100µg抗体免疫。第7天测定抗体滴度（A） 和14（B）通过ELISA。改编自Gavin等人《科学2006》；314

协议示例：

1.授权小鼠在免疫前至少7天适应动物设施。

2.在100µL生理盐水缓冲液中将抗原稀释至100µg的浓度

3.使用2个锁定路厄注射器制备方案中所述的OVA/CFA乳液，以获得更好的乳液稳定性

4.第1天：在小鼠背部的两个部位皮下注射0.1mL在CFA中乳化的抗原小鼠的数量（每只小鼠总计0.2 mL）

注：每次注射后，将针头插入皮下空间10至15秒，以避免乳液泄漏。小心地拔出针头。

5.第14天：皮下注射0.1 mL在IFA中乳化的抗原，每次一次地点

注：建议在加强后7至10天采集血清样本并检测抗体浓度注射如果浓度低于预期，则可给予额外加强剂量的IFA乳液14天之后。

6.在最后一剂给药后7至14天收集血清并纯化抗体

来源：https://www.amyjet.com/products/OZB-IFA0100.shtml