来宝网 2023/7/5点击647次
艾美捷抗原修复液，可用于荧光染色
AntiFix Universal Antigen Retrieval Buffer可在中性pH条件下对多种靶标进行出色的解蔽。经验证，它可用于使用HRP介导的酪胺信号放大的下一代荧光CF®染料对FFPE组织进行荧光染色。50 mL 10 X缓冲液。
艾美捷抗原修复液#BTM-22030特征：
中文名称:抗脂多糖核心单克隆抗体（克隆号WN1 222-5） 现货
英文名字:Lipopolysaccharide Core， mAb WN1 222-5
Hycult编号:HM6011
规格:50ug
应用类型:FS、IA、P、WB
免疫原:小鼠来源的108sup> heat-killed bacteria
来源宿主:小鼠
反应性:抗脂多糖核心
保存建议:该产品为液体形式，推荐4℃保存，可保存1年。
抗原检索方案：
注：FFPE切片应烘焙在带正电的幻灯片上，以避免抗原回收过程中的组织损失
1.使用标准方案对FFPE切片进行除石蜡和再水合。
2.将幻灯片放入Coplin罐子或微波炉保险柜内的幻灯片架中
容器注意：微波会导致玻璃罐破裂。集装箱应在使用前测试耐热性。
3.准备1X AntiFix™ 组合1的通用抗原回收缓冲液体积为10X的缓冲液，含9体积的dH2O并完全混合。
4.添加足够的1X AntiFix™ 缓冲液以完全覆盖组织切片。通常，缓冲区被添加到磨砂幻灯片标签的级别。典型的5载玻片的Coplin玻璃罐的体积为40 mL，24载玻片的体积为200 mL架子染色皿。
5.加热缓冲区中的幻灯片。使用微波的两种加热方法（a）或下面描述多功能炊具（b）。微波是一种由来已久的技术HIER方法。一种带数字温度控制的厨房多功能锅（例如，Instant Pot®）是微波炉的一种方便的替代品。其他加热HIER常用的方法（如热水浴或商业倾斜室）。
注：用于纸巾加工的厨房设备应为专用设备用于研究实验室，根据您的要求贴上生物危害标签机构或地方法规。
a） 使用微波炉：保持载玻片容器未覆盖或松散覆盖以避免压力积聚。用微波炉加热幻灯片，直到缓冲液沸腾了。持续监控集装箱，继续煮10分钟，根据需要每30-60秒停止一次微波炉以防止缓冲液沸腾。煮沸10分钟后，让容器冷却至室温。
b） 使用多功能锅：放置随锅里的炊具。将滑动容器盖松以避免压力积聚。将滑动容器放在支架上，确保其固定安全地避免倾倒。把锅里装满水，使水位达到一半向上滑动容器。关上锅盖，在98°C下加热45分钟没有压力。热处理完成后，小心地移除将容器从锅中的热水中取出，冷却至室温温度
6.用dH2冲洗载玻片3次O完全移除缓冲区。
7.根据您的方案进行染色。
抗原修复液相关研究：
编号 名称
23007 TrueBlack⑧ Lipofuscin Autofiuorescence Quencher
23012 TrueBlack@ IF Background Suppressor System (Permeabilizing)
23013 TrueBlack@ WB Blocking Bufier Kit
40083 NucSpo 470 Green Nuclear Counterstain
40061 RedDotTM2 Far Red Nuclear Counterstain
23001-
23002 EverBrite Mounting Medium (with or without DAPI)
23003-
23004 EverBrite W Hardset Mounting Medium (with or without DAPI)
23005 CoverGrip" Coverslip Sealant
22005 Mini Super" Pap Pen 2.5 mm tip,-400 uses
22006 Super" Pap Pen 4 mm tip,-800 uses
33000
33020 CF@ Dye or Biotin Tyramide Amplification Kits
22029 Tyramide Amplification Buffer Plus
92300-
92302 Mix-n-Stain"" HRP Antibody Labeling Kits
22023 Paraformaldehyde, 4% in PBS, Ready-to-Use Fixative
22016 Permeabilization Buffer
22017 Permeabilization and Blocking Buffer
22020 10X Phosphate Buffered Saline (PBS)(4L Cubitainer@)
22013 Bovine Serum Albumin Fraction V
22014 Bovine Serum Albumin 30% solution
22010 10X Fish Gelatin Blocking Agent
22011 Fish Gelatin Powder
30015 DAB Substrate Kit
来源：https://www.amyjet.com/products/BTM-22030-50mL.shtml
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中英文说明丨抗原修复液（BTM-22030）方案
AntiFix™ Universal Antigen Retrieval Buffer, 10X
Catalog Number: 22030-50mL, 22030-500mL
Unit Size: 50 mL, 500 mL
Storage and Handling
Store at room temperature. Product is stable for at least 12 months from date of receipt when stored as recommended. The buffer is non-toxic and non-flammable.
Product Description
AntiFix™ Universal Antigen Retrieval Buffer is designed for heat-induced epitope retrieval (HIER) of formalin-fixed, paraffin embedded (FFPE) tissues. The buffer uses a proprietary reagent that catalyzes the reversal of formaldehyde cross-links in FFPE tissue to restore antigen reactivity.
Fixation of tissue with formalin (formaldehyde) preserves tissue morphology, but the cross-linking of proteins by formaldehyde can modify antibody binding sites or epitopes so they are no longer detectable by immunohistochemistry. Traditionally,epitope reactivity is recovered by using protease treatment, or by heating slides in either low pH citrate buffer or high pH Tris buffer. The optimal method for antigen retrieval varies for different epitopes, requiring multiple buffers to be used for different targets.
AntiFix™ Universal Antigen Retrieval Buffer has been formulated to provide excellent heat unmasking for a wide variety of targets at neutral pH, reducing the need for buffer optimization. It has been validated in immunofluorescence staining of FFPE tissue with our next-generation fluorescent CF® dyes using HRPmediated tyramide signal amplification.
AntiFix Universal Antigen Retrieval Buffer可在中性pH条件下对多种靶标进行出色的解蔽。经验证，它可用于使用HRP介导的酪胺信号放大的下一代荧光CF®染料对FFPE组织进行荧光染色。50 mL 10 X缓冲液。
艾美捷抗原修复液#BTM-22030特征：
中文名称:抗脂多糖核心单克隆抗体（克隆号WN1 222-5） 现货
英文名字:Lipopolysaccharide Core， mAb WN1 222-5
Hycult编号:HM6011
规格:50ug
应用类型:FS、IA、P、WB
免疫原:小鼠来源的108sup> heat-killed bacteria
来源宿主:小鼠
反应性:抗脂多糖核心
保存建议:该产品为液体形式，推荐4℃保存，可保存1年。
抗原修复液#BTM-22030相关研究：
编号 名称
23007 TrueBlack⑧脂褐素自身荧光猝灭剂
23012 TrueBlack@IF背景抑制器系统（可渗透）
23013 TrueBlack@WB阻塞式Bufier套件
40083 NucSpo 470绿色核计数器
40061红点TM2远红色核计数器
23001-
23002 EverBrite安装介质（带或不带DAPI）
23003-
23004 EverBrite W硬质合金安装介质（带或不带DAPI）
23005 CoverGrip“Coverslip密封胶
22005 Mini Super“Pap Pen 2.5毫米笔尖，-400次使用
22006 Super“Pap Pen 4毫米笔尖，-800次使用
33000
33020 CF@染料或生物素Tyramide扩增试剂盒
22029 Tyramide扩增缓冲液+
92300-
92302混合正染色“”HRP抗体标记试剂盒
22023聚甲醛，4%PBS，即用型固定剂
22016渗透缓冲液
22017渗透和封闭缓冲液
22020 10X磷酸盐缓冲盐水（PBS）（4L Cubitainer@）
22013牛血清白蛋白组分V
22014牛血清白蛋白30%溶液
22010 10X鱼胶封闭剂
22011鱼胶粉
30015 DAB基板套件
来源：https://www.amyjet.com/products/BTM-22030-50mL.shtml
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免疫组化笔 SuperHT PAP Pen应用范围&特征介绍
免疫组化笔又叫Pap Pen，PAP PEN-笔、DAKO PEN-笔、免疫组织化学PAP笔、超级免疫组化笔、PAP笔、Super Pap Pen，免疫组化笔广泛使用于各大小医院、癌症医疗研究中心、动物检疫中心以及大专院校的病理、细胞、化学、免疫组化等实验室。
应用范围：
它适用于玻璃切片的各种免疫组织化学染色实验，如PAP 法, ABC法，免疫荧光法，冰冻切片及原位杂交技术， 可减少抗体和试剂用量，避免染色时液体流淌和扩散，提高操作速度。
应用范围：免疫组化染色、免疫荧光染色、原位杂交、特殊染色等实验。
使用方法：
先将组织切片脱蜡水化，然后用薄纸抹去在玻片上的组织边缘的液体，再用免疫组化笔在玻片上被检体周围画圈或在组织边缘上下各画一条线，干燥10-15秒，之后将玻片浸在PBS
耐热性能：试验过程中的耐热性为120摄氏度以下
产品特征：
标本制作简单，抗体、试剂等在被画圈内不易流失
艾美捷免疫组化笔 SuperHT PAP Pen#BTM-22006特征：
在载玻片上的组织样本周围绘制防水屏障
保存珍贵的抗体和试剂
屏障不溶于水性缓冲液、洗涤剂、酒精和丙酮
阻隔层在高达 120°C 的温度下保持稳定
笔含有疏水性有机溶剂
常规尺寸：4 毫米尖端，约 800 次应用
迷你尺寸：2.5 毫米尖端，约 400 次应用
免疫组化笔 SuperHT PAP Pen屏障不溶于水性缓冲液、清洁剂、酒精和丙酮，但可以用二甲苯去除。屏障在高达 120°C 的温度下是稳定的。
免疫组化笔 SuperHT PAP Pen#BTM-22006相关研究：
来源：https://www.amyjet.com/products/BTM-22006.shtml
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艾美捷免疫组化笔使用方法及相关研究方案
迷你免疫组化笔 SuperHT PAP Pen在载玻片组织周围绘制防水圈，并通过将液体汇集在单个液滴中来防止浪费宝贵的试剂。迷你免疫组化笔 SuperHT PAP Pen具有更细的2.5 mm尖端，可用于约400次应用。Biotium还提供常规尺寸的SuperHT巴氏笔，其尖端为4 mm，可用于约800次应用。 免疫组化笔 Super HTPap Pen屏障不溶于水性缓冲液、洗涤剂、乙醇和丙酮，但可用二甲苯去除。屏障在高达120°C的温度下是稳定的。
艾美捷免疫组化笔 SuperHT PAP Pen#BTM-22006使用方法：
第一次使用前，用阻隔液填充尖端。将尖端向下压在干净的玻璃杯上显微镜载玻片打开尖端瓣膜（图1）。继续往下压，直到看到尖端完全充满绿色液体。尖端一到就停止按压完全填充。石蜡脱蜡和再水化后应设置屏障章节。对于冷冻切片，在第一次切片之前，在幻灯片干燥时创建屏障缓冲培养步骤。若要创建屏障，请使用棉签（如有必要）。在部分（图2）。拉出挡板时，不要向下按压阀门。小心以防止Pap-Pen液体接触组织切片。让屏障干燥在浸入幻灯片或添加缓冲液之前15-30秒。立即干燥该区域如有必要，在屏障外添加刚好足够的缓冲液以填充屏障溢出。一个正方形的Parafilm®可以放在要展开的部分的顶部缓冲液均匀，防止蒸发。对于过夜孵育，载玻片应放置在加湿室中以防止蒸发。
图1：第一次使用前先填充笔尖。A、 笔尖包装干燥。B、 新闻提示向下靠在显微镜载玻片上，直到尖端完全充满绿色液体（C）。
图2：制造障碍。A、 在剖面周围画一个不间断的圆圈用巴氏笔。B、 将缓冲液移液到屏障中。添加足够的缓冲区填充屏障而不溢出（C）。
免疫组化笔 SuperHT PAP Pen特征：
在载玻片上的组织样本周围绘制防水屏障
保存珍贵的抗体和试剂
屏障不溶于水性缓冲液、洗涤剂、酒精和丙酮
阻隔层在高达 120°C 的温度下保持稳定
笔含有疏水性有机溶剂
相关研究：
cat# 名称 规格
23001 EverBrite“安装介质10 mL
23002带有DAPI的EverBrite M安装介质10 mL
23003 EverBrite M硬质合金安装介质10 mL
23004带有DAPI的EverBrite M硬质固定介质10 mL
23005 CoverGrip'M Coverslip密封胶15毫升
40061-T“RedDotM2远红色核计数器，200X
二甲基亚砜，试验尺寸（15-20次试验）“25μL
22015固定缓冲液100 mL
22016渗透缓冲液100 mL
22017渗透和封闭缓冲液（5X）100 mL
22010 10%鱼胶封闭缓冲液100 mL
22011鱼胶粉2x50g
22014 30%牛血清白蛋白溶液100 mL
22002Tween@-2050毫升
来源：https://www.amyjet.com/products/BTM-22006.shtml
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TSA试剂盒：HRP Goat Anti-Mouse and CF488A信号灵敏度提高100倍
酪酰胺信号放大（TSA）系统可用于检测荧光免疫细胞化学（ICC）、免疫组织化学（IHC）和原位杂交（ISH）技术中的低丰度靶点，可将信号灵敏度提高100倍。TSA荧光试剂盒使用辣根过氧化物酶（HRP）直接催化固定化酶周围的荧光基团共价沉积，该标记过程迅速（小于10 min），沉积标记可直接在标准或共聚焦显微镜下观察。TSA试剂盒可与传统染色方法结合使用用于多色成像，也可以顺序进行两个或更多个酪酰胺反应以标记一个样品上的不同靶标。
TSA技术可用于酶缀合物和合适的生色底物的明场显微镜检查，也可以与抗荧光素酶结合物组合使用。与普通实验相比，使用TSA试剂可显著提高信号灵敏度，同时保持稳定的特异性和分辨率。此外，TSA试剂盒可以显著减少一抗或探针的消耗量。
艾美捷TSA试剂盒：HRP Goat Anti-Mouse and CF488A#BTM-33000组件：
CF® 染料或生物素-酪胺原液
HRP 山羊抗小鼠 IgG(高度交叉吸附)
BSA 用于阻塞
Tyramide Amplification Buffer Plus *
30% 过氧化氢*
TSA试剂盒：HRP Goat Anti-Mouse and CF488A特征：
将灵敏度提高多达 100 倍
使用较低的一抗浓度
增强挑战性样品中的信号，例如人类 FFPE 组织
从 6 种明亮且耐光的 CF® 染料或生物素中选择
该试剂盒包含使用山羊抗小鼠 HRP 二抗和荧光 CF® 染料或生物素进行酪胺信号放大 (TSA) 以增加免疫荧光信号的试剂。
TSA试剂盒：HRP Goat Anti-Mouse and CF488A：
酪胺信号放大试剂盒
酪胺标签 前/后 二级共轭 目录号
CF®488A 490/515 纳米 山羊抗鼠 HRP 33000
山羊抗兔 HRP 33001
链霉亲和素 33002
CF®543 541/560 纳米 山羊抗鼠 HRP 33003
山羊抗兔 HRP 33004
链霉亲和素 33005
CF®568 562/583 纳米 山羊抗鼠 HRP 33006
山羊抗兔 HRP 33007
链霉亲和素 33008
CF®594 593/614 纳米 山羊抗鼠 HRP 33009
山羊抗兔 HRP 33010
链霉亲和素 33011
CF®640R 642/662 纳米 山羊抗鼠 HRP 33012
山羊抗兔 HRP 33013
链霉亲和素 33014
CF®680R 680/701 纳米 山羊抗鼠 HRP 33015
山羊抗兔 HRP 33016
链霉亲和素 33017
生物素-XX 不适用 山羊抗鼠 HRP 33018
山羊抗兔 HRP 33019
链霉亲和素 33020
来源：https://www.amyjet.com/products/BTM-33000.shtml
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试剂制备丨TSA试剂盒：HRP Goat Anti-Mouse and CF488A
酪胺扩增，有时也称为催化报告基因沉积 (CARD)，是一种酶介导的检测方法，它利用辣根过氧化物酶 (HRP) 的催化活性原位产生靶蛋白或核酸序列的高密度标记。据报道，与传统的亲和素-生物素检测相比，酪胺扩增方法的灵敏度提高了 100 倍。可进行多轮酪胺信号放大，进行多重检测。
TSA试剂盒提供了用于小鼠二次检测的所有关键试剂，兔或生物素化的初级抗体，然后在细胞中扩增酪胺信号或组织切片。HRP二级试剂介导标记的酪氨酸酰胺在反应位点附近转化为含有酪氨酸的蛋白质。这允许用大量染料或生物素分子标记的靶蛋白，产生与使用染料标记的第二抗体相比具有更强的荧光信号。
因此，TSA试剂盒提供了高灵敏度和信号背景比的优势，使低丰度靶标的可视化成为可能使用传统的免疫染色方法进行有效标记。
Tyramide扩增可以与染料标记的抗体或其他抗体组合使用用于多色成像的染色方法。两个或多个酪酰胺反应也可以是按顺序执行，以便在一个样品上标记不同的目标。
这些试剂盒可与Biotin XX Tyramide或Biotium的下一代CF®染料一起使用Tyramides与我们的高性能山羊抗小鼠、山羊抗兔，或链亲和素-HRP缀合物。CF®染料提供卓越的亮度和光稳定性与其他荧光染料相比。
艾美捷TSA试剂盒：HRP Goat Anti-Mouse and CF488A#BTM-33000组件：
CF® 染料或生物素-酪胺原液
HRP 山羊抗小鼠 IgG(高度交叉吸附)
BSA 用于阻塞
Tyramide Amplification Buffer Plus *
30% 过氧化氢*
TSA试剂盒：HRP Goat Anti-Mouse and CF488A特征：
将灵敏度提高多达 100 倍
使用较低的一抗浓度
增强挑战性样品中的信号，例如人类 FFPE 组织
从 6 种明亮且耐光的 CF® 染料或生物素中选择
该试剂盒包含使用山羊抗小鼠 HRP 二抗和荧光 CF® 染料或生物素进行酪胺信号放大 (TSA) 以增加免疫荧光信号的试剂。
试剂制备：
1.如果使用甲醛固定，则在PBS中制备3.75%的甲醛溶液在冰上预冷。如果目标蛋白质或结构能够受到甲醇（如肌动蛋白、核仁素）的干扰。
2.如果使用甲醛固定，则制备渗透缓冲液：0.5%Triton®X-100在PBS中。
3.通过将1g BSA溶解在100mL含有0.5%的PBS中来制备封闭缓冲液Triton®X-100。我们建议立即使用阻塞缓冲区。未使用的阻塞缓冲液可以等分，并在-20°C下储存。
4.将100uL的PBS加入到HRP山羊抗兔IgG、HRP山羊抗体小鼠IgG中，或HRP-链亲和素，并涡旋以溶解所有固体，制成1mg/mL的原液解决方案未使用的储备溶液可以在4°C下储存长达3个月。请勿添加叠氮化钠（NaN3)解决方案。
5.仅适用于链亲和素或生物素XX酪酰胺试剂盒：制备生物素封闭洗涤缓冲液：1%BSA和0.05%TWEEN®20在PBS中的溶液。
6.仅适用于链亲和素或生物素XX酪胺试剂盒：制备未标记的链亲和素溶液：0.1mg/mL链霉亲和素在生物素封闭洗涤缓冲液中（在步骤5中制备）。
7.仅适用于链亲和素或生物素XX酪胺试剂盒：制备生物素溶液：0.5 mg/mL生物素封闭洗涤缓冲液中的生物素（在步骤5中制备）。
来源：https://www.amyjet.com/products/BTM-33000.shtml
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艾美捷完全弗氏佐剂（CFA）抗原特异性抗体示例展示
完全弗氏佐剂（CFA）是一种油包水的乳浊液,能够非常有效的诱导产生高滴度的抗体。弗氏完全佐剂含结核分枝杆菌的细胞壁成分,用于初次免疫刺激。佐剂活性来自于油滴中免疫原的 持续释放,并刺激局部免疫反应。
CFAVax由矿物油和乳化剂的混合物组成，比例为85%v/v油和15%v/v乳化剂。每个 10mL 小瓶含有 10 mg 分枝杆菌。重要的是，CFAVax不是预先形成的乳液，因此必须与等体积的抗原水溶液混合，然后在使用前乳化。乳化剂为甘露糖醇单油酸酯，由甘露醇作为亲水残基，油酸（不饱和C18脂肪酸）作为疏水部分组成的酯。OZ Biosciences的VaxOZ佐剂仅用于研究用途。
艾美捷完全弗氏佐剂（CFA）#OZB-CFA0100规格：
10毫升
5x10毫升
10x10毫升
完全弗氏佐剂（CFA）应用：
与引发Th2反应的IFA相反，CFA主要诱导Th1反应。分枝杆菌成分在注射部位吸引巨噬细胞和免疫细胞参与强烈的炎症反应。弗氏佐剂旨在提供刺激强持续免疫反应所必需的抗原的持续释放。对于大多数应用，CFA通常用于初始免疫，而IFA是后续免疫的首选佐剂。
推荐用于：刺激Th1反应，初始免疫，抗体产生。
小鼠免疫产生抗原特异性抗体示例展示：
该快速方案描述了用弗氏佐剂/卵清蛋白抗原乳液免疫小鼠以诱导抗原特异性抗体的高产量。用完全乳化的OVA免疫小鼠弗氏佐剂（CFA），然后是在不完全弗氏佐剂中乳化的蛋白质的加强剂量。
1.授权小鼠在免疫前至少7天适应动物设施。
2.在100µL生理盐水缓冲液中将抗原稀释至100µg的浓度
3.使用2个锁定路厄注射器制备方案中所述的OVA/CFA乳液，以获得更好的乳液稳定性。
4.第1天：在小鼠背部的两个部位皮下注射0.1mL在CFA中乳化的抗原
（每只小鼠总计0.2 mL）
注：每次注射后，将针头插入皮下空间10至15秒，以避免
乳液泄漏。小心地拔出针头。
5.第14天：在一个部位皮下注射0.1mL在IFA中乳化的抗原加强针
注：建议采集血清样本，并在试验后7至10天检测抗体浓度
加强注射。如果浓度低于预期，则可能需要额外加强剂量的IFA乳液
14天后给予。
6. 给药后7至14天收集血清
来源：https://www.amyjet.com/products/OZB-CFA0100.shtml
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完全弗氏佐剂（CFA）使用建议及应用说明
弗氏佐剂旨在提供释放刺激强细胞所必需的抗原持续的免疫反应。CFA的使用应负责任且谨慎以避免或尽量减少过度炎症。对于大多数应用程序，CFA通常仅用于初始免疫，而IFA是选择后续免疫接种。
完全弗氏佐剂（CFA）是一种油包水每毫升含1毫克热杀干乳剂结核分枝杆菌。CFA和IFA使用最多的佐剂广泛应用于实验免疫学。完成弗氏佐剂在实用的兽医疫苗接种。CFAVax由矿物油和乳化剂的混合物组成以85%v/v油和15%v/v乳化剂的比例。每10个mL CFA小瓶含有10 mg分枝杆菌。
重要的是，CFAVax不是预先形成的乳液因此它必须与相等体积的抗原水溶液，随后乳化在使用之前。乳化剂是单油酸曼尼酯由甘露醇作为亲水残基组成的酯和油酸（不饱和C18脂肪酸）作为疏水部分。即使油的作用机制乳液仍然鲜为人知，一些证据建议对NOD2进行部分要求。此外，这些乳液在注射，从而在坏死细胞死亡也可能是它们的佐剂活动免疫反应显著增强分枝杆菌成分的存在吸引巨噬细胞和免疫细胞注射CFA主要诱导Th1应答可引起肉芽肿和严重炎症接种部位的反应。
艾美捷完全弗氏佐剂（CFA）#OZB-CFA0100启动前的建议：
接种物应无外来微生物污染在与推荐使用佐剂。含有完全弗氏佐剂的注射剂应皮下注射：建议将将含有佐剂的接种物分成若干部分在小鼠或大鼠中每个部位注射超过0.1毫升，0.25毫升每个兔子的位置。如果在进行这些操作时导致皮肤坏死指导方针，未来的注射应该间隔更远。
1.使小瓶涡旋以重新悬浮分枝杆菌。
2.在3毫升鲁尔胶中制备1毫升CFAVax佐剂注射器
3.在盐水缓冲液或磷酸盐缓冲液中稀释抗原混合物最终免疫原浓度为10-100µg/100µL（足以免疫小鼠、大鼠和兔子）。
4.在3毫升鲁尔锁式塑料注射器中制备1毫升抗原
5.形成乳液：
a.使用双端锁定连接两个注射器连接器
b.来回按压注射器筒，转移内容物从一个注射器到另一个。白色乳液应该立即形成
c.混合5至10分钟：产生稳定的乳液
d.所得乳液应呈现白色，稳定落入水中时不应散开
注：对于较小的体积，可以通过以下方式进行长时间混合有力地吸吮或涡旋。对于较大的体积，请使用纸巾均化器以形成乳液。
6.在连接之前，分离注射器并排出空气针（小鼠或大鼠21g；兔子19g）
7.根据下表向动物体内注射；这个体积取决于注射部位。
8.有必要将多个注射部位隔开一段距离足以避免炎性病变合并。
注：弗氏佐剂的优先给药途径应为皮下，因为它破坏性较小。可以使用其他路线：肌内、皮内或腹膜内。
完全弗氏佐剂（CFA）应用：
与引发Th2反应的IFA相反，CFA主要诱导Th1反应。分枝杆菌成分在注射部位吸引巨噬细胞和免疫细胞参与强烈的炎症反应。弗氏佐剂旨在提供刺激强持续免疫反应所必需的抗原的持续释放。对于大多数应用，CFA通常用于初始免疫，而IFA是后续免疫的首选佐剂。
推荐用于：刺激Th1反应，初始免疫，抗体产生。
SC =SC = Subcutaneous, IM = Intramuscular, ID = intradermal, IP = intraperitoneal,
IV = IV = intravenous, N.R. = not recommended, N.A. = not acceptable
弗氏推荐量每个注射途径的佐剂/抗原乳液不同的动物种类（改编自Hendriken CFM et Hau J.，2003，载于《实验动物科学手册》卷I） 。
来源：https://www.amyjet.com/products/OZB-CFA0100.shtml
