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艾美捷完全弗氏佐剂（CFA）对免疫系统反应的影响

完全弗氏佐剂 （CFA） 是一种油包水乳剂，每毫升热杀灭结核分枝杆菌含有 1 mg。

CFAVax由矿物油和乳化剂的混合物组成，比例为85%v/v油和15%v/v乳化剂。每个 10mL 小瓶含有 10 mg 分枝杆菌。重要的是，CFAVax不是预先形成的乳液，因此必须与等体积的抗原水溶液混合，然后在使用前乳化。乳化剂为甘露糖醇单油酸酯，由甘露醇作为亲水残基，油酸（不饱和C18脂肪酸）作为疏水部分组成的酯。OZ Biosciences的VaxOZ佐剂仅用于研究用途。

艾美捷完全弗氏佐剂（CFA）#OZB-CFA0100规格：

10毫升

5x10毫升

10x10毫升

完全弗氏佐剂（CFA）应用：

与引发Th2反应的IFA相反，CFA主要诱导Th1反应。分枝杆菌成分在注射部位吸引巨噬细胞和免疫细胞参与强烈的炎症反应。弗氏佐剂旨在提供刺激强持续免疫反应所必需的抗原的持续释放。对于大多数应用，CFA通常用于初始免疫，而IFA是后续免疫的首选佐剂。

推荐用于：刺激Th1反应，初始免疫，抗体产生。

完全弗氏佐剂（CFA）对免疫系统反应的影响：

图1：用卵清蛋白（OVA）或OVA + CFA免疫的小鼠的免疫反应。（A）无佐剂（OVA/Sal）、明矾（OVA/铝佐剂）或CFA（OVA/CFA）的IP OVA免疫后小鼠血清中OVA-IgE的平均浓度（ng/mL）。（B）无佐剂（OVA/Sal）、明矾（OVA/明矾）或CFA（卵/CFA）后，小鼠支气管肺泡灌洗液中巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞的平均总数（改编自Nakada等人）。呼吸研究 2014;15：90）

图2：CFA 佐剂有利于强烈的 Th1 反应。用OVA+IFA或OVA+CFA免疫BALB/c小鼠，7天后收获引流淋巴结。（A）IFN-g和（B）IL-4的产生在与OVA体外孵育72小时后通过ELISA测量。（改编自柴木等人）Exp Derm.2002;11:163-134).

来源：https://www.amyjet.com/products/OZB-CFA0100.shtml

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艾美捷卵清蛋白，OVA参数说明及文献参考

卵清蛋白是免疫学和反应学研究中广泛使用的过敏原模型。市售卵清蛋白经常被内毒素污染，导致伪影和不准确的结果。不含内毒素的EndoGrade卵清蛋白质量上乘，保证内毒素水平（LPS）低于0.1 EU/mg.EndoGrade 卵清蛋白由LIONEX GmbH在德国生产。

艾美捷卵清蛋白，OVA #LET0029规格：

内科 级卵清蛋白，25毫克

货号 LET0027

冻干，不含盐

内毒素水平：< 0.1 EU/mg

内级 卵清蛋白， 100 毫克

货号LET0028

冻干，不含盐

内毒素水平：<0.1 EU/mg

内级 卵清蛋白， 1000 毫克

货号LET0029

冻干，不含盐

内毒素水平：<0.1 EU/mg

卵清蛋白，OVA 特征：

内毒素水平：<0.1 EU/mg

纯度（SDS-Page）：>98%蛋白质

分子量： ~ 45 kDa

来源： 鸡蛋清

CAS 编号： 9006–59–1

形式：冻干

不含盐

同义词： 铂白蛋白、过敏原 Gal dII

卵清蛋白，OVA部分文献参考：

Raaijmakers TK, van den Bijgaart RJE, den Brok MH, Wassink M, de Graaf A, Wagenaars JA, Nierkens S, Ansems M, Scheffer GJ, Adema GJ. Tumor ablation plus co-administration of CpG and saponin adjuvants affects IL-1 production and multifunctional T cell numbers in tumor draining lymph nodes. J Immunother Cancer. 2020 May;8(1):e000649. doi: 10.1136/jitc-2020-000649. PubMed PMID: 32461350. PubMed CentralPMCID: PMC7254152. See more on PubMed

Kim EH, Woodruff MC, Grigoryan L, Maier B, Lee SH, Mandal P, Cortese M, Natrajan MS, Ravindran R, Ma H, Merad M, Gitlin AD, Mocarski ES, Jacob J, Pulendran B. Squalene emulsion-based vaccine adjuvants stimulate CD8 T cell, but not antibody responses, through a RIPK3-dependent pathway. Elife. 2020 Jun 9;9:e52687. doi: 10.7554/eLife.52687. PubMed PMID: 32515732. PubMed CentralPMCID: PMC7314549. See more on PubMed

Abdissa K, Ruangkiattikul N, Ahrend W, Nerlich A, Beineke A, Laarmann K, Janze N, Lobermeyer U, Suwandi A, Falk C, Schleicher U, Weiss S, Bogdan C, Goethe R. Relevance of inducible nitric oxide synthase for immune control of Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis infection in mice. Virulence. 2020 Dec;11(1):465-481. doi: 10.1080/21505594.2020.1763055. PubMed PMID: 32408806. PubMed CentralPMCID: PMC7239028. See more on PubMed

来源：https://www.amyjet.com/products/LET0029.shtml

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艾美捷钥孔血蓝蛋白KLH使用说明

钥孔血蓝蛋白KLH是通过添加磺基SMCC交联剂活化的马来酰亚胺。主动钩子™KLH快速偶联到肽和蛋白质上的游离巯基。这种活化的载体蛋白节省了时间和金钱，因为不需要单独的交联剂，反应是一步反应。

锁孔帽贝血蓝蛋白是一种广泛使用的载体蛋白，因为它的分子量大（4.5x105-1.3x107Da聚集体）和大量伯胺，可以与交联剂反应以偶联肽。

钥孔血蓝蛋白KLH有10毫克小瓶或我们的OneQuant™一次性使用线为8 x 2mg小瓶。

艾美捷钥孔血蓝蛋白KLH#GBS-786-094是KLH（锁孔帽贝血蓝蛋白）的一种预激活形式，具有被磺基SMCC激活，并准备通过半胱氨酸残基。KLH是从软体动物圆纹苏云虫中分离出来的，属于一个巨大的呼吸蛋白家族，血蓝蛋白，发现于软体动物和节肢动物。KLH的大分子量（400‐3000kD）使其成为一种优异的免疫原的选择。钥孔血蓝蛋白 KLH共有300‐600个反应基团可用于连接和制作ActiveHOOK™ KLH是一种出色的载体蛋白。OneQuant钥孔血蓝蛋白 KLH以OneQuant冻干形式提供™ 格式，2mg/瓶。

重要信息：

a.为了确保完全耦合，我们建议使用推荐数量的试剂，因为这些试剂向其上的马来酰亚胺基团提供摩尔过量的肽载体蛋白。

b.对于不溶于1X Optimizer缓冲液III的肽，我们建议使用二甲基亚砜（<30%）。

c.该试剂盒设计用于通过游离巯基残基。埃尔曼试剂（类别号BC87）可以测定游离巯基。如果被氧化，蛋白质和肽可以被0.1-0.5%的β-巯基乙醇（类别号BC98）、5‐50mM DTT（类别号786‐227）或1‐10mM TCEP（类别号786‐230）。还原后，必须去除还原剂，我们建议

使用凝胶过滤旋转柱（SpinOUT™，目录号786‐170786‐171）。此方法不是适用于小肽（MW<1500）。

协议

1.溶解一小瓶（2mg）OneQuant™ 活动挂钩™ 500μl 1X优化器中的KLH缓冲器™ III或适用于巯基反应的缓冲液。

2.使用前立即溶解2-10mg含巯基的肽或蛋白质在500μl 1X Optimizer缓冲区中™ III或适用于巯基反应的缓冲液。

3.将含巯基的肽添加到ActiveHOOK中™ KLH。翻转混合管4-5次。

4.在室温下培养30分钟。混合反应物并孵育在4°C下再加热1小时。

5.用合适的储存缓冲液（如PBS）透析反应1-2小时2-3改变透析缓冲液，以去除未偶联的肽。

6.透析后，载体蛋白-肽缀合物即可使用。承运人蛋白质-肽缀合物可以储存在-20°C下以备日后使用。

将‐NH2修饰为‐SH用于缺乏巯基的蛋白质和肽

1.将待巯基化的肽或蛋白质悬浮在50mM三乙醇胺中，0.15M NaCl，1mM EDTA pH8.0。

2.加入3-4倍摩尔过量的特劳特试剂（Cat#BC95）。

3.在氮气下，在室温下培养反应45分钟。

4.使用SpinOUT从未反应的Traut试剂中分离巯基化产物™列（SpinOUT™ GT‐600（目录号786‐170））或透析

来源：https://www.amyjet.com/products/GBS-786-094.shtml

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艾美捷阳离子化形式的BSA, cBSA，免疫反应更强

阳离子化形式的BSA, cBSA是正常的BSA，已用乙二胺处理，乙二胺用阳离子氨基乙基酰胺取代阴离子羧基。

研究人员能够证明，通过用氨基乙基酰胺基团代替阴离子侧链羧基团而产生的阳离子化形式的BSA比正常BSA更具免疫原性（1）。他们已经表明，体外刺激T细胞增殖所需的阳离子化BSA（cBSA）量比正常BSA（nBSA）少500倍，而体内cBSA产生的反应至少是nBSA的两倍，持续时间更长。此外，在没有佐剂的情况下，对cBSA产生抗体，而nBSA的情况并非如此。

进一步的研究表明，由于免疫反应自我调节的改变，cBSA表现出独特的免疫原性特性（2）。在用cBSA免疫之前，用cBSA进行口服（3）或静脉注射预处理可大大提高抗BSA反应;nBSA预处理抑制了这种免疫反应。

与正常的BSA相比，阳离子化形式的BSA, cBSA刺激更高的免疫原性反应，并允许更高浓度的偶联肽。

OneQuant HyperCarrier™（一量化™）

HyperCarrier™载体蛋白也可作为我们的一次性OneQuant™样品瓶提供，以节省时间和金钱。以 8 x 2mg 小瓶形式提供。

艾美捷阳离子化形式的BSA, cBSA#GBS-786-092特征：

强正电荷，增加与免疫系统细胞的结合

与BSA相比，免疫反应更强

59个赖氨酸残基，其中30-35个能够缀合，加上阳离子化过程中产生的其他胺

单多肽蛋白 （67kDa）

方便的10mg小瓶

应用：

用于生产抗体的肽的载体蛋白。

来源：https://www.amyjet.com/products/GBS-786-092.shtml

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艾美捷ODN 2006 (TLRGRADE) 解决方案

ODN 2006（TLRGRADE）（合成）（散装）：具有硫代磷酸骨架的CpG寡脱氧核苷酸（B型）。用于人和小鼠TLR9（Toll样受体9）的特异性配体。

艾美捷ODN 2006 (TLRGRADE)#ALX-746-056-M001详细参数：

序列： 5'-t cg t cg ttttgtcgttttgtcgtt-3'（小写字母表示硫代磷酸酯键）。

分子量： 7720（铵盐）

源： 合成。

数量： 128.9纳米尔

配方： 冻。无菌的。

纯度细节： 活性和内毒素测试 - TLRGRADE。®

内毒素含量： <0.002 EU/μg（LAL测试;比奥惠特克）

重构： 对于 100μM 储备溶液，将总样品瓶内容物溶解在 1289μl 无内毒素的 ddWater（产品编号 ALX-505-008）或无内毒素的 PBS（产品编号 ALX-505-007）中。为了获得最佳溶解效果，我们建议采用以下步骤：

- 加入50%的溶剂，溶解10分钟-

加入剩余的50%溶剂并充分混合。

- 适度升温可能有助于溶解。

航运： 环境温度

长期储存： +4°C

使用/稳定性： 水性储备溶液在 +1°C 下储存时可稳定保存 4 天。

处理： 避光。为了在解冻后获得最大的产品回收率，请在打开盖子之前离心小瓶。复溶后，准备等分试样并储存在-20°C。

技术信息/产品说明： 包括 1 瓶 ddWater（无内毒素）（产品编号 ALX-505-008）。

有关非活性对照化合物，请参见产品编号ALX-746-206。

RUO - 仅供研究使用

ODN 2006（TLRGRADE）（合成）（散装）文献参考：

Human blood myeloid and plasmacytoid dendritic cells cross activate each other and synergize in inducing NK cell cytotoxicity: J.J.P. van Beek, et al.; Oncoimmunology 5, e1227902 (2016), Application(s): Human Dendritic Cells stimulation,

相关研究：

PBS（无内毒素）（无菌） ALX-505-007

ODN 2006 （TLRGRADE®） （合成） ALX-746-006-C100

dd水（无内毒素）（无菌） ALX-505-008-LD15

iODN 2088 （I 类） （无内毒素） （合成） ALX-746-250

iODN （ttaggg）4 （II 类） （无内毒素） （合成） ALX-746-251-T050

ODN 2137 （TLRGRADE®） （合成） （控制） ALX-746-206-C100

来源：https://www.amyjet.com/products/ALX-746-056-M001.shtml

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小鼠白细胞介素10(IL-10) ELISpot试剂盒，高便捷性&灵敏度

白细胞介素-10（IL-10）是由活化的T细胞和单核细胞产生的多效细胞因子。它可以以刺激和抑制方式调节免疫应答的功能。因此，IL-10参与免疫反应和炎症反应的调节。

预期用途：

小鼠白细胞介素10(IL-10) ELISpot试剂盒旨在使用 ELISpot 测定法计数分泌小鼠 IL-10 的细胞。仅供研究使用。不适用于诊断程序。

艾美捷小鼠白细胞介素10(IL-10) ELISpot试剂盒#3432-4APW-2非常适合对实验便捷性与灵敏度有高要求的客户。该试验设计用于计数分泌该分析物的细胞。该试剂盒提供，预包被单克隆抗体的ELISpot板，生物素化的检测抗体，链霉抗生物素蛋白-ALP和即用型BCIP/NBT-plus底物。

小鼠白细胞介素10(IL-10) ELISpot试剂盒组件：

检测单克隆抗体 51E6，生物素

酶偶联物 链霉亲和素-ALP

酶作用物 BCIP/NBT-plus

盘子 预包被的 ELISpot 板，白色 MSIP （mAb MT60）

小鼠白细胞介素10(IL-10) ELISpot试剂盒：

产品 ELISpot Plus： 小鼠 IL-10 （ALP）

应用 埃利斯波特

分析物 伊尔-10

反应 鼠

特 异性 该试剂盒基于一对针对小鼠IL-10的匹配mAb。

文献参考：

Parvin Zamani,et al.(2020).MPL nano-liposomal vaccine containing P5 HER2/neu-derived peptide pulsed PADRE as an effective vaccine in a mice TUBO model of breast cancer. Journal of controlled release: official journal of the Controlled Release Society

Emily M King,et al.(2019),Low-Dose Methotrexate Prevents Primary and Secondary Humoral Immune Responses and Induces Immune Tolerance to a Recombinant Immunotoxin.Journal of immunology(Baltimore,Md.:1950)

Wayne Paes,et al.(2017),Recombinant polymorphic membrane protein D in combination with a novel, second-generation lipid adjuvant protects against intra-vaginal Chlamydia trachomatis infection in mice.Vaccine

Stephanie Day,et al.(2015),Mannosylated Linear and Cyclc Single Amino Acid Mutant Peptides Using a Small 10 Amino Acid Linker Constitute Promising Candidates Against Multiple Sclerosis.Frontiers in immunology

来源：https://www.amyjet.com/products/3432-4APW-2.shtml

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艾美捷小鼠IgE ELISpot试剂盒，检测两种IgE同种异型

IgE（免疫球蛋白E）的主要正常功能被认为是针对寄生虫感染的保护。然而，IgE也与过敏有关，过敏原特异性IgE抗体可能在适当的过敏原存在下引发过敏反应。IgE通常在血清/血浆中以少量存在，但在过敏个体中显着增加，并且过敏原特异性IgE的检测作为用于特异性诊断过敏的许多体外测定的基础。

艾美捷小鼠IgE ELISpot试剂盒#3815-2H能够计数分泌IgE的B细胞。ELISpot检测两种IgE同种异型，即IgEa和IgEb。该试剂盒包含一对匹配的单克隆捕获和检测抗体，Streptavidin-HRP和多克隆激活剂。

小鼠IgE ELISpot试剂盒组件：

捕获单克隆抗体 MT56E

检测单克隆抗体 MT44E，生物素

酶偶联物 链霉亲和素-HRP

刺激 抗 CD40 单克隆抗体 （CD40-A）

重组小鼠IL-4

小鼠IgE ELISpot试剂盒预期用途：

该 ELISpot Flex 试剂盒用于使用 ELISpot 测定法计数分泌小鼠 IgE 的细胞。仅供研究使用。不适用于诊断程序。

IgE 分泌可以通过含有抗 CD40 mAb 和 IL-4 的细胞预活化来诱导。请注意，用抗CD40 / IL-4刺激诱导切换到IgE和IgG1，因此受刺激细胞的结果可能不代表体内的情况。

小鼠IgE同种异型 具有IgEa同种异型

的小鼠品系包括例如AKR，BALB / c，C3H / He和CBA。具有IgEb同种异型的小鼠品系包括例如C57BL / 6，C57BL / 10和SJL。

详情：

产品 ELISpot Flex： Mouse IgE （HRP）

应用 埃利斯波特

分析物 免疫球蛋白酶

反应 鼠

特 异性

该试剂盒基于一对针对小鼠 IgE、IgEa（同种异体型 a）和 IgEb（同种异体型 b）的匹配 mAb。

来源：https://www.amyjet.com/products/3815-2H.shtml

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艾美捷Melanopsin-SAP特异性制备及相关用途介绍

Melanopsin在非洲爪蛙的黑素细胞（光敏皮肤细胞）中被发现是一种新型视蛋白。然后发现Melanopsin也存在于小鼠视网膜中，特别是在神经节细胞中，并且它介导非视觉光感受任务。Melanopsin也由Opn4编码，在各种生物体中具有直系同源物。Melanopsin-SAP特异性地消除表达Melanopsin的固有光敏视网膜神经节细胞（ipRGC）。ipRGC具有惊人的长过程，参与明暗感知，是昼夜节律的决定因素。

Melanopsin-SAP是亲和纯化的兔多克隆抗体对小鼠Melanopsin和核糖体灭活蛋白saporin的化学偶联物。它特异性地消除表达Melanopsin的固有光敏视网膜神经节细胞（ipRGC）。

Melanopsin-SAP [IT-44， KIT-44]：一种用于消除小鼠固有光敏视网膜神经节细胞中表达黑视蛋白的细胞的工具;通过亲和纯化的兔多克隆抗体靶向小鼠黑视蛋白，通过皂苷消除。

特异性和制备：

这种靶向毒素识别小鼠固有光敏视网膜神经节表达黑色素的细胞（ipRGCs）。黑色素蛋白SAP是一种亲和纯化兔的化学偶联物抗小鼠黑素的多克隆抗体（Cat.#AB-N39）和核糖体失活蛋白saporin（Cat。#PR-01）。

用途：

黑色素素SAP特异性清除本质光敏视网膜神经节细胞（ipRGCs）表达黑色素蛋白酶。Melanopsin-SAP的使用和效果在Göz等人。

材料的批量变化；工作稀释度必须由最终用户确定。如果这是一个新的地段，在开始一个完整的实验方案之前，你必须评估正确的工作稀释度

saporin/抗黑素（UF008）缀合物（目录#IT-44）以剂量依赖的方式破坏培养的RGC-5细胞。稳定表达或不表达RGC-5细胞的培养物小鼠黑色素蛋白酶暴露于黑色素蛋白SAP 4天。偶联物的浓度显示在每列的上方实验一式三份。每个面板代表从单个井中随机选择的场。

储存：

使用前，在微型冰箱中轻轻旋转材料5-10秒。将材料储存在未稀释的环境中在–20°C下进行1-2个月的等分试样。为了长期储存，将材料储存在–80°C的温度下。材料应为等分到方便的体积和数量，以避免重复冷冻和解冻，从而损坏蛋白质含量。在这些条件下，该材料具有非常稳定的保质期。解冻应在室温或在冰上。解冻后的溶液在使用前应保持在冰上。不要将还原剂（如二硫代苏糖醇、β-巯基乙醇或抗坏血酸）与此材料一起使用。它会使毒素失活。这种物质是一种极其强效的细胞毒素。应由经验丰富的人员进行处理。手套和搬运本产品时需要佩戴安全眼镜。处置时必须小心；高压灭菌或暴露至0.2M的氢氧化钠将使材料失活。所有与此材料接触的实验室用品应该是一样的。

参考文献：

1. Göz D, Studholme K, Lappi DA, Rollag MD, Provencio I, Morin LP (2008) Targeted

destruction of photosensitive retinal ganglion cells with a saporin conjugate alters the effects of

light on mouse circadian rhythms. PLoS ONE 3(9):e3153.

来源：https://www.amyjet.com/products/IT-44-25.shtml