来宝网 2023/4/3点击720次
艾美捷 RmesFect茎转染试剂解决方案
艾美捷OZ Biosciences RmesFect茎转染试剂基于三通技术 专为干细胞中的mRNA转染而设计，具有高效率和低毒性。与质粒DNA递送相比，mRNA转染具有以下优势：
1、无需核吸收。mRNA翻译成蛋白质发生在细胞质中
2、蛋白表达速度快于DNA转染
3、无基因组整合
4、以完全启动子独立的方式表达蛋白质
OZ Biosciences RmesFect茎专为多种干细胞和原代细胞中的体外mRNA （dsRNA）转染而设计。
OZ Biosciences RmesFect茎转染试剂主要优点：
1、高效：在所有细胞中实现mRNA递送
2、即用型：无需额外的缓冲液
3、低核酸量：毒性最小化
4、保护 mRNA 免受降解
5、与任何培养基兼容
6、血清兼容：无需更换培养基
规格：
500μL：用 125 μg mRNA 转染 250-1 次
1 mL：用 250 μg mRNA 转染 500-1 次
5 mL：用 1250 μg mRNA 转染 2500-1 次
储存： - 20°C
运输条件：室温
非常适合干细胞中的mRNA转染应用：
信使核糖核酸疫苗
胚胎和多能干细胞转染
再生医学
更快的细胞重编程：允许每日转染以生成iPS细胞
推荐用于：在干细胞中转染mRNA。
来源：https://www.amyjet.com/products/OZB-RS30500.shtml
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中英文说明书丨艾美捷 RmesFect茎转染试剂
RmesFect™ Stem Transfection Reagent is based on the TEE-technology specifically designed for mRNA transfection in Stem Cells with high efficiency and low toxicity. mRNA transfection provides several advantages over plasmid DNA delivery :
No need for nuclear uptake. mRNA translation into proteins occurs in the cytoplasm
Faster protein expression than DNA transfection
No genomic integration
Protein expression in a total promoter independent manner
RmesFect™Stem is specifically designed for in vitro mRNA (dsRNA) transfection in a large variety stem cells and primary cells.
RmesFect™Stem transfection reagent principal advantages:
Highly efficient : achieve mRNA delivery in all cells
Ready-to-use: no need for additional buffer
Low nucleic acid amount : minimized toxicity
Protects mRNA against degradation
Compatible with any culture medium
Serum compatible : Medium changed not required
Sizes:
500µL: 125-250 transfections with 1 µg of mRNA
1 mL: 250-500 transfections with 1 µg of mRNA
5 mL: 1250-2500 transfections with 1 µg of mRNA
艾美捷OZ Biosciences RmesFect茎转染试剂基于三通技术 专为干细胞中的mRNA转染而设计，具有高效率和低毒性。与质粒DNA递送相比，mRNA转染具有以下优势：
1、无需核吸收。mRNA翻译成蛋白质发生在细胞质中
2、蛋白表达速度快于DNA转染
3、无基因组整合
4、以完全启动子独立的方式表达蛋白质
OZ Biosciences RmesFect茎转染试剂专为多种干细胞和原代细胞中的体外mRNA （dsRNA）转染而设计。
规格：
500μL：用 125 μg mRNA 转染 250-1 次
1 mL：用 250 μg mRNA 转染 500-1 次
5 mL：用 1250 μg mRNA 转染 2500-1 次
OZ Biosciences RmesFect茎转染试剂主要优点：
1、高效：在所有细胞中实现mRNA递送
2、即用型：无需额外的缓冲液
3、低核酸量：毒性最小化
4、保护 mRNA 免受降解
5、与任何培养基兼容
6、血清兼容：无需更换培养基
OZ Biosciences RmesFect茎转染试剂结果：
图1：使用RmesFect Stem转染了几个干细胞。复合物的制备方法如下：将编码GFP蛋白的mRNA与RmesFect Stem转染试剂（hMSC为0：25，MEF和hAdSC为0：5）混合编码GFP蛋白（人hMSC为2.1 μg，MEF和hAdSC为4.1 μg）。在室温下孵育20分钟后，将复合物以滴加方式添加到细胞中。24 h后，通过FACS分析测量转染效率。
图2：使用RmesFect干细胞转染了几个干细胞。24 h后，通过荧光显微镜测量转染效率。
来源：https://www.amyjet.com/products/OZB-RS30500.shtml
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艾美捷PolyMag CRISPR试剂盒解决方案
艾美捷PolyMag CRISPR试剂盒是特别经过优化的磁铁辅助转染试剂，可提供表达 Cas9 和向导 RNA （gRNA） 的高水平质粒 DNA 和/或 mRNA。该试剂基于我们专有的磁感应™技术。纳米颗粒由涂有阳离子分子的氧化铁磁芯组成。对于您的基因编辑实验，该试剂具有高转染效率，无毒性。
• 即使在原代细胞和难以转染的细胞上也能高效递送 CRISPR/Cas9 系统• 非常适合共转染 pDNA/pDNA、pDNA/gRNA、pDNA/mRNA
• 针对含有 Cas9 的大质粒 DNA 进行了优化，并引导 RNA
• 低细胞毒性 - 能够以更少的细胞开始实验
用于CRISPR Cas9实验的其他产品：
ViroMag CRISPR提高CRISPR/Cas9病毒的转导效率
RmesFect CRISPR 用于 mRNA 转染
ProDeliverIN CRISPR用于 Cas9 蛋白递送
储存： +4°C
运输条件：室温
图1：PolyMag CRISPR共转染效率用于CRISPR-Cas9实验。将NIH-3t3、HeLa和MDCK细胞接种在完全培养基中的24孔板中，转染时较佳密度为50-70%汇合。用GFP-Cas9质粒和RFP pDNA转染细胞，然后在37oC下孵育过夜。转染后24h荧光显微镜监测GFP和RFP表达。
来源：https://www.amyjet.com/products/OZB-PNC40200.shtml
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中英文说明书丨艾美捷PolyMag CRISPR试剂盒
PolyMag CRISPR kit is the only magnet assisted transfection reagent optimized to deliver high level of plasmid DNA and/or mRNA expressing Cas9 and guide RNA (gRNA). This reagent is based on our proprietary Magnetofection™ technology. The nanoparticles are composed of iron oxide magnetic core coated with cationic molecules. For your gene editing experiments, this reagent provides high transfection efficiency without toxicity.
Benefits:
• High efficiency delivery of CRISPR/Cas9 system even on primary and hard to transfect cells
• Ideal for co-transfection of pDNA/pDNA, pDNA/gRNA, pDNA/mRNA
• Optimized for large plasmid DNA containing Cas9, and guide RNA
• Low cell toxicity - enable to start your experiment with less cell
Additional products for CRISPR Cas9 experiments:
ViroMag CRISPR to enhance transduction efficiency of CRISPR/Cas9 viruses
RmesFect CRISPR for mRNA transfection
ProDeliverIN CRISPR for Cas9 protein delivery
艾美捷PolyMag CRISPR试剂盒是特别经过优化的磁铁辅助转染试剂，可提供表达 Cas9 和向导 RNA （gRNA） 的高水平质粒 DNA 和/或 mRNA。该试剂基于我们专有的磁感应™技术。纳米颗粒由涂有阳离子分子的氧化铁磁芯组成。对于您的基因编辑实验，该试剂具有高转染效率，无毒性。
• 即使在原代细胞和难以转染的细胞上也能高效递送 CRISPR/Cas9 系统• 非常适合共转染 pDNA/pDNA、pDNA/gRNA、pDNA/mRNA
• 针对含有 Cas9 的大质粒 DNA 进行了优化，并引导 RNA
• 低细胞毒性 - 能够以更少的细胞开始实验
用于CRISPR Cas9实验的其他产品：
ViroMag CRISPR提高CRISPR/Cas9病毒的转导效率
RmesFect CRISPR 用于 mRNA 转染
ProDeliverIN CRISPR用于 Cas9 蛋白递送
储存： +4°C
运输条件：室温
方案|DNA或shRNA载体转染粘附细胞：
1.细胞制备
建议在转染前一天对细胞进行种子接种或平板接种。合适的细胞密度将取决于生长速率和细胞条件。细胞应在磁化时间。对于悬浮细胞，使用给定的特定方案在下面在转染之前，可以用新鲜培养基代替培养基（可选不含血清）。
2.DNA/PolyMag CRISPR复合物的制备
a.PolyMag CRISPR：使试剂涡旋，并将适量的试剂放入空的微管。
b.DNA：将指定数量的DNA（见表1）稀释50至200m培养基的L不含血清和补充剂。
c.通过剧烈移液和孵育将DNA溶液添加到PolyMag CRISPR溶液中在室温下放置20分钟。不要产生涡流。
3.转染
a.将PolyMag CRISPR/DNA复合物逐滴添加到细胞上，并轻轻摇动板，以确保均匀分布。将细胞培养板放置在磁性板上在30分钟内。
b.拆下磁性板。
c.在标准条件下，在37°c的CO2培养箱中培养细胞，直到评估转基因表达（从24小时到7天）
注：
在细胞对转染非常敏感的情况下，可以在转染后立即更换培养基磁感染程序
➔ 将细胞保持在磁性板上，并用新鲜预热的完全培养基。
一些细胞类型需要在转染后2-4小时更换培养基
来源：https://www.amyjet.com/products/OZB-PNC40200.shtml
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艾美捷 RmesFect CRISPR转染试剂解决方案
基于TEE技术的艾美捷 RmesFect™ CRISPR转染试剂专为mRNA/gRNA转染而设计，具有高效率和低毒性的特点。RmesFect™在多种细胞中都是有效的。
OZ Biosciences RmesFect CRISPR转染试剂特点：
高效：在所有细胞中实现RNA递送
即用型：无需额外的缓冲液
低核酸量：毒性最小化
保护 RNA 免受降解
与任何培养基兼容
血清兼容：无需更换培养基
与质粒DNA递送相比，mRNA转染具有以下优势：
无需核吸收。mRNA翻译成蛋白质发生在细胞质中。
蛋白表达速度快于DNA转染
无基因组整合
以完全启动子非依赖的方式表达蛋白质
用于CRISPR Cas9实验的其他产品：
PolyMag CRISPR用于使用表达质粒进行基因组编辑
ProDeliverIN CRISPR用于 Cas9 蛋白递送
ViroMag CRISPR提高CRISPR/Cas9病毒的转导效率
应用：
用于 CRISPR Cas9 基因组编辑实验
开始之前的重要提示：
✓ 对于细胞系，在转染前24小时将细胞接种在96孔板、24孔板或6孔板中分别在150µL、400µL和2 mL完全培养基中培养板。
✓ 细胞应该是健康的，并在其指数生长阶段进行检测。出席者污染物（支原体、真菌）将显著影响转染效率。这个必须根据所使用的细胞和血管来调整最佳汇合。建议使用定期传代的细胞进行转染。不要使用已经培养时间过长（＞2个月）。
✓ 让试剂到达RT，并在形成复合物之前轻轻地涡旋它们。
✓ DNA/RmesFect复合物必须使用不含血清和补充剂的培养基或缓冲液准备培养基如MEM、DMEM或OptiMEM或缓冲液如HBS或PBS建议使用。相反，不建议RPMI用于制备复合物。
✓ 用去离子水稀释试剂，稀释剂量小于1µL，
✓ 对于一些细胞，转染后24小时用新鲜的预热前培养基代替旧培养基，培养基或仅将新鲜的生长培养基添加到细胞中。在细胞非常敏感的情况下转染前，培养基可以在3-4小时后更换。
来源：https://www.amyjet.com/products/OZB-RMC70500.shtml
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中英文说明书丨艾美捷 RmesFect CRISPR转染试剂
RmesFect™ CRISPR transfection Reagent based on the TEE-technology is specifically designed for mRNA/gRNA transfection with high efficiency and low toxicity. RmesFect™ is efficient in a large variety of cells.
Benefits:
Highly efficient: achieve RNAs delivery in all cells
Ready-to-use: no need for additional buffer
Low nucleic acid amount : minimized toxicity
Protects RNAs against degradation
Compatible with any culture medium
Serum compatible : Medium changed not required
mRNA transfection provides several advantages over plasmid DNA delivery :
No need for nuclear uptake. mRNA translation into proteins occurs in the cytoplasm.
Faster protein expression than DNA transfection
No genomic integration
Protein expression in a total promoter-independent manner
Additional products for CRISPR Cas9 experiments:
PolyMag CRISPR for Genome editing using expression plasmids
ProDeliverIN CRISPR for Cas9 protein delivery
ViroMag CRISPR to enhance transduction efficiency of CRISPR/Cas9 viruses
基于TEE技术的艾美捷 RmesFect™ CRISPR转染试剂专为mRNA/gRNA转染而设计，具有高效率和低毒性的特点。RmesFect™在多种细胞中都是有效的。
OZ Biosciences RmesFect CRISPR转染试剂特点：
高效：在所有细胞中实现RNA递送
即用型：无需额外的缓冲液
低核酸量：毒性最小化
保护 RNA 免受降解
与任何培养基兼容
血清兼容：无需更换培养基
图 1：根据标准方案，使用 RmesFect CRISPR 转染编码 GFP 和 RFP（各 24.0μg）的 mRNA 转染 DC25 细胞。转染后24h在显微镜荧光下分析图像。
与质粒DNA递送相比，mRNA转染具有以下优势：
无需核吸收。mRNA翻译成蛋白质发生在细胞质中。
蛋白表达速度快于DNA转染
无基因组整合
以完全启动子非依赖的方式表达蛋白质
用于CRISPR Cas9实验的其他产品：
PolyMag CRISPR用于使用表达质粒进行基因组编辑
ProDeliverIN CRISPR用于 Cas9 蛋白递送
ViroMag CRISPR提高CRISPR/Cas9病毒的转导效率
来源：https://www.amyjet.com/products/OZB-RMC70500.shtml
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艾美捷 优化的Cas9核酸酶功能和应用介绍
Cas9核酸酶（CRISPR相关蛋白9）是一种RNA引导的核酸内切酶，用于通过产生序列特异性双链断裂（DSB）进行基因组编辑。DNA中DSB的存在导致细胞修复过程的激活，其中DNA恢复通过非同源末端连接（NHEJ）或同源定向重组（HDR）发生，从而改变基因组。基因敲低、缺失或插入说明了CRISPR/Cas9系统的主要成就。
艾美捷OZ Biosciences 优化的Cas9核酸酶化脓性链球菌设计用于活细胞或生物体的基因组编辑以及体外消化。
使用 Cas9/RNP 递送提高基因组编辑效率 成功的 CRISPR/Cas9 基因组编辑可以通过多种方法（质粒、mRNA、核酸酶、病毒递送）进行。
为什么选择Cas9蛋白而不是Cas9 DNA或mRNA？
Cas 9重组蛋白比核酸递送速度更快，一旦进入细胞内就完全活跃，没有潜伏期（与核酸所需的转录和翻译机器相反）。
这些特性使核酸酶蛋白递送特别适用于精密基因组工程。
图1：用sgRNA编程的Cas9核酸酶。结合后，短向导RNA（sgRNA）特异性靶向短DNA序列标签（PAM）。Cas9核酸酶在PAM序列上游切割DNA三个核苷酸。
高效的核酸递送是基因组编辑实验的关键步骤。 为了获得优化的Cas9核酸酶递送，建议亲交付 CRISPR转染试剂。
规格：
CAS9050： 50 μg Cas9 核酸酶在 50 μL 中
CAS9100： 100 μg Cas9 核酸酶在 100 μL 中
CAS9500： 500 μg （5x100 μg） Cas9 核酸酶，500μL （5x100 μL）
提供的试剂：Cas9反应缓冲液（10X）
推荐用于 CRISPR Cas9 基因组编辑实验。
优化的Cas9核酸酶化脓性链球菌设计用于活细胞或生物体的基因组编辑以及体外消化。
使用Pro-DeliverIN CRISPR在细胞中进行基因组编辑
Cas9核酸酶可以直接递送到培养物或生物体中的活细胞中，使用ProDeliverIN CRISPR（# PIC60100 或 #PIC60500）。以下方案是在24孔板中进行基因组编辑的示例：
制备 1 μg Cas9 核酸酶和 250 ng sgRNA 的混合物上下移液轻轻混合
在室温（推荐 10°C）下孵育 25 分钟以形成 Cas9/RNP 复合物直接加入 2 μL ProDeliverIN CRISPR
在室温（推荐 20°C）下孵育 25 分钟以形成复合物用完整的培养基补充 50 μL
将复合物滴加到细胞上，并在标准培养条件下孵育。
来源：https://www.amyjet.com/products/OZB-CAS9050.shtml
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中英文说明书丨艾美捷优化的Cas9核酸酶相关
Optimized Cas9 Nuclease S. Pyogenes is designed for genome editing in living cells or organisms and also for in vitro digestion.
Increased genome editing efficiency using Cas9/RNP delivery
Successful CRISPR/Cas9 genome editing can be performed through diverse approaches (plasmids, mRNA, nuclease, viral delivery)
Why choose Cas9 Protein instead of Cas9 DNA or mRNA?
The Cas 9 recombinant protein is delivered more rapidly than nucleic acid and is fully active once inside the cells without latency period (in contrast to transcription and translation machineries required for the nucleic acids).
These features make nuclease protein delivery particularly well suited for precision genome engineering.
Efficient nucleic acid delivery represents a critical step for genome editing experiments. For the most efficient Cas9 nuclease delivery, we recommend Pro-DeliverIN CRISPR Transfection Reagent.
Sizes
CAS9050: 50 µg Cas9 nuclease in 50 µL
CAS9100: 100 µg Cas9 nuclease in 100 µL
CAS9500: 500 µg (5x100 µg) Cas9 nuclease in 500µL (5x100 µL)
Reagent supplied: Cas9 reaction buffer (10X)
艾美捷OZ Biosciences 优化的Cas9核酸酶化脓性链球菌设计用于活细胞或生物体的基因组编辑以及体外消化。
使用 Cas9/RNP 递送提高基因组编辑效率 成功的 CRISPR/Cas9 基因组编辑可以通过多种方法（质粒、mRNA、核酸酶、病毒递送）进行。
为什么选择Cas9蛋白而不是Cas9 DNA或mRNA？
Cas 9重组蛋白比核酸递送速度更快，一旦进入细胞内就完全活跃，没有潜伏期（与核酸所需的转录和翻译机器相反）。
这些特性使核酸酶蛋白递送特别适用于精密基因组工程。
高效的核酸递送是基因组编辑实验的关键步骤。 为了获得优化的Cas9核酸酶递送，建议亲交付 CRISPR转染试剂。
规格：
CAS9050： 50 μg Cas9 核酸酶在 50 μL 中
CAS9100： 100 μg Cas9 核酸酶在 100 μL 中
CAS9500： 500 μg （5x100 μg） Cas9 核酸酶，500μL （5x100 μL）
提供的试剂：Cas9反应缓冲液（10X）
体外消化
图：Cas9核酸酶化脓性链球菌用于体外裂解pVectOZ-GFP质粒。 pVectOZ-GFP使用xhoI限制性内切酶线性化，并在靶向GFP，单独Cas9或Cas9 + sgRNA争夺（sc）的Cas9 + sgRNA存在下孵育DNA。在存在靶向sgRNA的情况下，线性化的DNA被切割成两个片段。
来源：https://www.amyjet.com/products/OZB-CAS9050.shtml
