来宝网 2022/12/6点击651次
艾美捷胆固醇肉豆蔻酸酯技术信息说明
艾美捷胆固醇肉豆蔻酸酯是一种胆固醇酯。喂食高胆固醇饮食的兔子血清、肝脏和主动脉中的肉豆蔻酸胆甾醇水平升高,与非酒精性脂肪肝(NAFLD)的发展呈正相关。血浆胆固醇肉豆蔻酸水平也与冠状动脉疾病中不稳定动脉粥样硬化斑块的存在呈正相关。胆固醇肉豆蔻酸酯已用于脂质纳米颗粒(LNPs)的合成,作为低水溶性药物的药物载体系统。本品不供人类或兽医使用。
艾美捷胆固醇肉豆蔻酸酯技术信息:
正式名称:(3β)-胆甾-5-烯-3-醇-3-十四烷酸酯
CAS编号:1989-52-2
同义词:胆固醇肉豆蔻酸酯、胆甾醇十四烷酸酯、肉豆蔻酸胆甾醇酯
分子式:c41h72氧气
纯度:≥98%
形态:结晶固体
溶解性:三氯甲烷:10 mg/mL
侧链碳总量:14:0
存储:-20℃
稳定性:≥ 2年
艾美捷胆固醇肉豆蔻酸酯描述参考:
1.Kim, E.J., Kim, B.H., Seo, H.S., et al. Cholesterol-induced non-alcoholic fatty liver disease and atherosclerosis aggravated by systemic inflammation. PLoS One 5(6), e97841 (2014).
2.Meikle, P.J., Wong, G., Tsorotes, D., et al. Plasma lipidomic analysis of stable and unstable coronary artery disease. Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 31(11), 2723-2732 (2011).
3.Rosenblatt, K.M., and Bunjes, H. Evaluation of the drug loading capacity of different lipid nanoparticle dispersions by passive drug loading. Eur. J. Pharm. Biopharm. 117, 49-59 (2017).
来源:https://www.amyjet.com/products/26439-1.shtml
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艾美捷胆固醇肉豆蔻酸酯说明书和相关研究
艾美捷胆固醇肉豆蔻酸酯以结晶固体形式提供。储备溶液可以通过将胆甾醇肉豆蔻酸酯溶解在所选溶剂中来制备。肉豆蔻酸胆甾醇可溶于有机溶剂氯丨仿,应使用惰性气体吹扫,浓度约为10mg/ml。
艾美捷胆固醇肉豆蔻酸酯基本参数:
CAS#:1989-52-2
正式名称:(3β)-胆甾-5-烯-3-醇-3-十四烷酸酯
同义词:胆固醇肉豆蔻酸酯、胆固醇十四烷酸酯、肉豆蔻酸胆固醇酯、NSC 226867
英文名称:Cholesteryl Myristate
中频:C41H72O2
纯度:≥98%
提供形式:晶体固体
储存:-20°C
稳定性:≥2年
艾美捷胆固醇肉豆蔻酸酯相关研究:
26570 Hexanoyl-L-carnitine-d3 (chloride)
30958 Coenzyme Q10-d6
34336 ALC-0159
28123 Cholesteryl Palmitate-d9
28152 1-Palmitoyl-d9-2-Palmitoyl-sn-glycero-3-PS
28155 1-Palmitoyl-d9-2-Palmitoyl-sn-glycero-3-PE
26827 1-Stearoyl-rac-glycerol
26871 1,2,3-Trioleoyl Glycerol
62210 1,2-Didecanoyl-sn-glycerol
胆固醇肉豆蔻酸酯文献参考:
1.Kim, E.J., Kim, B.H., Seo, H.S., et al. Cholesterol-induced non-alcoholic fatty liver disease and atherosclerosis aggravated by systemic inflammation. PLoS One 5(6), e97841 (2014).
2.Meikle, P.J., Wong, G., Tsorotes, D., et al. Plasma lipidomic analysis of stable and unstable coronary artery disease. Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 31(11), 2723-2732 (2011).
3.Rosenblatt, K.M., and Bunjes, H. Evaluation of the drug loading capacity of different lipid nanoparticle dispersions by passive drug loading. Eur. J. Pharm. Biopharm. 117, 49-59 (2017).
来源:https://www.amyjet.com/products/26439-1.shtml
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艾美捷肝细胞培养基试剂盒说明书
肝细胞培养基是专门为正常人类肝细胞体外培养设计的最适于其生长的培养基,是经灭菌的液体培养基,包含必需和非必需氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质和低浓度胎牛血清(5%)。
艾美捷肝细胞培养基试剂盒为我们的大鼠肝细胞设计并测试了肝细胞培养基。该培养基包括两种成分:肝细胞基础培养基(H2004-70A1)和肝细胞培养基补充物(H2004-70 A2)。肝细胞培养基是补充了BSA和几种重组生长因子的无血清培养基。每批都在细胞培养中进行测试,以确保其无菌性。本品不含抗生素。
艾美捷肝细胞培养基试剂盒基本参数:
中文名称:肝细胞培养基试剂盒
英文名称:Hepatocyte Culture Medium Kit, BioAssay
编号:H2004-70A
规格:1Kit
用于培养大鼠单体细胞的肝细胞培养基的使用:
1.解冻补充物,并将整个体积(5ml)添加到基础培养基(500ml)中。如果担心污染,也可以添加抗生素。
2.取所需的肝细胞培养基,在水浴或培养箱中加热至37°C。避免对整瓶介质进行频繁的温度变化。肝细胞培养基在4°C下至少稳定1个月。
艾美捷肝细胞培养基试剂盒储存和稳定性:
在4°C下储存,至少稳定6个月。沉淀物颜色或外观的变化可能表明变质。
来源:https://www.amyjet.com/products/H2004-70A.shtml
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中英文说明书:艾美捷肝细胞培养基试剂盒
Hepatocyte culture mdium was designed and tested for our rat hepatocyte. This medium includes two components: Hepatocyte basal medium (H2004-70A1) and Hepatocyte culture medium supplement (H2004-70A2). The hepatocyte culture medium is a serum-free medium supplemented with BSA and several recombinant growth factors. Each lot of this product is tested in cell culture to ensure its sterility. This product does not contain antibiotics.
Use of Hepatocyte Culture Medium for Culturing Rat Hapatocytes:
1. Thaw the supplement and add the entire volume (5ml) to the basal medium (500ml). Antibiotics may also be added if contamination is a concern.
2. Take the amount of hepatocyte culture medium needed and warm to 37°C in a water bath or incubator. Avoid frequent temperature change to the entire bottle of medium. The hepatocyte culture medium is stable for at least 1 month stored at 4°C.
艾美捷肝细胞培养基在培养大鼠单核细胞中的应用:
1、解冻补充剂,将整个体积(5ml)加入基础培养基(500ml)中。如果担心污染,也可以添加抗生素。
2、取所需量的肝细胞培养基,在水浴或培养箱中加热至37°C。避免对整瓶介质进行频繁的温度变化。肝细胞培养基在4°C下至少稳定1个月。
艾美捷肝细胞培养基试剂盒储存和稳定性:
肝细胞基础培养基在4°C下储存,至少稳定6个月。沉淀物颜色或外观的变化可能表明变质。
等级:分子生物学等级
装运温度:蓝色的冰
储存温度:4摄氏度
艾美捷肝细胞培养基试剂盒相关研究:
E3010-60G Endothelial Progenitor Cells, Human, Growth Medium Kit, BioAssay™ 1Kit
E3010-68G Endothelial Progenitor Outgrowth Cells, Human, Growth Medium Kit, BioAssay™ 1Kit
E3010-72G Endothelial Progenitor Outgrowth Cells, Mouse, Growth Medium Kit, BioAssay™ 1Kit
H2004-70A Hepatocyte Culture Medium Kit, BioAssay™ 1Kit
M3005-34A Mesenchymal Stem Cells, Mouse, Growth Medium Kit, BioAssay™ 1Kit
来源:https://www.amyjet.com/products/H2004-70A.shtml
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艾美捷RPMI-1640培养基L-谷氨酰胺化学性质说明
RPMI-1640由摩尔等人在罗斯威尔公园纪念研究所开发,因此缩写为RPMI。该配方基于RPMI-1630系列培养基,利用碳酸氢盐缓冲系统,并改变氨基酸和维生素的量。RPMI-1640培养基已用于培养人正常和肿瘤白细胞。当适当补充RPMI-1640时,已证明其广泛适用于支持多种类型的培养细胞的生长,包括72小时植物血凝素(PHA)刺激试验中的新鲜人淋巴细胞。
艾美捷RPMI-1640培养基L-谷氨酰胺化学性质:
外观粉色至橙色均匀、自由流动的粉末
溶解度品红,清澈,完整
pH7.9±0.9
内毒素≤1单位/毫升
每升说明将10.4g溶解在900ml ddH2O中,搅拌直至完全溶解。不要加热。如果需要,在搅拌下加入2g碳酸氢钠。将培养基的pH值调整至低于所需pH值0.1-0.3个pH单位。添加额外的水,使溶液达到最终体积。使用0.22um膜过滤消毒。等分到无菌容器中。
注:可能需要用1N HCl将pH值降至4.0,以完全溶解本产品。在其完全溶解后,可在加入碳酸氢钠之前用1N NaOH将pH值升高至7.2。
储存和稳定性在室温下储存粉状介质。收到后可稳定12个月。打开的瓶子应盖紧盖子,并保持在黑暗、低湿度的环境中。准备好的培养基应保持在4°C,并在短时间内使用。
艾美捷RPMI-1640培养基L-谷氨酰胺配方:
无机盐:
Calcium Nitrate•4H2O 0.1
Magnesium Sulfate 0.04884
Potassium Chloride 0.4
Sodium Chloride 6.0
Sodium Phosphate Dibasic 0.8
氨基酸:
L-Arginine 0.2
L-Aspartic Acid 0.02
L-Asparagine 0.05
L-Cystine•2HCl 0.0652
L-Glutamic Acid 0.02
L-Glutamine 0.3
Glycine 0.01
L-Histidine 0.015
Hydroxy-L-proline 0.02
L-Isoleucine 0.05
L-Leucine 0.05
L-Lysine•HCl 0.04
L-Methionine 0.015
L-Phenylalanine 0.015
L-Proline 0.02
L-Serine 0.03
L-Threonine 0.02
L-Tryptophan 0.005
L-Tyrosine•2Na•2H2O 0.02883
L-Valine 0.02
维生素:
p-Aminobenzoic Acid 0.001
D-Biotin 0.0002
Choline Chloride 0.003
Cyanocobalamin 0.000005
Folic Acid 0.001
myo-Inositol 0.035
Niacinamide 0.001
D-Pantothenic Acid•Ca 0.00025
Pyridoxine•HCl 0.001
Riboflavin 0.0002
Thiamine•HCl 0.001
来源:https://www.amyjet.com/products/MBS652870.shtml
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艾美捷RPMI-1640培养基L-谷氨酰胺的参数和配方
RPMI是Roswell Park Memorial Institute的缩写,代指洛斯维·帕克纪念研究所。 RPMI是该研究所研发的一类细胞培养基,1640是培养基代号。
RPMI 1640 培养基最初是为了悬浮培养人白血病单层细胞而开发的。Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 培养基被发现适用于多种哺乳动物细胞,包括 HeLa 细胞、Jurkat 细胞、 MCF-7 细胞、PC12 细胞、PBMC 细胞、星形胶质细胞和癌细胞。针对广泛的细胞培养应用,艾美捷RPMI-1640培养基L-谷氨酰胺使用培养基选择工具查找适合的配方。
艾美捷RPMI-1640培养基L-谷氨酰胺化学性质:
外观粉色至橙色均匀、自由流动的粉末
溶解度品红,清澈,完整
pH7.9±0.9
内毒素≤1单位/毫升
每升说明将10.4g溶解在900ml ddH2O中,搅拌直至完全溶解。不要加热。如果需要,在搅拌下加入2g碳酸氢钠。将培养基的pH值调整至低于所需pH值0.1-0.3个pH单位。添加额外的水,使溶液达到最终体积。使用0.22um膜过滤消毒。等分到无菌容器中。
注:可能需要用1N HCl将pH值降至4.0,以完全溶解本产品。在其完全溶解后,可在加入碳酸氢钠之前用1N NaOH将pH值升高至7.2。
储存和稳定性在室温下储存粉状介质。收到后可稳定12个月。打开的瓶子应盖紧盖子,并保持在黑暗、低湿度的环境中。准备好的培养基应保持在4°C,并在短时间内使用。
艾美捷RPMI-1640培养基L-谷氨酰胺配方:
无机盐:
硝酸钙•4H2O 0.1
硫酸镁0.04884
氯化钾0.4
氯化钠6.0
磷酸二氢钠0.8
氨基酸:
L-精氨酸0.2
L-天冬氨酸0.02
L-天门冬氨酸0.05
L-胱氨酸•2HCl 0.0652
L-谷氨酸0.02
L-谷氨酰胺0.3
甘氨酸0.01
L-组氨酸0.015
羟基-L-脯氨酸0.02
L-异亮氨酸0.05
L-亮氨酸0.05
L-赖氨酸•HCl 0.04
L-蛋氨酸0.015
L-苯丙氨酸0.015
L-脯氨酸0.02
L-丝氨酸0.03
L-苏氨酸0.02
L-色氨酸0.005
L-酪氨酸•2Na•2H2O 0.02883
L-缬氨酸0.02
维生素:
对氨基苯甲酸0.001
D-生物素0.0002
氯化胆碱0.003
氰胺0.000005
叶酸0.001
肌球蛋白0.035
烟酰胺0.001
D-泛酸•Ca 0.00025
吡哆醇•HCl 0.001
核黄素0.0002
硫胺素•HCl 0.001
来源:https://www.amyjet.com/products/MBS652870.shtml
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艾美捷天冬氨酸蛋白酶(Caspase)活性检测试剂盒解决方案
Caspase-1是可剪切IL-1b和IL-18前体产生活性细胞因子的caspase。Caspase-11剪切45kD的caspase-1前体蛋白产生20kD和10kD片断,这两个片断可以形成异源二聚体,并进一步形成四聚体。
细胞凋亡属于程序化细胞死亡,可见于各种器官和细胞,在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族,包含10多个成员。其中Caspase-1是唯一可剪切IL-1b和IL-18前体产生活性细胞因子的caspase。Caspase-11剪切45kD的caspase-1前体蛋白产生20kD和10kD片断,这两个片断可以形成异源二聚体,并进一步形成四聚体。此四聚体具有蛋白酶活性。Caspase-1通过剪切Bcl-XL调节细胞凋亡,并通过对细胞因子前体的剪切来调控相关细胞因子介导的免疫炎性反应。试剂盒测定原理基于Caspase-1特异水解其多肽底物N-acetyl-Tyr-Val-Ala-Asp-pNA (Ac-YVAD-pNA),释放出游离的硝基苯胺pNA,后者呈黄色在405 nm具有最大吸收峰,用可见光分光光度比色方法测定。其吸光度值对应于Caspase-1的水解活性。反应体系100微升,试剂盒提供的试剂,除标准曲线外可进行50或100次样品测定。
艾美捷天冬氨酸蛋白酶(Caspase)活性检测试剂盒适用:测定哺乳动物组织、细胞caspase-1活性。
原理:
艾美捷天冬氨酸蛋白酶(Caspase)活性检测试剂盒是无细胞毒性的,细胞膜渗透抑制剂。进入每个细胞,并不可逆地与活化的caspase-1结合。任何未结合的FAM-YVAD-FMK-FLICA试剂扩散出细胞并被冲走。因此留在细胞内的绿色荧光直接体现了活性caspase-1酶活性的。荧光结果可通过荧光酶标仪、荧光显微镜、流式细胞仪进行分析。
组分:
25T:
l FLICA Caspase-1 Reagent (FAM-YVAD-FMK), 1 vial, #653 l 10X Apoptosis Wash Buffer, 15 mL, #635 l Fixative, 6 mL, #636 l Propidium Iodide, 1 mL, #638 l Hoechst 33342, 1 mL, #639 l Kit Manual
100T:
l FLICA Caspase-1 Reagent (FAM-YVAD-FMK), 4 vials, #653 l 10X Apoptosis Wash Buffer, 60 mL, #634 l Fixative, 6 mL, #636 l Propidium Iodide, 1 mL, #638 l Hoechst 33342, 1 mL, #639 l Kit Manual
保存条件:2-8°C 避光保存。
艾美捷FAM-FLICA 天冬氨酸蛋白酶(Caspase)活性检测试剂盒Nature文章鉴赏:
IF=30.9, 《Escherichia coli Rho GTPase-activating toxin CNF1 mediates NLRP3 inflammasome activation via p21-activated kinases-1/2 during bacteraemia in mice》,Nature Microbiology
来源:https://www.amyjet.com/products/ICT-97.shtml
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解决方案丨艾美捷天冬氨酸蛋白酶(Caspase)活性检测试剂盒
Detect caspase-1 activity with the FAM FLICA Caspase-1 Assay Kit. This in vitro assay employs the fluorescent inhibitor probe FAM-YVAD-FMK to label active caspase-1 enzyme in living cells. Analyze samples using fluorescence microscopy, a fluorescence plate reader, or flow cytometry.
Reagent Name FAM-YVAD-FMK
Target Caspase-1
Excitation / Emission 488 nm / 530 nm
Method of Analysis Flow Cytometer, Fluorescence Microscope, Fluorescence Plate Reader
Sample Type Cell culture
Storage 2-8°C
艾美捷ICT FLICA天冬氨酸蛋白酶(Caspase)活性检测试剂盒被研究人员用于通过培养的细胞和组织中的胱天蛋白酶活性来定量凋亡。用FAM FLICA caspase-1测定试剂盒检测caspase-1活性。
艾美捷天冬氨酸蛋白酶(Caspase)活性检测试剂盒准备样品和对照品:
用diH20稀释10X凋亡洗涤缓冲液1:10。
用50μL DMSO重组FLICA。
加入200μL PBS稀释FLICA 1:5。
在1:30时向每个样品中加入稀释的FLICA(例如,加入10μL至290μL培养细胞)。
培养约1小时。
取出培养基并洗涤细胞3次:加入1X凋亡洗涤缓冲液并旋转细胞。
如果需要,用其他污渍标记,如Hoechst、碘化丙啶、7-AAD或抗体。
如果需要,修复单元格。
使用荧光显微镜、荧光板读取器或流式细胞仪进行分析。FAM-FLICA在492nm激发,在520nm发射。
如果使用贴壁细胞,请参阅手册了解其他方案。
艾美捷天冬氨酸蛋白酶(Caspase)活性检测试剂盒部分文献参考:
Wen-Yuan, W;Wan-Qing, Y;Qi-Yun, H;Yu-Si, L;Shao-Jie, Q;Jin-Tao, L;Hui, M;Fang, C;Hui-Ling, Y. mTORC1-Dependent and GSDMD-Mediated Pyroptosis in Developmental Sevoflurane Neurotoxicity. Molecular neurobiology. 2022 October 13; doi: 10.1007/s12035-022-03070-4. Abstract
Sun, Y;Han, R;Wang, J;Qin, Y;Ren, Z;Feng, X;Liu, Q;Wang, X. A single-beam of light priming the immune responses and boosting cancer photoimmunotherapy. Journal of Controlled Release : Official Journal of the Controlled Release Society. 2022 September 8; doi: 10.1016/j.jconrel.2022.08.057. Full Article
He, L;Wei, T;Huang, Y;Zhang, X;Zhu, D;Liu, H;Wang, Z. miR-214-3p Deficiency Enhances Caspase-1-Dependent Pyroptosis of Microglia in White Matter Injury. Journal of Immunology Research. 2022 August 22; doi: 10.1155/2022/1642896. Full Article
来源:https://www.amyjet.com/products/ICT-97.shtml
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中英文说明书丨艾美捷环丁烷嘧啶二聚体CPD介绍
DNA damage factors commonly existing in the internal and external environment of cells will destroy the stability of genetic information. One of the mechanisms of UV damage to skin is to damage the DNA of cells, form "sunburn cells", and induce rich variations of DNA in cells, mainly including cyclobutane pyrimidine dimer (CPD), 6-4 photoproducts (6-4PPs) and their isomers, which is one of the main reasons for inducing DNA damage!
Synonyms:
Cyclobutane pyrimidine dimer (CPD)
Specificity:
Reacts specifically with thymine dimers produced by
UV irradiation in double- or single-stranded DNA.
Does not react with (6-4) photo products.
Ig Isotype:
Mouse IgG1
Immunogen:
UV-irradiated salmon sperm DNA
Hybridoma:
Mouse myeloma (P3/X63-Ag8) x immunized mouse
(Balb/c) splenocytes.
Format:
200 µL of 0.5 mg/mL purified monoclonal antibody in
PBS with protein stabilizer and 0.1% sodium azide.
Purified by Protein A chromatography.
Storage:
Store at 4°C for short term, store at –20°C for long
term. Avoid repeat freeze/thaw cycles.
一起来了解一下众多Nature文章使用认证的Kamiya艾美捷环丁烷嘧啶二聚体CPD。环丁烷嘧啶二聚体CPD也称作抗胸腺嘧啶二聚体单抗,克隆KTM53。
Kamiya艾美捷环丁烷嘧啶二聚体CPD相关性质:
同义词:抗胸腺嘧啶二聚体单抗,克隆KTM53
特异性:与由以下物质产生的胸腺嘧啶二聚体发生特异性反应:双链或单链DNA的紫外线照射。不与(6-4)照片产品反应。
Ig同种型:小鼠IgG1
免疫原:紫外线照射三文鱼精子DNA
杂交瘤:小鼠骨髓瘤(P3/X63-Ag8)x免疫小鼠(Balb/c)脾细胞。
格式:200µL 0.5 mg/mL纯化单克隆抗体PBS,含蛋白质稳定剂和0.1%叠丨氮丨化钠。通过蛋白质A色谱纯化。
存储:短期储存在4°C,长期储存在-20°C学期避免重复冷冻/解冻循环。
应用和建议的稀释液:n
原位杂交:以1:40至1:80的比例使用稀释。稀释系数取决于应用固定组织的冰冻切片或福尔马林固定石蜡包埋切片推荐。(由最终用户发布。)
DNA印迹:用于检测胸腺嘧啶紫外线损伤DNA和胸腺嘧啶化DNA探针中的二聚体。
Kamiya艾美捷环丁烷嘧啶二聚体CPD(抗胸腺嘧啶二聚体单抗)示例数据:
仅用于体外研究。不适用于诊断或人类。
环丁烷嘧啶二聚体CPD(抗胸腺嘧啶二聚体单抗)Nature发表文章:
【Nature,IF=69.5】Disease-corrected haematopoietic progenitors from Fanconi anaemia induced pluripotent stem cells
诱导多能干 (iPS) 细胞的产生使患者特异性多能细胞的衍生成为可能,并为模拟人类疾病提供了有价值的实验平台。患者特异性 iPS 细胞也被认为具有巨大的治疗潜力,尽管这方面的直接证据仍然缺乏。在纠正遗传缺陷后,范可尼贫血患者的体细胞可以重新编程为多能性,以产生患者特异性的 iPS 细胞。这些细胞系似乎与人类胚胎干细胞和健康个体的 iPS 细胞无法区分。重要的是,校正后的范可尼贫血特异性 iPS 细胞可以产生表型正常(即无病)的骨髓和红细胞谱系的造血祖细胞。这些数据提供了概念验证,即 iPS 细胞技术可用于生成具有细胞治疗应用潜在价值的疾病校正、患者特异性细胞
来源:https://www.amyjet.com/products/MC-062.shtml
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原理说明书艾美捷魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒
艾美捷ICT魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒被研究人员用来定量和监测培养细胞和组织中的组织蛋白酶活性。
Quantitate and monitor intracellular cathepsin-B activity over time in vitro. The Magic Red substrate in this assay fluoresces red upon cleavage by active cathepsin enzymes. Analyze the fluorescent signal using fluorescence microscopy or a fluorescence plate reader.
Kit 937: 25 Tests
Magic Red Substrate (MR-RR2), 1 25 Test Vial, #6133
Hoechst 33342, 1 mL, #639
Acridine Orange, 0.5 mL, #6130
Kit Manual
Kit 938: 100 Tests
Magic Red Substrate (MR-RR2), 1 100 Test Vial, #6134
Hoechst 33342, 1 mL, #639
Acridine Orange, 0.5 mL, #6130
Kit Manual
艾美捷ICT 魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒原理:
将基质直接添加到细胞培养基中,孵育并分析。因为它是细胞渗透性的,它很容易穿透细胞膜和内部细胞器的膜——不需要裂解或渗透步骤。如果组织蛋白酶是活性的,魔红底物被裂解,甲酰紫荧光团将在激发时变为荧光。随着酶活性的进展和更多魔红底物的裂解,信号将增强,使研究人员能够观察颜色随时间的变化。样品可通过荧光显微镜或荧光板读取器进行分析。试剂盒中包括Hoechst 33342和吖啶橙,分别用于检测核形态和溶酶体细胞器结构。
参数:
试剂名称MR-RR2
靶向组织蛋白酶B
激发/发射592 nm/628 nm
荧光板读数器、荧光显微镜的分析方法
样品类型细胞培养
储存2-8°C
艾美捷ICT 魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒准备样品和对照品:
通过加入DMSO重新配制魔力红。
通过加入diH2O稀释魔力红1:10。
向每个样品中加入20µL魔红(约500µL培养细胞等分试样)。
避光培养。
观察颜色在15分钟内开始显现。
如果需要,用其他污渍标记,如Hoechst、DAPI或抗体。
如果需要,修复单元格。
用荧光显微镜或荧光板读取器进行分析。魔力红的最佳激发波长为592nm,发射波长为628nm。
如果使用贴壁细胞,请参阅手册了解其他方案。
魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒部分文献参考:
Zhong, W;Rao, Z;Xu, J;Sun, Y;Hu, H;Wang, P;Xia, Y;Pan, X;Tang, W;Chen, Z;Zhou, H;Wang, X. Defective mitophagy in aged macrophages promotes mitochondrial DNA cytosolic leakage to activate STING signaling during liver sterile inflammation. Aging Cell. 2022 May 22; doi: 10.1111/jcpe.13647. Abstract
Browning, CL;Green, A;Gray, EP;Hurt, R;Kane, AB. Manganese dioxide nanosheets induce mitochondrial toxicity in fish gill epithelial cells. Nanotoxicology. 2021 Jan 27; 1-18. doi: 10.1080/17435390.2021.1874562. Article
Lan J, Luo H, Wu R, Wang J, Zhou B, Zhang Y, Jiang Y, Xu J. Internalization of HMGB1 (High Mobility Group Box 1) Promotes Angiogenesis in Endothelial Cells. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2020 Dec;40(12):2922-2940. doi: 10.1161/ATVBAHA.120.315151. Epub 2020 Oct 1. Full Text
来源:https://www.amyjet.com/products/MC-062.shtml