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艾美捷逆转录病毒定量试剂盒标准曲线的制备&结果示例

Cell Biolabs艾美捷QuickTiter™ 逆转录病毒定量试剂盒不涉及细胞感染；相反，它专门测量纯化病毒或未纯化病毒的病毒核酸含量上清液样品。对于未纯化的病毒上清液，试剂盒为特别适用于在转导步骤之前测定上清液效价。该套件具有检测灵敏度极限为1.5 X 109病毒颗粒（VP）/mL，足以用于中等或高滴度逆转录病毒样品。整个过程大约需要60分钟。每个试剂盒提供足够的试剂进行多达20次测试。快速滴定仪™ 逆转录病毒定量试剂盒为快速定量病毒上清液和纯化病毒的逆转录病毒滴度。

Cell Biolabs艾美捷逆转录病毒定量试剂盒基本参数：

中文名称：QuickTiter 逆转录病毒滴度检测试剂盒

英文名字：QuickTiter Retrovirus Quantitation Kit

编号：VPK-120

规格：20assays

保存建议：4ºC

标准曲线的制备：

1.从200μg/mL，100μg/mL，50μg/mL，25μg/mL，…0创建逆转录病毒RNA标准品

μg/mL（1:2连续稀释），标记九个微量离心管1～9。

2.加入20μL1X QuickTiter™ 溶液C至＃2至＃9管，转移20μL200μg/mL QuickTiter™ 逆转录病毒RNA标准品到＃1和＃2管。将＃2管混合，转移20μL 混合物（100µg/mL）到下一个试管中。重复通过tube＃8的步骤，并使用tube＃9作为空白。

3.将5μL每种稀释液（包括空白）转移至适用于荧光计的微量滴定板。添加向每个包含5µL样品的孔中加入95µL 1XCyQuant®GR染料。读盘子使用480/520 nm滤光片组的荧光读板器。

Cell Biolabs艾美捷逆转录病毒定量试剂盒结果示例：

下图显示了典型的定量结果。应该使用下面的数据仅限参考。这些数据不应该用来解释实际结果。

图：逆转录病毒RNA标准曲线。QuickTiter™ 逆转录病毒RNA标准品为按照上述说明进行稀释。荧光测量是在SpectraMax Gemini XS荧光计（分子器件），具有485/538 nm滤光片组和530 nm截止。

来源：https://www.amyjet.com/products/VPK-120.shtml

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生物仿制药研究级艾美捷曲妥珠单抗Trastuzumab

艾美捷曲妥珠单抗Trastuzumab背景：

曲妥珠单抗，是抗Her 2的单克隆抗体，它通过将自己附着在Her2上来阻止人体表皮生长因子在Her2上的附着，从而阻断癌细胞的生长，曲妥珠单抗还可以刺激身体自身的免疫细胞去摧毁癌细胞。临床上主要用于Her-2过度表达的转移性乳腺癌。单药治疗可用于已接受过一个或多个化疗方案的转移性乳腺癌；可与紫杉醇联合治疗未接受过化疗的转移性乳腺癌。

艾美捷曲妥珠单抗Trastuzumab化学性质：

曲妥珠单抗生物仿制药-研究级

结合：别藻蓝蛋白（APC）

目标：ErbB2

同种型：IgG1κ

其他名字：受体酪氨酸蛋白激酶erbB-2，MLN 19，HER2，HER2/neu

宿主：CHO细胞

物种反应性：人类

特异性：检测人ErbB2。该非治疗性抗体使用与治疗性抗体曲妥珠单抗相同的可变区序列。

浓度：0.2毫克/毫升

配方：该别藻蓝蛋白（APC）缀合物配制在0.01M磷酸盐缓冲盐水（150mM NaCl）PBS pH 7.4,1%BSA和0.09%叠-氮-化钠中作为防腐剂。

存储：当储存在2-8℃时，该别藻蓝蛋白（APC）缀合物是稳定的。不要冻结。

应用：流式细胞术，IHC

应用笔记：红色激光（650 nm）。

使用：ichorbio的曲妥珠单抗生物仿制药仅用于研究用途（RUO）：它不用于诊断或治疗程序

存储：在2-8°C无菌储存时稳定至少一周。对于长期储存，无菌分装在工作体积中，不稀释，储存在-80°C。避免反复冻融循环。

艾美捷曲妥珠单抗Trastuzumab是人源化IgG1κ单克隆抗体，其以高亲和力选择性结合人表皮生长因子受体2蛋白HER2的细胞外结构域。曲妥珠单抗通过重组DNA技术在哺乳动物细胞（中国仓鼠卵巢）中产生。

来源：https://www.amyjet.com/products/ICH4013.shtml

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高纯度ichorbio艾美捷CTLA-4体内抗体化学性质说明

CTLA-4体内抗体背景：

细胞毒T淋巴细胞相关抗原4（cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4, CTLA-4）又名CD152，是一种白细胞分化抗原，是T细胞上的一种跨膜受体，与CD28共同享有B7分子配体，而CTLA-4与B7分子结合后诱导T细胞无反应性，参与免疫反应的负调节。基因重组的CTLA-4 Ig可在体内外有效、特异地抑制细胞和体液免疫反应，对移植排斥反应及各种自身免疫性疾病有显著的治疗作用，毒副作用极低，是目前被认为较有希望的新的免疫抑制药物。

CTLA4或CTLA-4（细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4），也称为CD152（分化簇 152），是一种蛋白受体，其作为免疫检查点起作用并下调免疫应答。CTLA4在调节性T细胞中组成型表达，但在活化后仅在常规T细胞中上调- 这种现象在癌症中特别显著。 当与抗原呈递细胞表面上的CD80或CD86结合时，它起到“关闭”开关的作用。

CTLA-4蛋白由小鼠的Ctla4基因和人类中的CTLA4基因编码。

ichorbio艾美捷抗CTLA-4体内抗体-低内毒素（9D9）是在符合cGMP的ISO质量标准9001:2015设施中生产的。ichorbio的低内毒素抗体具有来自其它竞争对手可比较抗体的一半内毒素，低于1.0 EU/mg。如果ichorbio的低内毒素抗体不够低，ichorbio还有更超低内毒素抗体，其内毒素更低（<0.75EU/mg），纯度更高（98%对95%）。

ichorbio艾美捷抗CTLA-4体内抗体化学性质：

同种型对照：小鼠体内低内毒素IgG2b同型对照[MPC-11]（ICH2250）

针对同一目标的抗体：抗CTLA-4体内抗体-低内毒素[9H10]（ICH1084），抗CTLA-4体内抗体-低内毒素[UC10-4F10-11]（ICH1085），抗CTLA-4体内抗体-超低内毒素[9H10]（ICH1084UL）

规格：1mg，5mg，25mg，50mg和100mg

同种型：小鼠IgG2b

其他名字：Ctla4，细胞毒性T淋巴细胞蛋白4，CD152

Uniprot：P09793

宿主：老鼠

物种反应性：老鼠

特异性：抗CTLA-4体内抗体-低内毒素（9D9）识别小鼠CTLA-4上的表位

净化方法：根据种类和同种型，使用多步亲和层析方法如蛋白A或G纯化该单克隆抗体。

抗原分布：活化的T细胞

背景：T细胞活化的负调节剂

浓度：1.0-5.0毫克/毫升

存储：当在2-8℃下储存时，该抗体稳定至少4周。对于长期储存，在不稀释的情况下分装在工作体积中并储存在-20°C或-80°C。避免反复冻融循环。

应用：蛋白质印迹，功能测定

当使用ichorbio的CTLA-4低内毒素抗体克隆9D9进行体内研究时，建议每只小鼠使用50-250μg。

纯度：>通过SDS-PAGE和HPLC测定为95%

内毒素：≤ 通过LAL方法测定的1.0Eu/mg

聚合：聚合级别≤ 5%

仅供研究使用。不用于诊断或治疗程序。

来源：https://www.amyjet.com/products/ICH1096.shtml

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艾美捷MTT细胞增殖检测试剂盒结果示例&引用文献

艾美捷MTT细胞增殖检测试剂盒测定原理：

该试剂盒提供了比色形式测量和监测细胞增殖，含有足够的试剂用于评估在96孔板中进行960次测定或在24孔板中进行192次测定。细胞可以被镀，然后用影响增殖的化合物或药剂。然后用增殖试剂检测细胞，在活细胞中由黄色四唑MTT转化为紫色福尔马赞形式细胞还原酶。细胞增殖的增加伴随着信号的增加，虽然细胞增殖（和信号）的减少可以表明化合物的毒性作用或次优的培养条件。该测定原理是基本的，可应用于大多数真核生物细胞系，包括贴壁和非贴壁细胞以及某些组织。这种细胞增殖试剂可用于检测细菌，酵母，真菌，原生动物以及培养的哺乳动物中的增殖和鱼细胞。

艾美捷MTT细胞增殖检测试剂盒结果示例：

下图显示了CytoSelect的典型结果™ MTT细胞增殖试验。以下数据仅供参考。该数据不应于解释实际后果 

图：人HEK 293细胞密度。HEK 293细胞以不同密度接种并允许其生长24小时。加入CytoSelect MTT细胞增殖后测定试剂，然后将细胞在37℃和5%CO2下孵育3小时，并用

洗涤剂溶液3小时。

艾美捷MTT细胞增殖检测试剂盒测定方案：

1.制备含有0.1-1.0 x 106的细胞悬液培养基中的细胞/ml。

2.将每孔100μL加入96孔细胞培养板或每孔500μL加入24孔细胞培养物中有或没有待测化合物的板。细胞在37°C和5%培养24-96小时加湿培养箱中的二氧化碳。

3.加入10μlCytoSelect™ MTT细胞增殖测定试剂，如果使用96-孔板，或24孔板的每个孔50µL。

4.在37°C和5%CO2下孵育平板3-4小时，直至可见紫色沉淀（细胞在光学显微镜下可以更精确地观察到沉淀物）

5.在96孔板的每孔中加入100μL去污剂溶液，或在24孔板的每孔中加入500μL去污剂溶液盘子。

6.在室温下孵育2小时至避光过夜。

注意：在井中与洗涤剂溶液长时间孵育可能导致沉淀或浑浊可以增加背景。如果观察到沉淀，将板在37℃加热10-20分钟并搅拌溶解沉淀物。

7.使用540-570nm作为主波长读取吸光度。

引用文献（部分）：

1. Yu, Z. et al. (2021). Receptor interacting protein 3 kinase, not 1 kinase, through MLKL-mediated necroptosis is involved in UVA-induced corneal endothelium cell death. Cell Death Discov.

7(1):366. doi: 10.1038/s41420-021-00757-w.

2. Koga, Y. et al. (2021). DNA-Aptamer Raised against Receptor for Advanced Glycation End Products Improves Survival Rate in Septic Mice. Oxid Med Cell Longev. 2021:9932311. doi:10.1155/2021/9932311.

3. Uranowska, K. et al. (2021). A chondroitin sulfate proteoglycan 4‑specific monoclonal antibody inhibits melanoma cell invasion in a spheroid model. Int J Oncol. 59(3):70. doi:10.3892/ijo.2021.5250.

来源：https://www.amyjet.com/products/CBA-252.shtml

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艾美捷细胞低密度脂肪酸(LDL)摄取试剂盒的功能&应用

胆固醇是一种重要的细胞成分，维持胆固醇稳态对正常生理功能至关重要。血浆胆固醇水平升高与各种病理状况有关，最明显的是冠心病，高胆固醇水平导致动脉泡沫细胞形成和斑块堆积，可能导致心脏病发作或中风。细胞胆固醇代谢和血浆胆固醇水平的调节取决于低密度脂蛋白（LDL）受体介导的LDL向特定细胞的摄取。

LDL是血液中胆固醇的主要载体，占血浆总胆固醇的60%以上。LDL通过apoB-100-LDL受体相互作用引发的受体介导的内吞作用被肝组织和肝外组织吸收。内化的LDL颗粒被运送到溶酶体，在溶酶体中降解为游离胆固醇和氨基酸。在人类中，肝脏是LDL分解代谢和LDL受体活性最重要的器官。在肝脏中，LDL可以通过药物干预来调节。

细胞低密度脂肪酸(LDL)摄取试剂盒为研究细胞水平的LDL摄取和调节提供了方便的工具。该试剂盒使用与DyLight结合的人LDL™ 550（Thermo Fisher Scientific Inc.的产品）作为荧光探针，用于检测培养细胞对LDL的摄取。LDL受体特异性多克隆抗体和DyLight™ 488缀合的二级抗体用于鉴定LDL受体的分布。

艾美捷细胞低密度脂肪酸(LDL)摄取试剂盒为研究细胞水平的LDL摄取和调节提供了便利的工具。该试剂盒采用人类低密度脂蛋白结合到DyLight™ 550作为荧光探针，用于检测培养细胞中LDL的摄取。LDL受体特异性多克隆抗体和DyLight™ 包括488个偶联的二抗，用于鉴定LDL受体的分布。

艾美捷细胞低密度脂肪酸(LDL)摄取试剂盒试剂准备：

1.LDL-DyLightTM 550工作溶液

稀释LDL DyLight™ 550（项目编号10011229）1:100，在适当的无血清培养基中。在加入细胞之前，用0.45µm过滤器去除颗粒。

2.TBS-Triton缓冲液

通过将Triton X-100添加到TBS中制备TBS Triton缓冲液

浓度为0.1%。

3.兔抗LDL受体一级抗体

在TBS Triton缓冲液中稀释兔抗LDL受体一级抗体（项目编号10012422）1:100。

4.DyLight^TM 488偶联山羊抗兔IgG二级抗体

稀释DyLight™ 488缀合的山羊抗兔IgG二级抗体（项目号10011231），1:100，TBS Triton缓冲液。

细胞处理和LDL DyLightTM 550的摄取：

以下方案适用于96孔板。对于其他尺寸的板，应相应调整每个孔的介质/溶液体积。我们建议每种治疗重复或三次。

1.用3 x 104个细胞/孔接种96孔板，并培养细胞过夜。对于HepG2细胞，在治疗前使细胞生长两天。

2.第二天或第三天，用实验化合物或载体处理细胞24小时，或在典型实验方案中使用的时间段。

3.治疗期结束时，用75-100µl/孔LDL DyLight替换培养基™ 550在无血清培养基中制备的工作溶液。将细胞在37°C下再培养3-24小时，或在典型实验方案中使用的时间。

4.在LDL摄取培养结束时，抽吸培养基并用新鲜培养基或PBS代替。在显微镜下用能够分别测量激发波长540和发射波长570nm的滤光器检查LDL摄取的程度。细胞现在准备好使用第8页所述的程序对LDL受体进行免疫荧光染色。

艾美捷细胞低密度脂肪酸(LDL)摄取试剂盒性能特性：

图：Huh7人肝细胞LDL摄取。将Huh7细胞以1 x 104个细胞/孔接种在96孔板中，并使其附着和生长24小时。将LDL DylightTM 550以1:100的稀释度加入无血清培养基中并孵育过夜。通过将Hoechst 33342（项目编号15547）直接添加到培养基中至最终浓度为5µM并在37°C下孵育30分钟，对细胞核进行染色。LDLR染色如试剂盒手册所述完成。使用配备Roper Scientific相机和MetaMorph软件的尼康Eclipse显微镜拍摄荧光图像（200X），并合并到ImageJ中。图A：绿色LDLR染色，图B：红色LDL摄取，图C：蓝色Hoechst，图D：合并图像。

来源：https://www.amyjet.com/products/10011125-1.shtml

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艾美捷细胞失巢凋亡检测试剂盒测定原理&化验方案

对细胞外基质（ECM）的粘附对于许多粘附细胞的生存和繁殖至关重要细胞。细胞与ECM的粘附丧失或不当粘附导致的细胞凋亡定义为“anoikis”。Anoikis，来自希腊语无家可归的意思，与生理学有关组织更新和细胞稳态的过程。

癌症发展和生长的一个共同特征是转化细胞的生存能力在“非锚固”或“球状”生长条件下。这种对失巢症的抵抗显示与细胞稳态丧失、癌症生长和转移有关。抑制ECM上的细胞粘附、扩散和生长是细胞愈合过程的障碍，因此使其成为可能的治疗靶点。防止失巢，增强细胞粘附和扩散是细胞移植技术发展的一个主要目标，包括祖细胞。旨在控制失巢抗凋亡分子机制的进一步研究将有助于确定治疗许多人类恶性肿瘤的有效疗法。

细胞失巢凋亡检测试剂盒提供比色和荧光格式测量锚定非依赖性生长并监测失巢细胞死亡。该套件包含足够的试剂用于在Poly-Hema涂层的24孔板中测定24个样品。活细胞是用MTT或Calcein AM检测。用埃塞俄比亚同二聚体（EthD-1）检测细胞死亡。

艾美捷细胞失巢凋亡检测试剂盒测定原理：

细胞在聚Hema涂层板或对照板中培养。通过MTT或钙素AM。通过Ethidium Homodimer（EthD-1）测量失巢细胞死亡。EthD-1是一种用于测量死细胞的优良标记。EthD-1是一种红色荧光染料，只能穿透受损的细胞膜。EthD-1在结合ssDNA时将以40倍的增强发出荧光，dsDNA、RNA、寡核苷酸和三链DNA。背景荧光水平非常低因为染料在与细胞相互作用之前实际上是非荧光的。

艾美捷细胞失巢凋亡检测试剂盒化验方案：

1.制备含有0.1-2.0 x 106的细胞悬浮液细胞/ml。细胞可以被处理具有失巢增强或抑制试剂。

2.将0.5mL细胞悬浮液添加到抗锚定板的每个孔或对照24孔细胞中培养板。在37ºC和5%CO2下培养细胞24-72小时。时间和培养条件将取决于所使用的细胞系，并且可能需要由用户调整。

3.进行MTT比色法或Calcein AM/EthD-1荧光法检测。

艾美捷细胞失巢凋亡检测试剂盒MTT比色检测：

1.将50µL MTT试剂添加到抗锚定板或对照24的每个孔中-井板。

2.在37ºC下孵育孔2-4小时或过夜。偶尔用倒置的显微镜检查是否存在紫色沉淀。

3.向每个孔中加入500µL洗涤剂溶液。用移液管轻轻混合溶液。

4.盖上盘子，使其避光，并在室温下在黑暗中孵育2-4小时。

5.将200µL转移到96孔板中，并在微量滴定板读取器。

下图显示了CytoSelect的典型结果细胞失巢凋亡检测试剂盒。以下数据仅供参考。该数据不应用于解释实际后果。

图：人前胸成纤维细胞BJ-TERT细胞的失活测定。BJ-TERT细胞以50000个细胞/孔接种在组织培养对照板或Poly-Hema涂层板中。细胞是允许培养24小时。通过MTT和Calcein AM测定细胞活力用EthD-1染色失巢样细胞死亡。

细胞失巢凋亡检测试剂盒文献引用：

1. Bates RC, Buret A, van Helden DF, Horton MA, Burns GF. (1994) J Cell Biol 125, 403-415.

2. Frisch SM, Francis H. (1994) J Cell Biol 124, 619-626.

3. Frisch SM, Screaton RA. (2001) Curr Opin Cell Biol 13, 555-562.

4. Meredith JE, Jr Fazeli B, Schwartz MA. (1993) Mol Biol Cell 4, 953-961.

5. Rak J, Mitsuhashi Y, Erdos V, Huang SN, Filmus J, Kerbel RS. (1995) J Cell Biol 131, 1587-1598.

来源：https://www.amyjet.com/products/CBA-080.shtml

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艾美捷细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒说明书

细胞衰老（Cell senescence）是细胞控制其生长潜能的保障机制，一般含义是复制衰老，指正常细胞经过有限次数的分裂后，停止分裂，此时细胞虽然是存活的，但是细胞形态和生理代谢活性发生明显变化的现象。体外衰老细胞研究常用的生物学特征包括：

1）不可逆的生长停滞，细胞体积变大；

2）与衰老相关的β-半乳糖苷酶（senescence associated β-galactosidase, SA-β-gal）的活化。

作为溶酶体内的水解酶，通常在pH 4.0的条件下表现活性。但是衰老细胞内SA-β-gal在pH 6.0的条件下表现活性，且随着传代次数的增加，细胞群体中表现衰老相关的SA-β-gal的细胞数目逐渐增加。

艾美捷细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒提供了一种易于使用和有效的方法来确定细胞

衰老。SA-β-半乳糖苷酶催化X-gal的水解，产生蓝色。每个试剂盒提供足够的量在35毫米培养皿中进行多达50次检测。

艾美捷细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒套件组件：

1.100X固定液（部件号40010）：一个试管–1.5 mL 25%戊二醛

2.染色溶液A（部件号40011）：一管-1.5ml 500mM亚铁氰化钾

3.染色溶液B（部件号40012）：一个试管–1.5 mL 500 mM铁氰化钾

4.染色溶液C（部件号40015）：一瓶-4.5mL 1M柠檬酸盐-Na 2 HPO 4缓冲液，pH

6，50毫米MgCl 2

5.染色溶液D（部件号40016）：一瓶-4.0ml 5M NaCl

6.X-gal溶液（部件号40014）：两个试管-每个试管中DMF中1.5 mL 40 mg/mL X-gal

艾美捷细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒分析方案（35mm皿）：

1.从表达SA-ß-Gal的衰老细胞中吸出培养基。

2.用3 mL 1X PBS洗涤细胞两次，并吸出最终洗涤液。

3.加入2mL 1X固定溶液。在室温下孵育5分钟。

4.取出固定溶液，用3mL 1X PBS洗涤固定细胞三次。

5.吸入最后一次洗涤液，并通过添加2 mL新鲜制备的细胞完全覆盖细胞染色工作溶液。

6.在37ºC避光条件下培养细胞4小时至过夜。

7.取出细胞染色工作溶液，然后用3 mL 1X洗涤染色细胞两次PBS并将细胞储存在1X PBS中。对于长期储存，用1X PBS覆盖细胞20%甘油。储存在4ºC。

注：通过将染色样品与DMSO。

8. 使用光学显微镜计数蓝色染色的衰老细胞。

部分引用文献：

1. Huang, Y. et al. (2022). The impact of senescence on muscle wasting in chronic kidney disease. J

Cachexia Sarcopenia Muscle. doi: 10.1002/jcsm.13112.

2. Sanagawa, A. et al. (2022). Effect of Replicative Senescence on the Expression and Function of

Transporters in Human Proximal Renal Tubular Epithelial Cells. Biol Pharm Bull. 45(11):1636-

1643. doi: 10.1248/bpb.b22-00322.

3. Okawa, R. et al. (2022). The effects of continuous exposure to low-dose chlorine dioxide gas on

the characteristics of induced pluripotent stem cells. Regen Ther. 21:250-257. doi:

10.1016/j.reth.2022.07.014.

来源：https://www.amyjet.com/products/CBA-230.shtml

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Kamiya丨Kamiya艾美捷人乳铁蛋白ELISA说明书

Kamiya艾美捷人乳铁蛋白ELISA预期用途：

人乳铁蛋白ELISA是一种高度灵敏的双位点酶联免疫测定（ELISA）人类生物样品中乳铁蛋白的测定。仅供研究使用。不用于诊断程序。

引言

乳铁蛋白（LF）是一种具有抗菌活性的多功能铁结合蛋白。它存在于牛奶和其他粘膜中分泌物。众所周知，乳铁蛋白是抵抗感染和炎症的先天防御的一部分，也具有功能调节铁吸收。

Kamiya艾美捷人乳铁蛋白ELISA原理：

在该测定中，乳铁蛋白存在于样品与吸附在聚苯乙烯微量滴定仪表面的抗乳铁蛋白抗体反应

井。通过洗涤去除未结合的蛋白质后，与辣根结合的抗乳铁蛋白抗体过氧化物酶（HRP）。这些酶标记的抗体与先前结合的乳铁蛋白形成复合物。在另一个洗涤步骤之后，通过添加显色剂来测定与免疫吸附剂结合的酶底物，3,3'，5,5'-TMB。结合酶的数量直接随测试样品中的乳铁蛋白；因此，在450nm处的吸光度是乳铁蛋白浓度的量度测试样品。测试样品中乳铁蛋白的量可根据以下公式构建的校准曲线进行插值：并对样品稀释进行校正。

Kamiya艾美捷人乳铁蛋白ELISA试剂准备：

1.浓缩稀释剂

提供的稀释剂溶液为5倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水稀释1:5。

2.浓缩洗涤液

提供的洗涤液为20X浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水稀释1:20。结晶当储存温度较低时，精矿中的形成并不罕见。将精矿加热至稀释前30-35°C可溶解晶体。

3.酶抗体结合物浓缩物

通过添加10µL计算每个微量滴定板测试条所需的工作共轭溶液量酶抗体缀合物与990µL 1X稀释剂，用于每个测试条。立即稀释在使用前，并防止光线照射。混合均匀，但要轻柔。避免起泡。

4.TMB基板溶液

随附随用。

5.停止解决方案

随附随用。

6.微量滴定板

随附随用。打开微量滴定袋并从袋中取出板。移除所有将不得用于分析，将其放回袋中，并与干燥剂一起重新密封。

7.人乳铁蛋白校准仪

将1.0mL蒸馏水或去离子水加入冻干人乳铁蛋白校准仪中，并轻轻混合直至溶解。校准器现在的浓度为18.40µg/mL（重新配制的校准器应为如果打算将来使用，立即等分并冷冻）。需要准备人乳铁蛋白校准品使用前立即（见下表）。在每一步之间充分混合。避免起泡。

Kamiya基于免疫比浊技术的临床诊断和研究免疫分析工具，用于脂质评估、凝血、炎症、糖尿病、营养评估和血清蛋白测量。艾美捷科技是Kamiya的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

来源：https://www.amyjet.com/brand/Kamiya.shtml

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Kamiya丨Kamiya艾美捷人α1-抗糜蛋白酶ELISA说明书

Kamiya艾美捷人α1-抗糜蛋白酶（CYT）ELISA预期用途：

人α1-抗糜蛋白酶（CYT）ELISA是一种高度灵敏的双位点酶联免疫测定法（ELISA）用于定量测定人类生物样品中的α1-抗糜蛋白酶。仅供研究使用。不用于诊断程序。

Kamiya艾美捷α1-抗糜蛋白酶（CYT）ELISA原理：

在该试验中，样品中存在的α1-抗胰凝乳蛋白酶与已吸附至聚苯乙烯微量滴定孔的表面。通过洗涤去除未结合的蛋白质后加入与辣根过氧化物酶（HRP）缀合的酶。这些酶标记的抗体与先前结合的CYT。在另一洗涤步骤之后，通过添加显色底物3,3'，5,5'-TMB。结合酶的数量直接变化测试样品中的CYT浓度；因此，在450nm处的吸光度是测试样品中的CYT。测试样品中的CYT量可根据构建的校准曲线进行插值并对样品稀释进行校正。

需要但未提供的材料：

•用于配制和分配稀释液的精密移液管（2µL至200µL）

•试管

•喷壶或微孔板清洗机/吸气器

•蒸馏或去离子水

•微孔板读取器

•用于制备试剂和缓冲溶液的各种玻璃器皿

•计时器

•用于样本采集的离心机

•血浆采集抗凝剂

组件：

1.浓缩稀释剂

一瓶含有50mL 5X浓缩稀释液流动缓冲液。

2.浓缩洗涤液

一瓶含有50mL 20X浓缩洗涤液。

3.酶抗体结合物浓缩物

一个含有150µL 100X浓缩亲和纯化的抗人α1-抗糜蛋白酶抗体的小瓶

在稳定缓冲液中与HRP偶联。

4.TMB基板溶液

一瓶含有12mL TMB和过氧化氢的柠檬酸缓冲液（pH 3.3）。

5.停止解决方案

一瓶含12 mL 0.3 M硫酸。

警告：避免接触皮肤。

6.微量滴定板

12个可拆卸的8个井条，位于井支架框架内。孔用亲和纯化的抗人CYT包被。

7.人α1-抗糜蛋白酶校准器

一个装有冻干人α1-抗胰蛋白酶校准品的小瓶。

标本采集和处理：

应通过静脉穿刺收集血液，并在凝块形成后通过离心将血清与细胞分离。对于血浆样本，应将血液收集到装有抗凝剂的容器中，然后离心。应注意为了尽量减少溶血，过量的溶血会影响您的结果。立即测定或等分并储存-20°C下的样品。避免反复冷冻/解冻。对于任何可能含有病原体的样本，必须小心防止与开放性伤口接触。

Kamiya艾美捷人α1-抗糜蛋白酶（CYT）ELISA样品的稀释：

样品中CYT的定量测定要求在使用前对每个测试样品进行稀释。1:5000稀释适用于大多数血清/血浆样品。对于产生超出范围结果的样本的绝对定量对于校准曲线，可能需要更小或更大的稀释度。如果不确定样品水平，使用强烈建议在运行整个板之前使用一个或两个代表性样品。

为制备1:5000稀释的样品，将5µL样品转移至495µL 1X稀释剂中。这样可以得到1:100的稀释度。接下来，通过将10µL 1X稀释剂转移至490µL稀释1:100样品。你现在有1:5000的稀释度样品在每个阶段充分混合。

Kamiya基于免疫比浊技术的临床诊断和研究免疫分析工具，用于脂质评估、凝血、炎症、糖尿病、营养评估和血清蛋白测量。艾美捷科技是Kamiya的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

来源：https://www.amyjet.com/brand/Kamiya.shtml

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Kamiya丨Kamiya艾美捷人β2-微球蛋白ELISA说明书

Kamiya艾美捷人β2-微球蛋白ELISA预期用途：

人β2-微球蛋白ELISA是一种高度敏感的双位点酶联免疫测定（ELISA）人类生物样品中β2-微球蛋白的定量测定。仅供研究使用。

β2-微球蛋白（B2M）是一种11 kDA蛋白。它形成MHC I类分子的亚基，并与包括淋巴细胞在内的许多细胞的外膜。它在正常人的血清和尿液中含量很低，但在患有肾脏疾病、肾脏移植和各种其他炎症和传染性疾病的人群中浓度较高条件。

Kamiya艾美捷人β2-微球蛋白ELISA原理：

在本试验中，β2-微球蛋白存在于样品中的抗β2-微球蛋白抗体与吸附在聚苯乙烯微量滴定孔。通过洗涤去除未结合的蛋白质后加入辣根过氧化物酶（HRP）。这些酶标记的抗体与先前结合的B2M之间。在另一个洗涤步骤之后，通过添加显色底物3，3’，5，5’-TMB来测定与免疫吸附结合的酶。结合酶的数量与测试样品中B2M的浓度；因此，在450nm处的吸光度是B2M在测试样品。测试样品中B2M的量可根据以下公式构建的校准曲线进行插值：并对样品稀释进行校正。

Kamiya艾美捷人β2-微球蛋白ELISA试剂制备：

1.浓缩稀释剂

提供的稀释剂溶液为5倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水稀释1:5。

2.浓缩洗涤液

提供的洗涤液为20X浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水稀释1:20。结晶当储存温度较低时，精矿中的形成并不罕见。将精矿加热至稀释前30-35°C可溶解晶体。

3.酶抗体结合物浓缩物

通过添加10µL计算每个微量滴定板测试条所需的工作标记溶液量酶抗体缀合物与990µL 1X稀释剂，用于每个测试条。混合均匀，但轻轻地避免起泡。使用前立即稀释并避光。

4.TMB基板溶液

随附随用。

5.停止解决方案

随附随用。

6.微量滴定板

随附随用。打开微量滴定袋并从袋中取出板。移除所有将不得用于分析，将其放回袋中，并与干燥剂一起重新密封。

7.人β2-微球蛋白校准器

将1.0mL蒸馏水或去离子水加入冻干人B2M校准器中，轻轻混合直至溶解。校准品现在的浓度为715.0 ng/mL（重组校准品应等分如果打算将来使用，则冻结）。在每一步之间充分混合。避免起泡。

Kamiya基于免疫比浊技术的临床诊断和研究免疫分析工具，用于脂质评估、凝血、炎症、糖尿病、营养评估和血清蛋白测量。艾美捷科技是Kamiya的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

来源：https://www.amyjet.com/brand/Kamiya.shtml