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星形孢菌素Staurosporine的生物学作用
艾美捷星形孢菌素Staurosporine (Stsp) 是来自大鼠脑的蛋白激酶 C (PKC) 的有效抑制剂,其 IC 50值为 2.7 nM。它对大鼠重组 PKC- α的抑制作用分别比 PKC- δ 和 PKC- ζ高约 100 倍和 1,000倍。然而,Stsp 是非选择性的,因为它还抑制多种其他蛋白激酶的活性,而不仅仅是 PKC 同种型。Stsp 的生物学作用包括细胞毒性、平滑肌松弛和 eNOS 基因表达的调节。
艾美捷星形孢菌素Staurosporine 基本参数:
正式名称:2,3,10,11,12,13-六氢-10R-甲氧基-9S-甲基-11R-甲氨基-9S,13R-环氧-1H, 9H-二吲哚[1,2,3- gh;3',2 ',1'- lm]pyrrolo[3,4- j][1,7]benzodiazonin- 1-一
CAS 编号:62996-74-1
同义词:stsp
分子式:C 28 H 26 N 4 O 3
配方重量:466.5
纯度:≥98%
溶解度:
DMSO:500 微克/毫升
甲醇:2毫克/毫升
贮存:-20°C
稳定:≥ 1 年
艾美捷星形孢菌素Staurosporine 参考文献:
1. Tamaoki, T., Nomoto, H., Takahashi, I., et al. Staurosporine, a potent inhibitor of phospholipid/Ca++ dependent protein kinase. Biochem. Biophys. Res. Commun. 135, 397-402 (1986).
2. McGlynn, E., Liβz, J., Reutener, S., et al. Expression and partial characterization of rat protein kinase C-δ and protein kinase C-ζ in insect cells using recombinant baculovirus. J. Cell. Biochem. 49, 239-250 (1992).
3. Ruegg, U.T., and Burgess, G.M. Staurosporine, K-252 and UCN-01: Potent but nonspecific inhibitors of protein kinases. Trends Pharmacol. Sci. 10, 218-220 (1989).
来源:https://www.amyjet.com/products/81590-5.shtml
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蛋白酶荧光底物Z-Gly-Pro-AMC说明书及参考文献
艾美捷Z-Gly-Pro-AMC 是一种荧光底物,用于测定脯氨酸后裂解酶(脯氨酸内肽酶)。该底物被脯氨酰内肽酶水解,生成高荧光 7-amido-4-methylcoumarin (AMC)。
图.艾美捷 Z-Gly-Pro-AMC *CAS 68542-93-8* 的化学结构
艾美捷蛋白酶荧光底物Z-Gly-Pro-AMC基本参数:
英文:Z-Gly-Pro-AMC
cat#:AAT-13477
规格:5mg
外观:灰白色固体
分子量:463.49
可溶于:二甲基亚砜
储存条件:冻结(<-15°C),尽量减少光照
保存建议:推荐使用常温运输。建议在低于-15℃温度下冷冻保存,要求储存环境干燥并避免光照。
艾美捷蛋白酶荧光底物Z-Gly-Pro-AMC参考文献:
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Antiplasmin-cleaving enzyme is a soluble form of fibroblast activation protein
Authors: Lee KN, Jackson KW, Christiansen VJ, Lee CS, Chun JG, McKee PA.
Journal: Blood (2006): 1397
Substrate-dependent, non-hyperbolic kinetics of pig brain prolyl oligopeptidase and its tight binding inhibition by JTP-4819
Authors: Venalainen JI, Juvonen RO, Forsberg MM, Garcia-Horsman A, Poso A, Wallen EA, Gynther J, Mannisto PT.
Journal: Biochem Pharmacol (2002): 463
常见问题:
RNA聚合酶在细菌中起什么作用?
RNA聚合酶负责在细菌中合成RNA 。它通过在转录过程中将 DNA 序列复制到 RNA 序列中来实现这一点。与含有不同类型 RNA 聚合酶的真核生物不同,作为原核生物的细菌含有单一类型的 RNA 聚合酶来转录所有的 RNA。
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克隆 G233—HLA-G 单克隆抗体参数说明
艾美捷HLA-G 单克隆抗体可识别在所有绒毛外滋养细胞群(细胞柱、间质滋养细胞、血管内滋养细胞、胎盘床巨细胞)中表达的几种 HLA-G 同工型。HLA-G 属于非经典 MHC I 类分子 (MHCClass Ib)。已发现该抗体不与任何其他 MHC I 类抗原(HLA-A、-B、-C、-E、-F)发生交叉反应。
艾美捷HLA-G 单克隆抗体参数说明:
免疫原:对应于人 HLA-G 的重组蛋白。
宿主:鼠
反应性:人类
特异性:该抗体可识别在所有绒毛外滋养细胞群(细胞柱、间质滋养细胞、血管内滋养细胞、胎盘床巨细胞)中表达的几种 HLA-G 同工型。HLA-G 属于非经典 MHC I 类分子 (MHCClass Ib)。已发现该抗体不与任何其他 MHC I 类抗原(HLA-A、-B、-C、-E、-F)发生交叉反应。
形式:液体
同种型:IgG2a
推荐用法:合适的工作稀释度应由用户确定。
存储缓冲区:在 PBS 中,pH 7.4
储存说明:储存于 4°C。不要冻结。
分装以避免反复冻融。
艾美捷HLA-G 单克隆抗体参考文献:
1.ZNF366 is an estrogen receptor corepressor that acts through CtBP and histone deacetylases.
Lopez-Garcia J, Periyasamy M, Thomas RS, Christian M, Leao M, Jat P, Kindle KB, Heery DM, Parker MG, Buluwela L, Kamalati T, Ali S.Nucleic Acids Res. 2006;34(21):6126-36. Epub 2006 Nov 3.
2.Adenomatous polyposis coli control of C-terminal binding protein-1 stability regulates expression of intestinal retinol dehydrogenases.
Nadauld LD, Phelps R, Moore BC, Eisinger A, Sandoval IT, Chidester S, Peterson PW, Manos EJ, Sklow B, Burt RW, Jones DA.J Biol Chem. 2006 Dec 8;281(49):37828-35. Epub 2006 Oct 6.
3.HIC1 attenuates Wnt signaling by recruitment of TCF-4 and beta-catenin to the nuclear bodies.
Valenta T, Lukas J, Doubravska L, Fafilek B, Korinek V.EMBO J. 2006 Jun 7;25(11):2326-37. Epub 2006 May 25.
4.HMG box transcription factor TCF-4's interaction with CtBP1 controls the expression of the Wnt target Axin2/Conductin in human embryonic kidney cells.
Valenta T, Lukas J, Korinek V.Nucleic Acids Res. 2003 May 1;31(9):2369-80.
HLA-G 单克隆抗体应用程序图像:
免疫沉淀
酶联免疫吸附试验
流式细胞术
来源:https://www.amyjet.com/products/MAB3609.shtml
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GW 590735参数说明及储存注意事项
过氧化物酶体增殖物激活受体 (PPAR) α、γ 和 δ 是配体激活的转录因子,在脂质稳态中起关键作用。PPARα 的激活通过降低血浆 ApoCIII 水平和上调 ApoA1(HDL 的主要脂蛋白成分)导致富含甘油三酯 (TG) 的极低密度脂蛋白 (VLDL)的清除增加。艾美捷GW 590735 是一种有效且选择性的 PPARα 激动剂,其表达 GAL4 反应性报告基因的 EC 50值为 4 nM,比PPARγ 和 PPARδ 的选择性高至少 500倍。
艾美捷GW 590735基本参数:
正式名称:2-甲基-2- (4 - ((4-甲基-2- (4- (三氟甲基)苯基)噻唑-5-甲酰胺基)甲基)苯氧基)丙酸
CAS 编号:622402-22-6
分子式:C 23 H 21 F 3 N 2 O 4 S
配方重量:478.5
纯度:≥98%
溶解度:DMF:30毫克/毫升
二甲基亚砜:30毫克/毫升
乙醇:30 毫克/毫升
PBS(pH 7.2):0.25 毫克/毫升
λ最大值:224、311 纳米
艾美捷GW 590735储存注意事项:
对于长期储存,建议GW 590735在-20°C下储存。它将稳定至少两年。GW 590735以结晶固体的形式提供。储备溶液可通过将GW 59035溶解在用惰性气体净化的有机溶剂中来使用。GW 59035可溶于乙醇、二甲基亚砜和二甲基甲烷等有机溶剂。
在进行生物实验之前,应将储备溶液进一步稀释到水缓冲液或等渗盐水中。确保有机溶剂的残留量微不足道,因为有机溶剂在低浓度下可能有生理作用。GW 590735的有机无溶剂水溶液可通过将结晶化合物直接溶解在水缓冲液中来制备。GW 590735在PBS(pH 7.2)中的溶解度约为0.25 mg/ml。我们不建议将水溶液储存超过一天。
过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR) 是配体激活的转录因子,在脂质稳态中发挥关键作用。PPAR激活 结果通过降低血浆ApoCIII水平和上调高密度脂蛋白(HDL)的主要脂蛋白成分ApoA1,增加富含甘油三酯(TG)的极低密度脂蛋白(VLDL)的清除率。1 GW 590735是PPAR的有效和选择性激动剂a 对于GAL4反应报告基因的表达,EC50值为4 nM,与PPAR相比,选择性至少为500倍。
来源:https://www.amyjet.com/products/10009880-5.shtml
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鬼笔环肽-iFluor 594偶联物的功能和应用
这种红色荧光鬼笔环肽偶联物(相当于 Alexa Fluor® 594 标记的鬼笔环肽)选择性地结合 F-肌动蛋白。以纳摩尔浓度使用,鬼笔环肽衍生物是用于标记、鉴定和定量甲醛固定和透化组织切片、细胞培养或无细胞实验中的 F-肌动蛋白的便捷探针。鬼笔环肽与肌动蛋白丝的结合比与肌动蛋白单体更紧密地结合,导致肌动蛋白亚基从丝端解离的速率常数降低,基本上通过防止丝解聚来稳定肌动蛋白丝。此外,发现鬼笔环肽可抑制 F-肌动蛋白的 ATP 水解活性。鬼笔环肽在细胞中的不同浓度下功能不同。当以低浓度引入细胞质时,鬼笔环肽将细胞质肌动蛋白的聚合程度较低的形式以及细丝蛋白募集到聚集的肌动蛋白聚合物的稳定“岛”中,但它不会干扰应力纤维,即微丝的粗束。
鬼笔环肽的特性是研究 F-肌动蛋白在细胞中分布的有用工具,方法是用荧光类似物标记鬼笔环肽并使用它们对肌动蛋白丝进行染色以进行光学显微镜检查。鬼笔环肽的荧光衍生物已被证明在定位活细胞或固定细胞中的肌动蛋白丝以及在体外观察单个肌动蛋白丝方面非常有用。荧光鬼笔环肽衍生物已被用作高分辨率肌动蛋白网络研究的重要工具。
准备工作解决方案:
艾美捷鬼笔环肽-iFluor 594偶联物工作溶液
将 1 µL 艾美捷鬼笔环肽-iFluor 594 偶联溶液加入 1 mL 含 1% BSA 的 PBS。
注意:鬼笔环肽结合物的储备溶液应分装并储存在-20°C。避光。
注意:不同的细胞类型可能会有不同的染色。应相应地制备鬼笔环肽结合物工作溶液的浓度。
艾美捷鬼笔环肽-iFluor 594偶联物示例实验:
染色细胞
1.进行甲醛固定。将细胞与 PBS 中的 3.0–4.0% 甲醛在室温下孵育 10–30 分钟。
注意:避免使用任何含有甲醇的固定剂,因为甲醇会在固定过程中破坏肌动蛋白。优选的固定剂是不含甲醇的甲醛。
2.在 PBS 中冲洗固定细胞 2-3 次。
3.可选:将 PBS 中的 0.1% Triton X-100 添加到固定细胞中 3 到 5 分钟以增加渗透性。在 PBS 中冲洗细胞 2-3 次。
4.将 100 μL/孔(96 孔板)的 Phalloidin-iFluor™ 594 Conjugate 工作溶液加入固定的细胞中,并在室温下染色细胞 20 至 90 分钟。
5.用 PBS 轻轻冲洗细胞 2 到 3 次以去除多余的鬼笔环肽结合物,然后用 TRITC 或德州红滤光片组在显微镜下进行电镀、密封和成像。
图:用 4% 甲醛固定的 HeLa 细胞的荧光图像,然后用 Cell Navigator™ F-Actin Labeling Kit *Red Fluorescence* 在 Costar 黑色 96 孔板中染色。细胞分别用 艾美捷鬼笔环肽-iFluor 594(Cat#23122,红色)和细胞核染料 DAPI(Cat#17507,蓝色)标记。细胞内质网 (ER) 在固定前用 ER Green™(Cat#22635,绿色)染色。
来源:https://www.amyjet.com/products/10009880-5.shtml
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独特的荧光染料——mFluor Green 620 琥珀酰亚胺酯
艾美捷mFluor™ Green 620 琥珀酰亚胺酯是一种独特的染料,可被 532 nm 的绿色激光很好地激发以产生红色荧光。mFluor™ Green 620 染料是水溶性的,使用 mFluor™ Green 620 染料制备的蛋白质偶联物是明亮的,斯托克斯位移约为 80 nm。mFluor™ Green 620 琥珀酰亚胺酯和偶联物是出色的绿色激光试剂,适用于流式细胞术研究和荧光成像应用。
艾美捷mFluor™ Green 620 琥珀酰亚胺酯准备解决方案:
除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性使用的等分试样,并在制备后储存在 -20°C。避免重复冻融循环。
1. 蛋白质原液(溶液 A)
将 100 µL 反应缓冲液(例如,1 M 碳酸钠溶液或 1 M 磷酸盐缓冲液,pH ~9.0)与 900 µL 目标蛋白溶液(例如抗体,如果可能,蛋白浓度 >2 mg/mL)混合,得到 1 mL 蛋白质标记原液。
注意 蛋白质溶液(溶液 A)的 pH 值应为 8.5 ± 0.5。如果蛋白质溶液的 pH 值低于 8.0,则使用 1 M 碳酸氢钠溶液或 1 M pH 9.0 磷酸盐缓冲液将 pH 值调节到 8.0-9.0 的范围内。
笔记 蛋白质应溶解在 1X 磷酸盐缓冲盐水 (PBS),pH 7.2-7.4。如果蛋白质溶解在 Tris 或甘氨酸缓冲液中,则必须对 1X PBS,pH 7.2-7.4 进行透析,以去除广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(如硫酸铵和乙酸铵)。
注意 不纯的抗体或用牛血清白蛋白 (BSA) 或明胶稳定的抗体不会被很好地标记。叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰偶联反应。叠氮化钠或硫柳汞可以通过透析或离心柱去除以获得最佳标记结果。
笔记 如果蛋白质浓度低于 2 mg/mL,偶联效率会显着降低。为获得最佳标记效率,建议使用 2-10 mg/mL 的最终蛋白质浓度范围。
2. mFluor™ Green 620 SE 储备溶液(溶液 B)
将无水 DMSO 添加到 mFluor™ Green 620 SE 小瓶中,制成 10 mM 储备溶液。通过移液或涡旋充分混合。
注意 在开始偶联之前准备染料储备溶液(溶液 B)。及时使用。染料储备溶液的长期储存可能会降低染料活性。溶液 B 在避光和防潮的情况下可在冰箱中保存两周。避免冻融循环。
艾美捷mFluor™ Green 620 琥珀酰亚胺酯示例实验:
该标记方案是为山羊抗小鼠 IgG 与 mFluor™ Green 620 SE 的偶联物而开发的。用户可能需要进一步优化特定蛋白质。
注意 每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例,这也取决于染料的特性。蛋白质的过度标记可能对其结合亲和力产生不利影响,而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。
运行偶联反应
使用溶液 B(染料)/溶液 A(蛋白质)的 10:1 摩尔比作为起点:将 5 µL 染料储备溶液(溶液 B,假设染料储备溶液为 10 mM)添加到蛋白质小瓶中溶液(95 µL 溶液 A),有效摇动。假设蛋白质浓度为 10 mg/mL 且蛋白质的分子量为 ~200KD,则蛋白质的浓度为 ~0.05 mM。
注意 建议使用 10:1 摩尔比的溶液 B(染料)/溶液 A(蛋白质)。如果太少或太高,分别确定最佳染料/蛋白质比例为 5:1、15:1 和 20:1。
在室温下继续旋转或摇动反应混合物 30-60 分钟。
图:流式细胞术分析用(红色)或不用(绿色)1ug/ml抗人HLA-ABC生物素染色的HL-60细胞,然后用MFFluor™ 绿色620链霉亲和素结合物。
来源:https://www.amyjet.com/products/AAT-1165.shtml
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MaxPab兔源多克隆抗体(D01)的功能和应用类型
艾美捷ADAMTS4 MaxPab兔源多克隆抗体(D01)背景资料:
该抗体是以真核无细胞体系表达的人源全长序列蛋白作为免疫原,从小鼠体内制备的MaxPab多克隆抗体。ADAMTS4的GeneID号为9507。MaxPab抗体以真核表达的全长蛋白作为免疫原,免疫后并经先进纯化技术制备出,并经重组蛋白过表达细胞裂解液验证。具有如下优势:
具有识别多个抗原表位的特点,反应活性和敏感型很高;
鼠源MaxPab多抗非常适合用于ELISA检测中的检测抗体;
兔源MaxPab多抗非常适合用于ELISA检测中的捕获抗体;
具有多种广泛应用,如WB,IF,IHC,IP,FC等试验应用的潜能。
艾美捷ADAMTS4 MaxPab兔源多克隆抗体(D01)基本参数:
英文:ADAMTS4 MaxPab rabbit polyclonal antibody (D01)
cat#:H00009507-D01
规格:100uL
应用类型:WB-Tr,Det Ab,IP
免疫原:真核无细胞体系表达的人源ADAMTS4全长序列蛋白作为免疫原。与大多数大肠杆菌表达的重组蛋白或者多肽作为免疫原不同,MaxPab抗体以真核表达的全长蛋白作为免疫原,该免疫原是采用CellFree Science Co, Ltd。 (CFS)专利授权的无细胞麦胚蛋白合成系统表达出来的重组蛋白,具有良好的可溶性,并有翻译后修饰、从而部分具有功能的蛋白。由此免疫原制备出的抗体对内源性蛋白的识别特异性更高。
保存建议:该抗体为液体形式,不含任何添加物。请将其置于-20°;C或更低温度下保存,建议分装以避免反复冻融。
艾美捷MaxPab兔源多克隆抗体的应用:
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左图:Western Blot(转染裂解物)。通过 ADAMTS4 MaxPab 多克隆抗体对转染的 293T 细胞系 ( H00009507-T01 ) 中的 ADAMTS4 表达进行蛋白质印迹分析。泳道 1:ADAMTS4 转染的裂解物(36.00 KDa)。泳道 2:未转染的裂解物。
右图:免疫沉淀。使用抗 ADAMTS4 MaxPab 兔多克隆抗体和蛋白 A 磁珠对 ADAMTS4 转染的裂解物进行免疫沉淀,并使用 ADAMTS4 MaxPab 兔多克隆抗体 (D01) ( H00009507-D01 ) 进行免疫印迹。
来源:https://www.amyjet.com/products/H00009507-D01.shtml
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说明书丨开曼11-dehydro血栓烷素B2检测ELISA试剂盒
血栓烷素B2可以被11羟基血栓烷素脱氢酶代谢,形成11-羟基TXB2,或者通过氧化作用形成2,3-dinor TXB2,经过研究证明,这两种产物产量是相等,但是11-羟基TXB2半衰期较长(45分钟),因此检测血液和尿液样本中的11-羟基TXB2需要TXA2产出的时间整合.
11-脱氢血栓素 B 2 (11-脱氢 TXB 2 ) Quant- PAK 设计用于通过 GC-或 LC - MS方便、精确地定量 11-脱氢 TXB 2 。它包括一瓶 50 µg 的 11-脱氢 TXB 2 - d 4和一瓶精确称重的未标记的 11-脱氢 TXB 2,瓶上标有精确的重量 (2-4 mg)。这种未标记的 11-脱氢 TXB 2可用于量化 11-脱氢 TXB 2 - d 4通过构建峰强度比的标准曲线(氘代与未标记)来建立标准。
艾美捷11-dehydro血栓烷素B2检测ELISA试剂盒基于竞争反应,经乙酰胆碱酯酶示踪的11-羟基TXB2与游离的11-羟基TXB2相互竞争语气单克隆抗体有限的结合位点的原理来定量样本中11-羟基TXB2的含量。
艾美捷11-dehydro血栓烷素B2检测ELISA试剂盒基本参数:
中文名称:11-dehydro血栓烷素B2检测ELISA试剂盒-96次分析(可拆卸)
英文名字:11-dehydro Thromboxane B2 EIA Kit - Monoclonal
cat#:519510-96S
规格:96stripwells
保存建议:将其置于-20°C下保存.
艾美捷11-dehydro血栓烷素B2检测ELISA试剂盒特点:
是根据免疫竞争的原理简单稳定的定量血清,血浆和细胞培养上清样本中的TXB2,其灵敏度为120Pg/ml,最低检测极限为34pg/ml.稳定期为一年,保存于-20.
11-dehydro血栓烷素B2检测ELISA试剂盒相关参考文献:
1.Ciabattoni, G., Pugliese, F., Davi, G., et al. Biochim. Biophys. Acta 992, 66-70 (1989).
2.Fitzgerald, G.A., Lawson, J., Blair, I.A., et al. Adv. Prostaglandin Thromboxane Leukotriene Res. 15, 87-90 (1985).
3.Takasaki, W., Nakagawa, A., Tanaka, Y., et al. Thromb. Res. 63, 331-341 (1991).
4.Catella, F., Healy, D., Lawson, J.A., et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83, 5861-5865 (1986).
5.Lellouche, F., Fradin, A., FitzGerald, G., et al. Prostaglandins 40, 297-310 (1990).
6.Perneby, C., Granstrom, E., Beck, O., et al. Thromb. Res. 96, 427-436 (1999).
来源:https://www.amyjet.com/products/519510-96S.shtml