来宝网 2022/3/8点击1094次
Cytoskeleton 艾美捷肌动蛋白染色丨活性染料研究
肌动蛋白是一种43 kDa的蛋白质，在物种之间高度保守。肌动蛋白有三种主要的同型（α-肌动蛋白、β-肌动蛋白和γ-肌动蛋白），这三种同型之间的氨基酸（aa）同源性大于90%，而特定同型群成员之间的同源性大于98%。大多数同型异质性位于氨基末端30个残基。肌动蛋白的氨基末端位于F-肌动蛋白（4）双螺旋的外围，该位点也被认为与肌球蛋白（5）相互作用。
肌动蛋白可以以两种形式存在：球状亚单位（G-Actin）和丝状聚合物（F-Actin）（有关更多信息，请参阅关于肌动蛋白页面）。这两种形式的肌动蛋白都与细胞中过多的蛋白质相互作用。到目前为止，有超过50种不同的肌动蛋白结合蛋白（ABPs），其清单仍远未完成。肌动蛋白结合蛋白允许肌动蛋白细胞骨架快速响应细胞和细胞外信号，并且在许多细胞过程中是细胞骨架参与的组成部分。这些包括细胞形状和运动、肌肉收缩、细胞内运输、细胞发病机制和信号转导。
Cytoskeleton/艾美捷 高纯度和生物活性肌动蛋白、肌动蛋白结合蛋白、抗体、缓冲液和研究生物化学试剂盒™. 使研究人员能够轻松获得该领域使用的一些最强大的体内和体外分析。解决生物学中的一些基本问题的地方，有很多引用。
Cytoskeleton 覆盖肌动蛋白，微管蛋白，马达蛋白，小G蛋白，细胞外基质，活细胞成像等相关领域，提供对应的蛋白质，抗体，检测与分析试剂盒。
活性染料™ 荧光phalloidins系列，是结果异常明亮和稳定的探针。在使用Acti染色剂时，可在不牺牲染色质量的同时节省成本™ ，这些探头与FITC、TRITC和Cy 5等常用过滤器组兼容。内部制造、严格的质量控制和方便的包装相结合，非常优秀。
Cytoskeleton/艾美捷 活性染料™ 荧光phalloidins 用途：
1.在固定细胞中染色F-肌动蛋白
2.体外稳定肌动蛋白丝
3.体外观察肌动蛋白丝
肌动蛋白染色对确定活细胞和固定细胞中细胞骨架的结构和功能非常有用。肌动蛋白细胞骨架在活细胞中是一个非常动态和不稳定的结构，但在探测或染色肌动蛋白结构之前，它可以用多聚甲醛固定。
艾美捷科技是Cytoskeleton的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
来源：https://www.amyjet.com/brand/Cytoskeleton-china-distributor.shtml
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Cytoskeleton 艾美捷 肌动蛋白结合蛋白研究
对所有肌动蛋白结合蛋白（ABPs）进行分析，以确保其活性与公布值相当。检测因产品而异，包括F-肌动蛋白切断检测、F-肌动蛋白活化ATP水解检测和肌动蛋白聚合检测。测量WASP VCA结构域蛋白在肌动蛋白聚合中的作用如图所示。
Arp2/3和WASP VCA结构域刺激肌动蛋白聚合。试剂盒BK003用于研究Arp2/3（Cat.#RP01）和WASP VCA（Cat.#VCG03）结构域对体外肌动蛋白聚合的影响。
Cytoskeleton/艾美捷 纯化肌动蛋白结合蛋白，所有细胞骨架的肌动蛋白结合蛋白都具有高纯度，并经过严格的生物活性测试。细胞骨架还为肌动蛋白结合蛋白研究提供肌动蛋白蛋白、抗体和试剂盒。
Cytoskeleton 覆盖肌动蛋白，微管蛋白，马达蛋白，小G蛋白，细胞外基质，活细胞成像等相关领域，提供对应的蛋白质，抗体，检测与分析试剂盒。
Cytoskeleton相关研究工具：
肌动蛋白结合蛋白降速分析生物化学试剂盒：人血小板肌动蛋白 BK013
肌动蛋白结合蛋白降速分析生化试剂盒：兔骨骼肌肌动蛋白 BK001
肌动蛋白聚合生物化学试剂盒（荧光格式）：兔骨骼肌肌动蛋白 BK003
α-肌动蛋白：兔骨骼肌 AT01
抗泛肌动蛋白小鼠单克隆抗体（克隆7A8.2.1） AAN02
抗泛肌动蛋白：兔多克隆 AAN01
Arp2/3蛋白复合物：牛脑 RP01
Arp2/3蛋白复合物：猪脑 RP01P
Cofilin 1蛋白：重组人 CF01
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Cytoskeleton 艾美捷肌动蛋白结合蛋白降速分析生物化学试剂盒
肌动蛋白结合蛋白降速分析试剂盒提供G-或F-肌动蛋白+阳性（α-肌动蛋白）和阴性（牛血清白蛋白，BSA）结合对照蛋白。当对肌动蛋白的任何部位有亲和力时，就会发生肌动蛋白结合。F-肌动蛋白结合可以通过自旋下降法测量。通过这种方式，离心被用来通过差速沉淀分离F-肌动蛋白和G-肌动蛋白。
F-肌动蛋白结合蛋白将与肌动蛋白丝共沉淀，并在离心管底部形成颗粒。可以检测到具有F-肌动蛋白捆绑活性的蛋白质，因为它们会导致F-肌动蛋白以低于正常水平的离心力沉积（14000 x g vs 150000 x g）。F-肌动蛋白切断蛋白、G-肌动蛋白结合蛋白或非肌动蛋白结合蛋白将留在上清液中。如果上清液中的G-肌动蛋白比阴性对照样品中的G-肌动蛋白多，则可能会出现分离蛋白的情况，应通过测量添加测试蛋白前后的F-肌动蛋白长度分布来进一步测试这种活性。
G-肌动蛋白结合蛋白可以通过向G-肌动蛋白中添加测试蛋白并诱导聚合来测量，如果测试蛋白隔离G-肌动蛋白，那么在旋转下降试验期间，与对照相比，上清液中会留下更多肌动蛋白。
Cytoskeleton/艾美捷肌动蛋白结合蛋白降速分析生物化学试剂盒含有非肌肉肌动蛋白。骨骼肌肌动蛋白也有相同的试剂盒，骨骼肌肌动蛋白降速试剂盒可能更适合用于研究肌肉组织中的肌动蛋白结合蛋白。
Cytoskeleton 覆盖肌动蛋白，微管蛋白，马达蛋白，小G蛋白，细胞外基质，活细胞成像等相关领域，提供对应的蛋白质，抗体，检测与分析试剂盒。
Cytoskeleton相关研究工具：
肌动蛋白（纯度>99%）：人血小板
微管结合蛋白自旋下降分析生物化学试剂盒
Cofilin 1蛋白：重组人
Profilin 1蛋白：未标记的人重组蛋白
Cofilin 1蛋白：重组人
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Cytoskeleton 艾美捷 Vav2蛋白实验原理
人类Vav2蛋白的DH结构域已在细菌表达系统中产生。它含有一个6xHis标记在其氨基末端用于纯化。注册号为NM001134398.1。GE06的分子量约为25kDa。Vav2 DH蛋白以白色冻干粉末的形式提供。蛋白质纯度通过在4-20%聚丙烯酰胺梯度凝胶上扫描考马斯蓝染色蛋白质的密度测定来确定。Vav2 DH蛋白的纯度约为80%。
Cytoskeleton/艾美捷Vav2蛋白是一种对Rac1有选择性的鸟嘌呤交换因子，在多种条件下介导Rac1激活，并与胃肿瘤以及细胞体积控制和神经轴突延伸有关：
1.Vav2 GTP/GDP交换活性抑制剂的研究
2.Vav2 DH结构域结合蛋白的鉴定
3.不同GTP酶对Vav2-GEF活性的研究
Cytoskeleton 覆盖肌动蛋白，微管蛋白，马达蛋白，小G蛋白，细胞外基质，活细胞成像等相关领域，提供对应的蛋白质，抗体，检测与分析试剂盒。
Cytoskeleton/艾美捷Vav2蛋白生物活性测定：
Vav2 DH的生物活性可以通过其催化Rac1上核苷酸交换的能力来确定，使用Bodipy GDP的核苷酸交换试验检测过量的GDP或GTP。Rac1蛋白质通过添加过量的EDTA预加载Bodipy FL GDP，例如，反应中每mmol Mg2+离子添加0.7 mmol EDTA。然后以解离分析的形式使用该子储备溶液，这表明与未标记的核苷酸竞争交换位点。反应通过485nm Ex/535nm Em下的荧光测量进行监测。严格的质量控制确保在存在0.8µM Vav2 DH的情况下，Bodipy GTP或mant GTP的交换率至少提高五倍。
方法：
1.将Vav2小瓶放在冰上，用冰冷交换缓冲液稀释至0.30微克/微升（8微升）。
2.用冰冷交换缓冲液将Rac蛋白稀释至1.25µg/µl（50µM）。
3.在新鲜的15毫升Falcon管中加入以下成分，并通过移液管或轻轻旋涡充分混合：
每口井的成分微升交换缓冲区75
50µM Rac 5
8µM Vav2 10
注：对于总混合物体积，将每个孔的试剂体积乘以实验中的孔数，再加上20%的体积以计算移液损失。
4.在室温（RT）下培养20分钟。
5.通过添加10µl（每孔）50 mM MgCl2锁定核苷酸。
6.设置荧光计，激发波长为485 nm+/-15 nm，发射波长为525 nm+/-15 nm。
7.将预加载的混合物等分到指定的孔中，并将平板放入荧光计中。
8.在5个周期（150秒）后，将程序置于保持或暂停状态，然后卸下平板。
9.移取10µl a）5 mM GTP溶液，b）小化合物，c）测试蛋白质，d）4 mM EDTA（+ve交换对照）或e）稀释缓冲液（阴性对照）于各孔中，并立即上下移液两次，然后继续读取20分钟。
10.完成动力学方案后保存读数。通过将数据减少到最大斜率（使用12个点）或Vmax，并使用读板器附带的软件，可以计算汇率。交换曲线可以通过导出到Microsoft Excel来实现。
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PROTEOSTAT 蛋白质聚集检测试剂盒——可靠、简便、精确
蛋白质聚集（Protein Aggregation）通常是通过一系列过程实现，首先是蛋白内部结构的变化导致形成二聚体或寡聚体，随后聚集体生长，最后形成亚可见或可见的颗粒。
蛋白质聚集在蛋白类产品生产过程中的各个阶段普遍存在，由于聚集体对产品质量、有效性以及安全性有潜在的负面影响，对其有效控制是蛋白质类药物产品开发和商业化的主要挑战之一。此外蛋白聚集体可能存在潜在增强免疫原性的风险。生物制药行业一直都希望在生物工艺中找到新的方法，可用于检测、追踪、定量分析影响蛋白聚集的因素。
因此，准确高效地定量分析生物制品中的蛋白质聚集情况是科研工作者所bi备的技能之一。艾美捷PROTEOSTAT 蛋白质聚集检测试剂盒解决方案如下：
PROTEOSTAT 蛋白质聚集检测试剂盒提供了一种可靠、简便、精确的测定方法，用于监测溶液中的肽和蛋白质聚集情况。PROTEOSTAT 蛋白质聚集标准品（ENZ-51039）是wei一可商用的检测痕量蛋白质聚集体水平的稳定、高质量标准品。易于使用 -只需加水！
艾美捷 蛋白质聚集检测试剂盒，特点：
一种简单、敏感、均匀的荧光检测方法
经过验证可用于微板或流式细胞仪平台
以IgG为基准进行了广泛的测试
优化蛋白质配方的缓冲剂和辅料
在广泛的pH值和离子强度范围内表现良好
与PROTEOSTAT蛋白质聚集标准品一起使用，可精确定量溶液中的聚集蛋白。
艾美捷 蛋白质聚集检测试剂盒，应用：
鉴别蛋白聚集抑制剂
监控大包装产品和反复冻融引起的蛋白聚集
确定病毒灭活后的储存条件
优化蛋白制剂中缓冲液和赋形剂的配方
确定纯化后的储存条件
艾美捷 蛋白质聚集检测试剂盒，结果展示：
相关研究工具：
cat# 名称
ENZ-51039-KP002 PROTEOSTAT Protein aggregation standards
PROTEOSTAT 蛋白质聚集标准品
ADI-900-057 Protein A ELISA kit
蛋白A检测试剂盒
ENZ-51027-K400 PROTEOSTAT Thermal shift stability assay kit
热稳定检测试剂盒
ENZ-51040-KP002 PROTEOSTAT Protein refolding and aggregation sensing kit for microplates
蛋白内稳态 蛋白复性和聚集敏感试剂盒（ 微孔板）
ENZ-KIT128-0001 CHO host cell protein ELISA kit
CHO 宿主细胞蛋白ELISA 试剂盒
ENZ-KIT127-0001 E.coli host cell protein ELISA kit
大肠杆菌 宿主细胞蛋白ELISA 试剂盒
来源：https://www.amyjet.com/featured/protein-aggregation.shtml
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PD-1/PD-L1体内用抗体解决方案
Programmed death-1（PD-1）是在T细胞上表达的一种抑制性受体，可促进炎症性T细胞的凋亡并抑制抗炎性调节T细胞的凋亡，从而促进自我耐受性并预防自身免疫性疾病。为了逃避免疫系统的监视，肿瘤细胞经常通过过度表达PD-L1来与PD-1结合并激活PD-1。抗PD-1单克隆抗体用于阻断PD-L1与PD-1的结合，从而使免疫系统能够发现并杀死肿瘤细胞。
艾美捷 ichorbio 高质量anti mouse PD-1体内用抗体（cat#ICH1132）和anti-mouse PD-L1体内用抗体(cat#ICH1086),抗体通过结合PD-1或者 PD-L1，可在空间上阻断PD-1与PD-1配体的结合，从而阻断PD-1信号传导,非常适合在小鼠体内模型中阻断PD-1信号传导。
指标——PD-1体内用抗体
低内毒素：
Ichorbio——ICH1132
BioXcell——BE0146
超低内毒素：
Ichorbio——ICH1132UL
BioXcell——BP0146
指标——PD-L1体内用抗体
低内毒素：
Ichorbio——ICH1086
BioXcell——BE0101
超低内毒素：
Ichorbio——ICH1086UL
BioXcell——BP0101
anti mouse PD-1体内用抗体（cat#ICH1132）和anti-mouse PD-L1体内用抗体(cat#ICH1086)均经过严格测试，以确保它们不含鼠病原体，内毒素水平＜1 EU/mg，纯度＞95%，蛋白质聚集水平＜5%，是小鼠体内研究PD-1/PD-L1信号通路的优选。
艾美捷 PD-1/PD-L1体内用抗体已发表文章：
该研究使用了Ichorbio/抗小鼠 PD-1体内抗体（cat#ICH1132）及小鼠IgG2a同型对照（cat#ICH2244）,向小鼠体内注射抗PD-1体内抗体，实现在动物活体中阻断PD-1/PD-L1相互作用，从而评估受病毒感染的小鼠体内PD-1 通路对T细胞亚群比例、BVDV感染小鼠外周血淋巴细胞（PBL）的凋亡和增殖以及血清中细胞因子产生的影响。
来源：https://www.amyjet.com/featured/pd-1-4.shtml
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生物仿制药疑难杂症，Ichorbio解决方案
生物仿制药怎么选？近年来生物仿制药（biosimilars）越来越受重视，许多生物制品如利妥昔单抗、曲妥珠单抗、阿达木单抗和贝伐珠单抗被广泛应用到肿瘤治疗与抗癌治疗的第一线，越来越多的潜在药物正在做临床研究。小艾来教你怎么选~
生物仿制药通常是一种来自活生物体的生物产品，例如人类、动物、微生物或酵母。它与原研药具有相同的活性成分，在剂量、剂型、给药途径、安全性和有效性、质量、治疗作用以及适应症上没有显著差异的一种仿制品。
众多科研从业者因为高昂的售价，而无法亲近原研的抗体药，随着原研药的专利保护失效，越来越多的医药企业投身到了生物仿制药领域的研发。艾美捷/研究级生物仿制药（单抗药）大拿ichorbio提供以下解决方案（小部分）：
生物仿制药类似物（仅研究用途，非诊断与治疗）
靶标 英文名称 中文名称 cat#
4-1BB Utomilumab 乌托鲁单抗 ICH5014
4-1BB Urelumab 乌瑞芦单抗 ICH5015
5T4 Naptumomab 那普妥莫单抗 ICH5007
Amyloid Beta （Aβ） Aducanumab 阿杜那单抗 ICH5008
Amyloid Beta （Aβ） Gantenerumab 更汀芦单抗 ICH5009
Angiopoietin 2 （AGN2） Nesvacumab 奈伐苏单抗 ICH5010
BCMA Belantamab mafodotin 贝兰他单抗莫福汀 ICH5011
C1s Sutimlimab 苏替莫单抗 ICH5012
CALCA, CALCB Eptinezumab 依普奈珠单抗 ICH5044
Carbonic Anhydrase IX Girentuximab 吉妥昔单抗 ICH5013
CD14 Atibuclimab 阿替布利单抗 ICH5016
CD19 MDX-1342 MDX-1342 ICH5018
CD20 Rituximab 利妥昔单抗 ICH4011
CD20 Obinutuzumab 阿托珠单抗 ICH4026
CD20 Ofatumumab 奥法木单抗 ICH4027
CD22 Moxetumomab pasudotox 鲁磨西替 ICH5020
CD25 Daclizumab 达利珠单抗 ICH5021
CD27 Varlilumab 伐立鲁单抗 ICH5022
CD28 Theralizumab 西拉利珠单抗 ICH5023
CD3/CD19 Blinatumomab 博纳吐单抗 ICH5025
CD3/CD20 Glofitamab 格菲妥单抗 ICH5019
CD3/CD20 Odronextamab 奥尼妥单抗 ICH5027
CD38 Daratumumab 达雷木单抗 ICH4020
CD38 Isatuximab 伊沙妥昔单抗 ICH5028
CD3e Muromonab-CD3 莫罗单抗-CD3 ICH5024
CD3e/CD20 Mosunetuzumab 莫舒内珠单抗 ICH5026
CD4 Ibalizumab 伊巴珠单抗 ICH5029
（以上仅为部分生物仿制药类似物）
Ichorbio生物仿制药特点如下：
1.高纯度：≥95%
2.低内毒素：≤0.75 EU/mg
3.GMP条件下生产
来源：https://www.amyjet.com/featured/biosimilar.shtml
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HIV-1 p24 ELISA试剂盒操作注意事项
HIV-1 p24 ELISA试剂盒是一种酶联免疫吸附法定量检测样本中HIV-1 p24的测量。艾美捷HIV-1 p24 ELISA 试剂盒又称HIV-1 p24 ELISA Kit，是Abnova很优秀的一款试剂盒。
艾美捷 HIV-1 p24 ELISA试剂盒检测原理：
采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人类免疫缺陷病毒1型p24抗原（HIV-1 P24）捕获抗体的包被微孔中，依次加入阴性对照、阳性对照、样本、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的人类免疫缺陷病毒1型p24抗原（HIV-1 P24）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），判断样品是否含有人类免疫缺陷病毒1型p24抗原（HIV-1 P24）。
HIV-1 p24 ELISA试剂盒操作注意事项：
1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.预处理后的样本无需稀释，直接去10ul加样即可。
4.严格按照说明书中标明的时间加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
HIV-1 p24 ELISA试剂盒性能：
准确性：阳性对照孔OD值平均值≥1.00；阴性对照孔OD值≤0.15，说明试验结果有效。
特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
有效期：半年
*仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验
来源：https://www.amyjet.com/products/KA6284.shtml
