来宝网 2022/2/19点击775次
在生物学研究过程中常常需要检测细胞凋亡情况。目前至少有十数种检测细胞凋亡的方法,大致可分为基于细胞形态、生物学功能和生化标记三大类。那接下来就来说一下Annexin V-细胞凋亡检测方法。
Annexin V凋亡检测原理：
当细胞发生凋亡时，会首先出现细胞膜结构的改变。其中在正常情况下，细胞膜中磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine, PS）通常存在于内表面，而在细胞发生凋亡的过程中，PS会外翻、转移到质膜的外层。因此可以通过该现象，利用检测磷脂酰丝氨酸的方法，检验细胞是否发生凋亡。
Annexin V是膜联蛋白的一种，其功能目前尚不明确，但Annexin V已知可在钙离子存在的情况下与磷脂酰丝氨酸高亲和力结合。利用该特点，使用荧光或其他偶联标记标记的Annexin V即可检测细胞膜表面暴露的PS。
由于细胞在晚期凋亡或死亡后细胞膜结构破坏，此时Annexin V可以随意进出细胞，染色呈阳性，这就造成与我们关注的早期凋亡事件无法区分。而在细胞早期凋亡时，细胞膜完整性尚未破坏，此时非浸透性荧光染料如7-AAD或PI无法进入细胞，染色呈阴性。因此结合Annexin V和7-AAD/PI染色，经流式细胞仪和荧光显微镜检测，即可区分早期凋亡和晚期凋亡/死亡细胞。
艾美捷/Annexin V 是一种磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，它通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合，是检测细胞早期凋亡的灵敏指标。
艾美捷/Annexin V组成成分：
以上，就是有关艾美捷/Annexin V-细胞凋亡检测的相关解决方案了。
来源：https://www.amyjet.com/products/10040-01.shtml
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抗人白细胞介素-17A艾美捷丨Mabtech方案来啦
抗人白细胞介素-17A单克隆抗体，能够在ELISA和ELISpot等免疫分析中灵敏、特异地检测人IL-17A。该抗体也适用于流式细胞术检测IL-17A。
Mabtech/艾美捷抗人白细胞介素-17A单克隆抗体相关参数：
抗体：MT504
代码：3520-6-250
数量：250μg
免疫原：重组人IL-17A
亚型：小鼠IgG1
特异性：天然和重组人IL-17A。与恒河猴、食蟹猴和普通狨猴的天然IL-17A发生交叉反应。该抗体还与来自牛、羊、马、猪和狗的IL-17A交叉。
浓度：在无菌过滤（0.2μm）PBS中以0.5 mg/ml的浓度供应，其中含有0.02%叠氮化钠。
纯化：通过蛋白质G亲和层析从体外培养物中纯化。
生物素化：通过与生物素的N-羟基琥珀酰亚胺酯反应使生物素化。
储存：在4-8°C或-20°C或更低温度下冷冻。避免反复冷冻/解冻。按照说明储存，建议使用多长时间。
应用：使用ELISA对溶液（例如细胞培养上清液）中的IL-17A进行定量，并使用ELISpot对产生IL-17A的细胞进行计数。建议将MT504与涂层mAb MT44结合作为检测mAb。6用于人IL-17A（代码3520-3）或单克隆抗体MT241用于猕猴IL-17A（代码3520M-3）。
Mabtech，在ELISpot、FluoroSpot 以及ELISA 免疫试验技术领域有着非常有特色的标志，并拥有多种针对细胞因子，免疫球蛋白和载脂蛋白的单克隆抗体，用于生命科学研究中的体外应用。
以上，就是Mabtech/抗人白细胞介素-17A单克隆抗体相关介绍。
艾美捷科技是Mabtech的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
来源;https://www.amyjet.com/brand/Mabtech-china-distributor.shtml
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Norgen/艾美捷丨多种分析物试剂盒方案
Norgen/多种分析物试剂盒——从单个样品中分离高质量的RNA、DNA和蛋白质，无需样品拆分。
Norgen/拭子收集和核酸保存特点如下：
1.广泛提供从单个样本中同时或顺序纯化多种分析物（RNA、DNA、蛋白质）的试剂盒
2.无样品分离，适用于贵重或难以获得的样品
3.不使用苯酚或沉淀法
4.高质量总RNA、gDNA和蛋白质的分离，适用于许多敏感的下游应用
5.快速、高效和用户友好的程序
6.根据样品输入体积和/或样品类型，一些试剂盒提供小洗脱体积，以浓缩纯化的分析物
7.纯化基于使用诺根专有碳化硅树脂分离矩阵的旋转柱色谱法
Norgen/多分析物试剂盒非常适合于对单个样本的基因组、蛋白质组和转录组研究感兴趣的研究人员，例如微RNA图谱研究、包括基因沉默实验或mRNA敲除在内的基因表达研究、涉及生物标记物发现的研究，以及培养细胞系的特征。
Norgen/多分析物试剂盒对于从珍贵、难以获得或小样本（例如活检材料或细胞培养的单个病灶）中分离大分子的研究人员特别有用，因为它消除了分离样本的需要。有了广泛的可用产品，研究人员能够找到适合他们研究和应用的理想试剂盒。
Norgen/RNA、DNA和蛋白质组合试剂盒：
cat# 名称 规格
47700 RNA/DNA/Protein Purification Plus Kit 50 preps
51600 RNA/DNA/Protein Purification Plus Micro Kit 50 preps
51700 RNA/DNA/Protein Purification 96-Well Plus Kit 1 x 96-well plate
48700 RNA/DNA Purification Kit 50 preps
50300 RNA/DNA Purification Micro Kit 50 preps
48200 RNA/Protein Purification Plus Kit 50 preps
Norgen/血浆/血清、尿液、粪便、FFPE、细胞质和环境组合试剂盒：
cat# 名称 规格
68100 Plasma/Serum Total cfc-Nucleic Acid Advanced Purification Kit 50 preps
68300 Plasma/Serum cfc-RNA/cfc-DNA Advanced Fractionation Kit 50 preps
55200 Plasma/Serum RNA/DNA Purification Mini Kit 50 preps
56300 Plasma/Serum Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Mini Kit 50 preps
56400 Plasma/Serum Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Midi Kit 20 preps
56500 Plasma/Serum Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Maxi Kit 10 preps
59900 Urine Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Mini Kit 50 preps
60000 Urine Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Midi Kit 20 preps
60100 Urine Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Maxi Kit 10 preps
45600 Stool Nucleic Acid Isolation Kit 50 preps
54300 FFPE RNA/DNA Purification Plus Kit 50 preps
21000, 37400 Cytoplasmic and Nuclear RNA Purification Kits 50 preps,
100 preps
24400 Plant RNA/DNA Purification Kit 50 preps
26400, 26450 Water RNA/DNA Purification Kit - 0.45 µm and 0.22 µm 25 preps
26480 Water RNA/DNA Purification Kit 50 preps
艾美捷科技是Norgen Biotek的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
来源：https://www.amyjet.com/brand/norgen--china-distributor.shtml
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Norgen/艾美捷丨粪便样本制备设备
Norgen/粪便样本制备设备——保存微生物群图谱，以获得无偏、可重复的结果。
粪便样本的适当保存和储存对于维持核酸保真度和微生物群落组成以用于下游应用和分析（包括下一代测序（NGS）和微生物组特征）至关重要。在样本材料保存不充分的情况下，可能会引入收集后偏差。Norgen Biotek/粪便收集和保存设备在环境温度下保存微生物群，以获得无偏、可重复的结果。诺根设备中保存的样本是非传染性的，可以在环境温度下安全运输。
Norgen/粪便样本制备设备特点如下：
1.防腐剂提供了样品的均匀性，消除了样品的变异性
2.在环境温度下保存并安全运输DNA和RNA
3.无需冷藏运输/储存-无需麻烦且经济高效
4.分离高质量核酸用于任何应用，包括16s-NGS
5.在一定温度范围内保持稳定
6.可定制各种配件，便于安全收藏
7.消除异味，使样品安全且无传染性。
Norgen/研究用工具包：
45630, 45660 Stool Nucleic Acid Collection and Preservation Tubes 1 tube, 50 tubes
63700 Stool Nucleic Acid Collection and Preservation System 50 devices
27650 Fecal DNA Collection & Preservation Mini Tubes 12 tubes
45670-B Fecal Swab Collection and Preservation System 50 devices
Norgen/诊断用试剂盒：
Dx45660 Stool Nucleic Acid Collection and Preservation Devices Dx 50 devices
Norgen/血浆/血清、尿液、粪便、FFPE、细胞质和环境组合试剂盒：
cat# 名称 规格
68100 Plasma/Serum Total cfc-Nucleic Acid Advanced Purification Kit 50 preps
68300 Plasma/Serum cfc-RNA/cfc-DNA Advanced Fractionation Kit 50 preps
55200 Plasma/Serum RNA/DNA Purification Mini Kit 50 preps
56300 Plasma/Serum Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Mini Kit 50 preps
56400 Plasma/Serum Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Midi Kit 20 preps
56500 Plasma/Serum Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Maxi Kit 10 preps
59900 Urine Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Mini Kit 50 preps
60000 Urine Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Midi Kit 20 preps
60100 Urine Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Maxi Kit 10 preps
45600 Stool Nucleic Acid Isolation Kit 50 preps
54300 FFPE RNA/DNA Purification Plus Kit 50 preps
21000, 37400 Cytoplasmic and Nuclear RNA Purification Kits 50 preps,
100 preps
24400 Plant RNA/DNA Purification Kit 50 preps
26400, 26450 Water RNA/DNA Purification Kit - 0.45 µm and 0.22 µm 25 preps
26480 Water RNA/DNA Purification Kit 50 preps
艾美捷科技是Norgen Biotek的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
来源：https://www.amyjet.com/brand/norgen--china-distributor.shtml
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Abbkine动物细胞或组织总蛋白提取试剂盒的应用和组分
动物细胞/组织总蛋白提取试剂盒，由优化细胞裂解液和离心管柱及 2.0ml 接收管组成，能够快速从动物细胞和组织（无脊椎动物和脊椎动物）中提取总蛋白，用于蛋白质分析和进一步纯化。动物细胞/组织总蛋白提取试剂盒同时提供天然和变性两种不同的裂解液，可供用户选择。离心管柱技术提取蛋白质，样品量最小可处理 20ul，最大可达 500ul。从细胞/组织中提取总蛋白质仅需 1-8 分钟，得率可达 2-8mg/ml。
左图：通过变性裂解缓冲液和来自不同制造商的天然缓冲液提取的小鼠肝脏蛋白质图谱。提取的蛋白质在10%SDS-PAGE中分离，并用考马斯蓝染色。1号车道，标记；车道2，制造商提供的本地缓冲区；3号车道，来自Abbkine的本地缓冲区；车道4，制造商提供的变性裂解缓冲液；通道5，B制造商提供的变性裂解缓冲液；车道6，C制造商提供的变性裂解缓冲液；通道7，Abbkine的变性裂解缓冲液；通道8，D制造商提供的变性裂解缓冲液。
右图：从293细胞和小鼠肝脏中提取总蛋白。Lane 1，5μL蛋白质，通过B分析试剂盒提取；Lane 2，通过B分析试剂盒提取的2.5μL蛋白质；用Abbkine试剂盒提取的Lane 3，5μL蛋白质；通道4，通过Abbkine试剂盒提取的2.5μL蛋白质。
Abbkine/ExKine™ 动物细胞/组织总蛋白提取试剂盒应用：
可应用于 SDS-PAGE, immunoblottings, IP, ELISA，酶检测及其他应用，蛋白质分析和小规模蛋白层析纯化
Abbkine/ExKine™ 动物细胞/组织总蛋白提取试剂盒组成成分：
1. 25ml 变性细胞裂解液（SD-001）
2. 25ml 天然细胞裂解液（SN-002）
3. 50 个离心管柱
4. 50 个收集管
5. 4 根塑料研磨棒
储存：
天然细胞裂解液（SN-002）储存于 4℃，其他部分储存于常温
注：所有实验步骤请在2-8°C下执行。使用预冷的缓冲液和设备，并确保所有溶液都是解冻和均匀的。
来源：https://www.abbkine.cn/product/ktp3007/
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新一代蛋白质提取工具丨Abbkine植物组织总蛋白提取试剂盒
Abbkine/ExKine Pro植物组织总蛋白提取试剂盒用于植物组织中提取总蛋白，试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂，作用温和，可快速获得总蛋白，可用于免疫印迹实验等基础研究实验，且仅用于科研。
ExKine™ Pro植物组织总蛋白提取试剂盒（柱式法），是新一代超快速蛋白质提取工具。越来越多的证据表明最常用的RIPA缓冲液可能导致蛋白质的随机损失，产生很多难以解释的疑难数据。ExKine™ Pro植物组织总蛋白提取试剂盒（柱式法）使用离心管柱提取技术结合优化的裂解缓冲液可以更快速、更有效地提取总蛋白，无需液氮研磨，使WB结果更加准确。
Abbkine/ExKine™ 动物细胞/组织总蛋白提取试剂盒组成成分：
•变性细胞裂解缓冲液
•蛋白质提取滤芯
•带盖的收集管
•塑料棒
Abbkine/ExKine™ Pro植物组织总蛋白提取试剂盒（柱式法）特点：
• 方便快捷：一“柱”到底，全程8分钟。
• 多用途：适用样本齐全，植物组织叶片、种子、软茎、根。
• 蛋白得率高：从50-200 mg植物组织提总蛋白，得率可达2-8 mg/mL。
• 操作简易：无需液氮研磨，优化的裂解缓冲液更加高效提蛋白。
• 兼容性好：所得蛋白可用于SDS-PAGE和WB等下游实验。
Abbkine/ExKine™ 动物细胞/组织总蛋白提取试剂盒使用中注意事项：
1. 蛋白酶抑制剂不是必须加入，但是如果下游实验需要较长时间或者蛋白提取后保存较长时间，建议添加蛋白酶抑制剂，使用BCA法测定蛋白浓度，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。研究蛋白磷酸化，磷酸酶抑制剂应在使用前加入Denaturing Cel Lysis Buffer。
2. WB上样前，仍需和 Loading Buffer 混匀煮制样品。
3. Plastic Rod可以重复使用，用去离子水彻底冲洗干净，用纸巾擦干。
4. 若蛋白浓度较低，可增加组织的质量或减少Denaturing Cell Lysis Buffer的体积。
5. 部分未完全裂解的组织不会影响样品质量。
来源：https://www.abbkine.cn/product/ktp3008/
