来宝网 2021/11/26点击1127次
Cytoskeleton微管蛋白活细胞染色和聚合分析方案
Cytoskeleton专注于生物化学和细胞过程研究中的纯化蛋白和便捷试剂盒开发与生产。除了提供药物筛选、信号转导、蛋白质转录后修饰(PTM)、细胞骨架研究相关的系列试剂盒和产品,还提供微管蛋白,肌动蛋白,小G蛋白,GAPs,GEFs等现有产品的药物筛选服务。
Cytoskeleton产品线包括有340余种,其产品主要覆盖肌动蛋白,微管蛋白,马达蛋白,小G蛋白,细胞外基质,活细胞探针成像等相关领域,提供对应的蛋白质,抗体,检测与分析试剂盒。
一、Cytoskeleton微管蛋白tubulin染色(活细胞)& 微管蛋白聚合分析
#Tubulin活细胞染色:
我们在网上可以搜索到tubulin的染色产品,比如鬼笔环肽衍生物系列,但是基本面没有见到过微管的染料,更别提活细胞的微管染料。艾美捷 Cytoskeleton丨活细胞微管染色试剂盒这不就来了么。
名称 Ex/Em 滤光镜 cat#
SiR-Tubulin Kit 630 / 680 nm 标准Cy5设置 CY-SC002
SiR700-Tubulin Kit 690 / 720 nm 可以使用Cy5设置。但推荐检测700-800nm的发射光 CY-SC014
#微管蛋白聚合分析:
微管在细胞形态结构 、细胞分裂和运动中起着重要作用 。某些植物类抗癌药如秋水仙素 、紫杉醇等就是通过影响微管蛋白的聚合-解聚活性来破坏微管组装与去组装的动态平衡, 遏制肿瘤细胞的有丝分裂从而发挥其抗癌作用 。微管和微管蛋白的相互作用是靶向性筛选抗肿瘤化合物的重要模型之一 。艾美捷 Cytoskeleton丨微管蛋白聚合分析试剂盒这不就来了么。
名称及描述 cat# 规格 说明
Tubulin polymerization assay using >99% pure tubulin, OD based - Porcine BK006P 24-30 assays 比色法
Tubulin polymerization assay using >99% pure tubulin, fluorescence based BK011P 96 assays 荧光法
二、Cytoskeleton活细胞微丝蛋白F-actin的染色 & 肌动蛋白聚合分析
#F-actin活细胞染色:
关于actin染色,我们都知道鬼笔环肽衍生物系列产品,可以用于固定后细胞的染色,但是,有没有一种可以染活细胞F-actin的染料呢?研究者对此类产品有迫切需求,艾美捷 Cytoskeleton 活细胞骨架染色方案这不就来了么。
名称 Ex/Em 滤光镜 cat#
SiR-Actin Kit 630 / 680 nm 标准Cy5设置 CY-SC001
SiR700-Actin Kit 690 / 720 nm 可以使用Cy5设置。
但推荐检测700-800nm的发射光 CY-SC013
#肌动蛋白聚合分析:
肌动蛋白聚合和解聚的动态特性对细胞粘附和迁移等功能极为重要。因此,对肌动蛋白重组的分子机制进行研究以获得靶标癌症和心血管疾病的治疗剂。Cytoskeleton 肌动蛋白聚合分析生化试剂盒这不就来了么。
名称及描述 cat# 规格 说明
Actin Polymerization Biochem Kit (fluorescence format): rabbit skeletal muscle actin BK003 30-100 assays 荧光法
更多详细信息下期见~
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Cytoskeleton丨小G蛋白活化检测、细胞DNA染色、SPY探针方案
一、Cytoskeleton 小G蛋白活化检测试剂盒
传统检测Rho蛋白活化水平的方法主要为下拉检测。下拉法经常存在耗时长,需要样本量大,不太适合高通量检测等缺点。为克服传统方法这些方面的缺点,艾美捷 Cytoskeleton 新一代G-LISA™检测方法,用于快速替换地检测GTP酶活化水平。
G-LISA法对比传统的拉下来,主要有操作调试,上样量少,可同时检测多个样本,反应时间短,定量结果准确,与小鼠,大鼠和人的组织和细胞相容等优势。细胞骨架提供的小G蛋白活化检测试剂盒分为G-LISA ® 格式和下拉格式。
二、Cytoskeleton 细胞DNA染色
SiR-DNA™的主要发展方向是将荧光特性、高DNA特异性、低毒性与远红外激发/发射范围相结合。此外,由于其稳定性和对远红光的特性,探针在超分辨显微镜(STDE和SIM)中表现非常好。因此,SiR-DNA™是一种优良的探针,其性能与SiR-tubulin和SiR-actin一样优秀。
名称 Ex/Em 滤光镜 cat#
SiR-DNA Kit 652/672nm 标准Cy5设置 CY-SC007
SiR700-DNA Kit 689/716nm 标准Cy5设置 CY-SC015
三、Cytoskeleton 活细胞成像探针– SPY探针
名称 Ex/Em 滤光镜 货号
SPY555-actin 555/580nm TMR 或 Cy3通道 CY-SC202
SPY555-tubulin 555/580nm TMR 或Cy3通道 CY-SC203
SPY650-tubulin 650/675nm Cy5通道 CY-SC503
SPY505-DNA 510/530nm (FITC) 或 (YFP)通道 CY-SC101
SPY555-DNA 555/580nm TMR通道 CY-SC201
SPY595-DNA 605/645nm Alexa 594通道 CY-SC301
SPY650-DNA 650/675nm Cy5通道 CY-SC501
SPY700-DNA 690/720nm Cy5或远红外通道 CY-SC601
Cytoskeleton SPY探针充分兼容了SiR探针的所有优点,同时还做了许多实质性的改进。
1.荧光性质–背景比SiR和SIR700探针还要小;2.多种荧光团覆盖(例如,远红色,橙色,红色和绿色);3.灵敏度和选择性高;4.细胞通透性得到改善;5.遵循与SiR相同的方案,孵育时间更短且浓度更低(探针持续时间更长,并且不影响细胞骨架动力学);6.无细胞毒性。
四、Cytoskeleton 细胞外基质(ECM)研究工具
特别的荧光标记和生物素化纤连蛋白,Laminin系列:
应用 cat#
体外伪足/足小体侵袭试验 FNR01 ,FNR02 ,LMN01 ,LMN02
涉及纤连蛋白蛋白质组装的信号途径:原纤维形成检测 FNR01,FNR02,FNR03
组织工程应用程序 FNR03,LMN03
艾美捷科技是Cytoskeleton的中国代理商,为科研工作者提供优质的小G蛋白活化检测试剂盒及相关细胞骨架分析方案。
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Lumiprobe 荧光法双链DNA检测工具,一种极为灵敏的荧光核酸染料
在许多生物学应用中,我们都需要对微量的双链DNA(dsDNA)进行定量 例如:cDNA文库构建、亚克隆的DNA片段的纯化、定量DNA扩增产物在药物分子种的残留等。常规检测核酸浓度的方法是吸光度法,即检测核酸在260nm ( A260 )处的光吸收,吸光度法的弊端是样本中的单链核苷酸和单体核苷酸会产生干扰信号,样品中的杂质也会影响结果。吸光法无法区分DNA和RNA, 灵敏度也相对较低(用1cm的比色杯在A260值为0.1时相对应的双链DNA浓度为5ug/ml )。
接下来给大家带来艾美捷 Lumiprobe 荧光法双链DNA检测工具—Pico488 dsDNA 定量试剂盒,Pico488是一种极为灵敏的荧光核酸染料,常用于双链DNA的定量检测。历来DNA浓度的测定在cDNA文库的构建,DNA亚克隆、PCR产物的估测等领域中具有重要意义,疫苗等生物制品中残留微量DNA的检测更是直接关系到人类的健康。
Pico488仅在与DNA双链结合后才发出荧光,且所产生的荧光与DNA浓度呈正比,在存在ssDNA、RNA和单体核苷酸的条件下,可以选择性地检测低至pg级别的dsDNA。该分析在三个数量级范围内呈线性,且几乎无序列依赖性,可以精确地测量多个来源的DNA,包括基因组DNA、病毒DNA、小量提取DNA或PCR扩增产物,可用荧光分光光度计或荧光酶标仪读数,Ex/Em=503nm/525nm。
艾美捷 Lumiprobe丨Pico488 dsDNA 定量试剂盒特色如下:
相比传统的方法,如紫外吸光法(A260)、探针杂交法、Hoechst 33258染料法等,Pico488 dsDNA 定量具有以下优势:
①灵敏度高:数量级较UV吸光读数更敏感,检测范围为:1pg/ul–5ng/ul,可节省宝贵的样品;
②特异性强:在等摩尔的RNA存在的条件下,对dsDNA具有特异性;
③耐受性好:耐受较高浓度的盐、尿素、乙醇、氯仿、去垢剂、蛋白或琼脂糖,可以直接定量PCR扩增产物而无需从反应混合物中纯化DNA;
④易于使用:只需在样品中加入染料,等待5分钟,然后读数即可,且适用于24和96孔板;与市面上的大多数荧光酶标仪和荧光计兼容;
⑤适用范围广:可适用于PCR的分析、芯片样品、DNA损伤分析、酶活性分析、基因组DNA定量以及复杂混合物中dsDNA的检测和病毒DNA定量等多种领域。
艾美捷 Lumiprobe丨Pico488 dsDNA 定量试剂盒应用领域:
测定微量的DNA残留(如疫苗生产);对DNA样品进行精确定量
好了~以上就是关于Lumiprobe丨Pico488 dsDNA 定量试剂盒的相关介绍啦~
艾美捷科技是Lumiprobe的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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AAT Bioquest丨Caspases酶底物及抑制剂方案
什么是胱天蛋白酶?
胱天蛋白酶(Caspases)是含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶,它们是为细胞凋亡的主要介质。多种受体,例如TNF-α 受体,FasL受体,TLR和死亡受体,以及Bcl-2和凋亡抑制剂(IAP)蛋白家族参与并调节该caspase依赖性凋亡途径。一旦Caspase受到上游信号(外部或内在)刺激被激活,即会参与执行下游蛋白底物的水解作用,并触发一系列事件,导致细胞分解,死亡,吞噬作用和细胞碎片的清除。
艾美捷 AAT Bioquest:
反应荧光探针和发光探针,生物素和端粒酶能够应用于标记药物小分子和生物聚合物,如蛋白、核酸以及其他碳水化合物;
荧光和发光探针用于检测蛋白,核酸和活细胞。
新型的荧光和发光探针用于检测多种酶,特别是检测水解酶和氧化还原酶类;
开发用于信号转导研究的试剂;
生理和神经探针,特别是钙离子指示剂和膜电位探针。
AAT Bioquest 人Caspases酶
人的Caspases家族基于序列相似性和生物学功能等共性主要可分为三大类:第一类由具有长胱天蛋白酶募集结构域的“炎症”胱天蛋白酶组成,他们对P4位上的较大的芳香族或疏水性残基具有亲和力。第二类由具有短的前体结构域的“细胞凋亡效应”胱天蛋白酶组成,而第三类由具有长的前提结构域的Pap位置具有亮氨酸或缬氨酸底物亲和力的“凋亡引发剂”胱天蛋白酶组成。
启动器Caspase和效应器Caspase酶
根据其在凋亡胱天蛋白酶途径中的作用,胱天蛋白酶可分为两类:启动器和效应器Caspase酶。启动器和效应器Caspas酶都具有由小亚基和大亚基组成的催化位点,Caspase酶的识别位
凋亡启动器Caspase酶,例如caspase-2,-8,-9和-10可以启动caspase激活级联反应。Caspase-8对于形成死亡诱导信号复合物(DISC)是必不可少的,并且在激活后,Caspase-8激活下游效应子Caspase(例如Caspase 3)并介导线粒体中细胞色素c的释放。Caspase-8已被证明对IETD肽序列具有相对较高的底物选择性。凋亡效应胱天蛋白酶例如Caspase-3,-6和-7虽然不负责启动级联途径,但是当被激活时,它们在级联的中间和后续步骤中起着不可或缺的作用。Caspase-3(CPP32 / apopain)是关键效应器,因为它放大了来自启动器Caspase的信号,使用对Caspase-3有选择性的DEVD肽序列对活化的Caspase-3进行检测,可以检测Caspase-3的活性。
AAT Bioquest丨Caspase酶底物和抑制剂
Caspase底物和抑制剂由两个关键成分组成:Caspase识别序列和信号产生或蛋白酶抑制基序。
Caspase的底物及其序列
多肽 氨基酸序列 对应的Caspase的种类
IETD Ile-Glu-Thr-Asp Caspase 8,颗粒酶B
DEVD Asp-Glu-Val-Asp Caspase 3、6、7、8或10
LEHD Leu-Glu-His-Asp Caspase 9
VAD Val-Ala-Asp Caspase 1、2、3、6、8、9或10
Caspase酶的显色底物
底物 Caspase 吸收(nm) 颜色 规格 货号
Ac-DEVD-pNA * CAS 189950-66-1 * 半胱天冬酶3 405 nm 黄色 5 mg 13405
Z-DEVD-pNA 半胱天冬酶3 405 nm 黄色 5 mg 13422
Z-IETD-pNA * CAS 219138-21-3 * 半胱天冬酶8,颗粒酶B 405 nm 黄色 5 mg 13413
AAT Bioquest丨Caspase的荧光底物
Caspase的荧光底物的结构包含与半胱天冬酶识别相关的荧光团,例如7-氨基-4-甲基香豆素(AMC),7-氨基-4-三氟甲基香豆素(AFC), Rhodamine 110(R110)或ProRed?620。R110的Caspase底物比基于香豆素的Caspase底物(例如AMC和AFC)更敏感,但由于两步裂解过程,其动态范围更窄。 建议将R110标记的Caspase底物用于终点法测定,而将AMC和AFC标记的 Caspase底物用于动力学测定。
以上就是艾美捷 AAT Bioquest丨Caspases酶系列底物及抑制剂的相关介绍啦
艾美捷科技是AAT Bioquest的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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Cell Biolabs 检测试剂盒三部曲集合
一、如何分析样本中氧自由基抗氧化能力/氧自由基吸收能力(ORAC)?艾美捷Cell Biolabs丨氧自由基抗氧化能力(ORAC)检测试剂盒方案来了,检测原理如下:
ORAC分析法中的自由基主要来源于偶氮化合物2,2'-偶氮-双-(2-眯基丙烷)氯化二氢(2,2'-azobis(2-amidinopropane)dihydrochloride,AAPH)热分解产生的过氧化氢自由基,也可以是芬顿(Fenton)反应过程中产生的羟自由基,以荧光素钠(Sodium Flourescein,FL)为荧光探针,观察自由基与荧光探针作用后,探针荧光强度的衰退过程,以水溶性维生素E类似物(Trolox)作为抗氧化标准物质,检测体系中各种抗氧化剂延缓探针荧光强度衰退的能力,以此评价抗氧化剂的抗氧化能力。
特点:
1 简单快捷:不到2小时完成实验;
2 样本适用:多样性
3 提供标准品
二、如何检测His标签蛋白?艾美捷Cell Biolabs:His标签蛋白ELSIA检测试剂盒方案来了,检测原理如下:
将含有His标签的样品或含有His标签的重组蛋白标准品添加到已经包被好多组氨酸的微孔板上。短暂孵育后,加入抗 6xHis单克隆抗体,然后加入HRP偶联的二抗。未知样品中的His标签蛋白含量是通过与由预先确定的His标签蛋白标准品制备的标准曲线进行比较来确定的。
三、如何选择彗星分析试剂盒?艾美捷 Comet Assay Kits 彗星分析试剂盒说明书又来了,检测原理如下:
Cell Biolabs 的 OxiSelect™ Comet Assay 是一种单细胞凝胶电泳法 (SCGE),用于简单评估细胞 DNA 损伤。首先,将单个细胞与低熔点琼脂混合后,再应用到OxiSelect™ Comet特制玻片上。然后,用裂解缓冲液和碱性溶液处理这些嵌入的细胞,使DNA松弛并变性。最后,在电泳槽中对进行电泳,以分离完整的DNA和受损的片段。电泳后,样品被干燥,用DNA染料染色,并通过外显荧光显微镜可视化。在这些条件下,受损的DNA(包含裂解和链断裂)将比完整的DNA迁移更多,并产生 "彗星尾 "形状。
彗星实验原理与流程示意图
好了,以上就是艾美捷Cell Biolabs三部曲,每一部都是小艾精心整理的,欢迎大家观看!
艾美捷科技是Cell Biolabs的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。