来宝网 2021/11/24点击1200次
提到标记细胞骨架中肌动蛋白（F-Actin），大家肯定首先都会想到著名的鬼笔环肽染料，鬼笔环肽（Phalloidin）是从毒蕈类鬼笔鹅膏中得到的有毒环状七肽，能选择性的与动植物体内的肌动蛋白结合，且只跟聚合的微丝结合，而不跟单体的肌动蛋白结合，使鬼笔环肽荧光偶联物成为研究细胞内肌动蛋白微丝的神器。（Rhodamine Phalloidin：PHDR1）
但是鬼笔环肽只能标记固定的死细胞Actin，有没有能够标记活细胞的Actin并且能够展示出活细胞内Actin动态变化过程的染料了？答案是肯定的，接下来给大家带来了一款新型的、独特的活细胞荧光Actin探针——艾美捷 Cytoskeleton丨SPY650-FastAct，它可以被用于标记F-Actin的动态过程。
SIR-Actin (CY-SC001, 左) 和SPY650-FastAct（CY-SC505，右）染色对比
艾美捷 Cytoskeleton丨SPY650-FastAct 是一种明亮、荧光强度高、无毒、细胞通透性高和特异性高的活细胞Actin荧光探针，它不需要任何转染步骤，只需将探针添加到细胞中，就可以在几个小时后对细胞进行成像。
SPY650-FastAct, SPY555-Tubulin和SPY505-DNA共同染色的细胞
艾美捷 Cytoskeleton丨SPY650-FastAct 是一种基于SPYTM系列染料的高亮度、远红色、无毒的F-Actin染料，它可以特异性的以很低的背景标记到F-Actin上，SPY650 FastAct独特和无与伦比的性能使它能够快速标记到动态的肌动蛋白上，SPY650 FastAct基于高亮度、耐光漂白和远红外的SPY650荧光团，使它的性能远优于荧光蛋白。
SPY650 FastAct特点：
激发波长（Ex） 652 nm
发射波长（Em） 674 nm
探针数量 100次染色
荧光寿命 3.0 ns
STED耗尽波长 775nm
贮存温度 -20°C
运输温度 室温
艾美捷 Cytoskeleton丨SPY650-FastAct 优势：
样本类型广：活细胞以及PFA固定的细胞/组织
操作简便：不需要任何基因操作、转染或荧光蛋白的过表达即可标记活细胞的Actin
荧光亮度高、耐光漂白
可跟其他荧光共染：SPY505、SPY555、SPY595、SPY700、GFP或M-cherry共染
可适用于多种类型显微镜：宽视野、共聚焦、SIM或STED
艾美捷科技是Cytoskeleton的中国代理商，为科研工作者提供优质的SPY650-FastAct 。
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Cytoskeleton丨GEF活性检测试剂盒详情解析
小G蛋白的共同特点是，当结合了GTP时即成为活化形式，这时可作用于下游分子使之活化，而当GTP水解成为GDP时（自身为GTP酶）则恢复到非活化状态（分子开关），正常情况下，在细胞中，小G蛋白会在跟GDP结合的“关闭状态”和 GTP 结合的“开启状态”之间循环，这种循环过程主要由细胞内的小G蛋白调节因子来控制，胞内小G蛋白调节因子主要有两类：一类是可以增强小G蛋白的活性的鸟苷酸交换因子（guanine nucleotide exchange factor, GEF），另一类是可以降低小G蛋白活性的GTP酶活化蛋白（GTPase activating protein, GAP）。
接下来就主要来聊一聊小G蛋白活性增强剂——鸟苷酸交换因子（GEF），GEF 是通过催化其目标 GTPase上的核苷酸交换来发挥作用，GEF与核苷酸结合的 GTPase 结合，这会导致结合的核苷酸被释放，从而产生不含核苷酸的GEF-GTPase 反应中间体。这种不含核苷酸的复合物随后将结合新的核苷酸，然后GEF再从GTPase 中释放出来。
由于GEFs对GDP-GTPases的亲和力高于对相应GTP-GTPases的亲和力，在正常细胞中GTP和GDP比率约为10:1，GEFs将推动从GDP-GTPases到GTP-GTPases的转换。
艾美捷 Cytoskeleton 丨GEF活性检测试剂盒，是一款基于荧光法的检测GTP酶上的核苷酸转换的试剂盒，可适用于常规的96孔格式或高通量384孔格式。
Cytoskeleton丨GEF活性检测试剂盒组成部分：
1.Exchange Buffer
2.His标签 Cdc42蛋白
3.His标签 Rac1 蛋白
4.His标签 RhoA 蛋白
5.His标签 hDbs 蛋白（作为 Cdc42 和 RhoA 的GEF的阳性对照 ）
6.黑色384孔板
7.黑色96孔板
艾美捷 Cytoskeleton丨GEF活性检测试剂盒检测原理：
通过检测荧光核苷酸类似物 N-甲基邻氨基苯甲酰-GTP（mant-GTP）对 GTPase 的结合情况来检测GEF的活性的。一旦mant-GTP与 GTPase 结合， mant-GTP的荧光强度（Ex：360 nm，Em：440 nm）显著增加，通过检测游离的mant-GTP和GTPase 结合的 mant-GTP 之间的荧光值差异，即可检测样本中GEF的活性。
艾美捷 Cytoskeleton丨GEF活性检测试剂盒的主要用途和应用:
测定未知GEFs活性；
小GTPases及其相关GEFs的生化特性表征；
研究不同辅助因子或蛋白结构域对GEF活性的调控；
筛选GEFs或GTPases突变蛋白的活性和底物特异性；
HTS(高通量筛选)筛选鉴定GEF抑制剂。
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Cytoskeleton丨艾美捷 Cytoskeleton丨细胞骨架研究丨纯化蛋白和便捷试剂盒开发
Cytoskeleton简介：
Cytoskeleton公司成立于1993年，专注于生物化学和细胞过程研究中的纯化蛋白和便捷试剂盒开发与生产。公司提供药物筛选、信号转导、蛋白质转录后修饰（PTM）、细胞骨架研究相关的系列试剂盒和产品，尤其以细胞骨架相关研究见长，既能满足于样品较少的科学研究，也可以用于小规模筛选研究和高通量大规模筛选研究。此外，公司还提供微管蛋白，肌动蛋白，小G蛋白，GAPs，GEFs等现有产品的药物筛选服务。
作为Cytoskeleton在中国的区域总代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供quan面的Cytoskeleton产品与服务。下图为Cytoskeleton公司授权艾美捷科技有限公司（AmyJet Scientific Inc.）作为Cytoskeleton在中国区域的代理授权书。
Cytoskeleton公司目前主要的产品有340余种，其产品主要覆盖肌动蛋白，微管蛋白，马达蛋白，小G蛋白，细胞外基质，活细胞成像等相关领域，提供对应的蛋白质，抗体，检测与分析试剂盒，并且产品线还在不断的扩大中。
艾美捷科技是Cytoskeleton的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
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AAT Bioquest丨iFluor WGA偶联物系列染料方案来了~
质膜是一种薄的半透膜，它将所有细胞的内部和细胞外环境隔开， 它由磷脂双分子层组成的，整个磷脂双分子层被蛋白质所包围，如离子通道、载体蛋白和受体蛋白，这些蛋白质负责形成特定的膜。它为所有细胞提供结构支持和保护，负责维持离子稳态，是细胞粘附、细胞间通讯、离子电导率和细胞信号通路的组成部分。在细胞研究中，我们经常需要用到探针来标记细胞膜，今天给大家带来一款强大的细胞膜标记工具——小麦胚芽凝集素 (WGA)。
小麦胚芽凝集素 (WGA) 是一种36kDa的凝集素，广泛用于细胞生物学，由于它可与细胞膜上的N-乙酰基-β-D-葡糖胺基残基和N-乙酰基-β-D-葡糖胺低聚物偶联的特性，通常用于标记哺乳动物细胞、革兰氏阳性菌和酵母的细胞膜，以及骨骼和心脏骶膜等。
介绍一下这里的iFluor系列染料——艾美捷 AAT Bioquest所开发的，可很好的替代Alexa Fluor染料的一类荧光团，当iFluor 染料与WGA偶联时，荧光WGA偶联物表现出非常好的亮度、光稳定性和水溶性，优于Alexa Fluor WGA 偶联物和其他相似光谱的荧光WGA偶联物，iFluor 标记的WGA适用于免疫分析、IHC、ELISA 和蛋白质印迹等。
艾美捷 AAT Bioquest丨iFluor WGA偶联物的主要特性:
具有高信噪比，抗光漂白和 抗pH变化
偶联物可标记未透化的活细胞和固定细胞
可固定和透化
可作为神经元定位研究的顺行或逆行神经元示踪剂
有多种颜色可供选择，以支持与其他荧光偶联物或蛋白质的多重和共定位研究
艾美捷 AAT Bioquest丨iFluor WGA偶联物（用于活细胞和固定细胞）
名称 膜渗透性 Ex/Em (nm) 滤光片 规格 cat#
iFluor 488-WGA偶联物 非膜渗透性 491/516 FITC 1 mg 25530
iFluor 555-WGA偶联物 非膜渗透性 557/570 Cy3/TRITC 1 mg 25539
iFluor 594-WGA偶联物 非膜渗透性 588/604 Texas Red 1 mg 25550
iFluor 647-WGA偶联物 非膜渗透性 656/670 Cy5 1 mg 25559
艾美捷 AAT Bioquest丨Alexa Fluor WGA偶联物（用于活细胞和固定细胞）
名称 膜渗透性 Ex/Em (nm) 滤光片 规格 cat#
XFD488-WGA偶联物 非膜渗透性 499/520 FITC 1 mg 25500
XFD594-WGA偶联物 非膜渗透性 590/618 Texas Red 1 mg 25509
以上，就是艾美捷 AAT Bioquest丨iFluor系列染料的介绍啦~
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AAT Bioquest自研升级版脂质染色工具解决方案
在病理检验中，脂类染色法最常用于证明脂肪变性，脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂滴（Lipid Droplet）是中性脂（主要有脂酰甘油和酯化胆固醇）的主要贮存场所，是脂肪细胞的主要成分，占据脂肪细胞的大部分空间。正常情况下，除脂肪细胞以外的其他细胞内一般不见或仅能看到微量脂滴。但病理情况下，这些细胞中可能出现脂滴或者脂滴明显增多，通过脂肪染色能将这些脂滴清晰的显现出来。比如，心、肝、肾等实质器官发生脂肪变性，胞浆内出现大小不一的空泡，可用脂肪染色来区分是脂肪变性还是水性变性或糖原贮存等。
用苏丹染料进行脂类染色，多用用冰冻或石蜡切片，以水溶性封固剂封固，如甘油明胶和阿拉伯糖胶等，在免疫组化研究中应用较多。
苏丹染料主要针对于组织切片的脂质染色，同时灵敏度也较低，且存在操作过程中试剂挥发过多，易形成背景沉淀，无法兼容活细胞等局限。
鉴于脂质化学染料有上述诸多弊端，接下来给大家带来两款优质的艾美捷 AAT Bioquest丨脂质荧光染料：
AAT Bioquest丨尼罗红（Nile Red）（cat#：22190），尼罗红是一种亲脂性荧光染色剂，它是一类环境敏感性荧光染料，能够在富含脂质的环境中产生强烈的荧光，而在水性介质中的荧光强度极小，这种特性使得它成为了一款极重要检测细胞内脂滴的荧光指示剂，可以通过荧光显微镜和流式细胞检测结果。
除了广泛使用的尼罗红，还有AAT Bioquest自研的升级版脂质染色工具： Nile Green（cat#：22730）和Droplite Red（cat#：22735）， 跟尼罗红性质类似，它们也是在富含脂质的环境中具有强烈荧光的，而在水性介质中具有最小的荧光。可用荧光显微镜，流式细胞术或荧光微孔板阅读器检测细胞内脂液滴，是一类优异的活细胞脂质染料。 其中Nile Green仅染色细胞内脂液滴，具有绿色荧光，它可以与其他荧光染料一起使用，用于多重染色，弥补了尼罗红染色的缺陷。
AAT Bioquest Inc. 致力于光谱学检测领域，包括吸收（颜色），荧光和发光技术。艾美捷科技是AAT Bioquest的中国代理商，为科研工作者提供优质的脂质染色工具。
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Columbia Biosciences丨中国区授权代理商丨艾美捷科技
Columbia Biosciences简介：
Columbia Biosciences 30年来致力于开发和生产荧光蛋白，标记抗体和新型蛋白质纯化配体。此外，我们全面的定制服务包括抗体标记、蛋白质纯化和发现服务，例如用于肿瘤学和免疫学临床前药物开发的基于功能性细胞的检测。Columbia Biosciences 由一支经验丰富的免疫学家、生物学家和化学家组成，他们拥有超过 30 年的行业经验，他们以接受挑战而自豪——寻找问题的解决方案。我们的专长在于培养藻类、提取和纯化染料以及将这些和其他荧光团与抗体结合。
Columbia Biosciences产品线分类：
1、SureLight系列荧光染料：488, APC, PerCP, BPE, PE-594, PE-CY5, PE-Cy5.5, PE-Cy7, PerCP-Cy5.5, RPC, RPE
2、一抗：6His, C-MYC, GST, HA, V5, T7,Flag, DDDDK, S Tag, EP2, EP4, AP, HRP
3、二抗：抗鸡，抗山羊，抗人，抗小鼠，抗大鼠，抗兔，抗羊驼
4、同型对照：小鼠IgG1，小鼠IgG2A，兔IgG
5、链霉亲和素偶联物：酶，荧光，镧系元素Eu偶联物, Streptavidin: Eu-W1024
6、生物素偶联物：Biotin偶联的二抗
7、试剂盒：FRET（荧光共振能量转移）试剂盒，偶联标记试剂盒，细胞活力试剂盒
作为Columbia Biosciences在中国的区域总代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供Columbia Biosciences优质的产品与服务。下图为Columbia Biosciences公司授权艾美捷科技有限公司（AmyJet Scientific Inc.）作为Columbia Biosciences在中国区域的代理授权书:
艾美捷 Columbia Biosciences 部分畅销产品：
货号 名称
00-1711-100 Mouse Anti-6His IgG: unconjugated
D11-010 Sulfo-SMCC activated SureLight Peridinin-Chlorophyll Protein Complex
D17-1310 Goat Anti-GST IgG: Eu-W1024
D17-1711 Mouse Anti-6His IgG: Eu-W1024
D17-2212 Streptavidin: Eu-W1024
D3-000 SureLight Allophycocyanin (APC)
D3-010 Sulfo-SMCC activated SureLight Allophycocyanin (APC)
D3-110 Goat Anti-Human IgG: SureLight APC
D3-1711 Mouse Anti-6His IgG: SureLight APC
D3-1714 Mouse Anti-C-MYC IgG:SureLight APC
D3-1718 Mouse Anti-DYKDDDDK IgG: SureLight APC
D3-2212 Streptavidin: SureLight APC
艾美捷科技是Columbia Biosciences的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
