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土壤的成分包括矿物质、粘土等无机物、植物及植物的遗体、腐殖物质等土壤有机物以及在土壤中存在的微生物。

提取的难点：

从土壤中提取的DNA，是微生物、动植物遗体等的总DNA，同时，腐殖物质的性质与DNA很相似，DNA提取过程中会将腐殖等物质一起纯化，采用传统的DNA提取方法来除去腐殖物质等抑制因子是十分困难的。而这些腐殖物质会抑制聚合酶链式反应（PCR）及限制性酶切等。因而，从土壤中提取DNA，腐殖物质等抑制因子的除去干净是重中之重。某公司根据腐殖物质等特点，发明了高效的腐殖酸吸附剂，再与硅胶柱纯化的技术结合，开发出了高效土壤DNA提取试剂盒（SoilDNAKit），已为广大客户所采用，完全能够替代价格昂贵的进口产品。

原理与操作：

土壤样品加入悬浮缓冲液Buffer C1，并加入玻璃珠与专利的腐殖酸吸附剂Buffer C2，涡旋使土壤充分重悬，腐殖物质充分释放，让吸附剂有效吸附腐殖酸。再加入高效的裂解液Buffer C3并涡旋在玻璃珠的摩擦作用下，裂解土壤中的所有生物包括G+细菌、酵母菌、真菌、藻类、线虫甚至真细菌的孢子、芽孢、动植物遗体等，游离DNA。之后，再加入沉淀剂Buffer C4，离心沉淀除去土壤残渣、吸附有腐殖酸的吸附剂、多糖多酚、绝大部分的色素等，获得清亮的、含有DNA的上清，上清加入异丙醇沉淀获得DNA粗品。粗品中加入ddH2O溶解后，再加入Buffer C5离心进一步除去腐殖酸等杂质，获得上清，往上清加入乙醇后转移到硅胶纯化柱中过柱吸附DNA，除去杂质。再加入漂洗液Buffer WB离心进一步除去蛋白质、腐殖酸等杂质，加入漂洗液DNA Wash Buffer除去盐分等。干燥柱子后加入灭菌去离子水后，离心获得高纯的DNA。

艾美捷土壤DNA提取试剂盒样品使用量与DNA产出数据参考：

土壤最大上样量：250mg

处理的土壤类型：所有土壤类型

纯化柱最大结合载量：50 ug

纯化柱-最大液体输入体积：650 uL

10个样品的纯化时间：30 minutes

64000土壤DNA提取试剂盒测试：

用Real-time PCR来确认提取的DNA是否有高质量。使用Norgen的土壤DNA提取试剂盒（货号：64000）和Competitor M的试剂盒，从250mg粘土（含有低腐殖酸）和表层土壤（含有高腐殖酸）样品中分离出土壤DNA。使用4 µL土壤DNA（总PCR反应体积为20 µL）进行Real-time PCR，检测来自不同土壤样品的16s rDNA。与Competitor M的样品（绿线）相比，Norgen的DNA样品（红线）的较早的Ct值表明下游应用的土壤DNA质量更高。

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Mabtech代理，Mabtech授权代理商——艾美捷科技

Mabtech公司成立于1986年，最初源自瑞典斯德哥尔摩大学免疫学系，目前已成为ELISpot和T细胞检测技术的全 球领先者。ELISPO是当今最灵敏和最简便的特异性T细胞应答分析技术之一，是探讨感染、癌症、过敏和自身免疫性疾病等诸多病症中T细胞功能最为理想的 研究手段。

因其具有结果直观和适于高通量检测等优点，业已成为新疫苗实验研究和临床评价的标准方法。作为ELISpot产品的补充，Mabtech公司推出了一系列即用型细胞因子ELISA试剂盒，可以方便、准确地检测血清和血浆等多种样品中的细胞因子水平。Mabtech公司以卓尔不群的创新能力和稳定可靠的产品质量，不断开发出适应前沿科学研究和临床大规模筛选需求的优质产品。

Mabtech公司依靠一支 精干和敬业的团队，为用户提供最好的产品和最佳的技术服务。除位于斯德哥尔摩的公司总部和研究实验室，Mabtech公司在澳大利亚、法国、德国和美国均 设有办事处，与全球高端科研机构保持紧密的合作并为全球用户提供快捷的物流。Mabtech公司提供多种高品质的ELISA和ELISpot试剂盒，用于检测多种种属细胞因子和相关的免疫效应分子。Mabtech公司的抗体也可单独包装，供用户进行流式细胞术和免疫细胞化学等实验研究。

Mabtech代理商艾美捷科技有限公司作为一家具有尖端的技术实力、一流的经营管理水平和完善的市场销售体系的生物高科技企业，武汉艾美捷科技有限公司一直努力为中国客户提供全球最具性价比的生命科学及药物筛选技术和产品。

1、更具品质保障的Mabtech产品和技术方案（Mabtech作为ELISpot、FluoroSpot和ELISA等免疫学相关研究的领导者，为中国客户提供完整的高品质免疫学研究产品方案）；

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