来宝网 2021/8/9点击1048次
土壤中的微生物资源非常丰富,但用传统技术培养的微生物仅占微生物总数的0.01%~10%,且大部分微生物处于不可培养的状态,使相当多的菌种不能被充分地开发和利用。从土壤中提取的DNA,是微生物、动植物遗体等的总DNA。
由于土壤微生物成分复杂,常规提取总DNA的方法难以去除腐殖酸,而腐殖酸会抑制聚合酶链式反应(PCR)扩增中的TaqDNA聚合酶以及酶切反应的限制性内切酶活性。另外,土壤质地和成分的差异也会影响土壤微生物DNA的提取效果。因而,从土壤中提取DNA,腐殖物质等抑制因子的去除就成为了重中之重。
如何从土壤样本中提取纯化DNA?Norgen土壤DNA分离试剂盒为从土壤样本中检测微生物提供了一种方便、快速的方法。所有类型的土壤样品均可使用该工具包进行处理,包括普通土壤样品和腐殖酸含量高的难处理土壤样品,如堆肥和粪便。该试剂盒使用提供的OSR(有机物去除)溶液去除所有微量腐殖酸和PCR抑制剂。然后使用一种简单快速的旋转柱程序进一步纯化DNA。总基因组DNA可以从土壤中发现的各种微生物中分离和纯化,如细菌、真菌和藻类。纯化的DNA质量最高,与下游PCR应用完全兼容,因为在分离过程中去除了所有腐殖酸物质和PCR抑制剂。
该土壤DNA分离试剂盒具有以下特点:
1.快速简便的土壤样品中微生物检测方法;
2.处理所有土壤类型,包括常见的土壤样品和腐植酸含量高的难处理的土壤样品,如堆肥和粪肥;
3.使用OSR(Organic Substance Removal)溶液去除有机物质;
4.从DNA样本中去除所有腐殖酸;
5.使用快速离心柱形式进行快速简便的处理;
6.从包括细菌、真菌和藻类在内的各种微生物中分离出高质量的总DNA;
7.纯化的DNA质量很高,完全兼容下游PCR应用,因为在分离过程中去除了腐殖酸物质和PCR抑制剂。
从表层土壤和粘土样品中分离出的DNA浓度比较。Norgen土壤DNA提取试剂盒和 Competitor M的试剂盒用于从250 mg表层土壤和粘土样品中分离 DNA。与竞品相比,Norgen试剂盒显示两种样品的DNA浓度更高。
土壤DNA提取试剂盒操作流程图
土壤DNA提取试剂盒(#64000)精彩文章鉴赏:
1.Bioremediation of high organic load lagoon sediments: compost addition and priming effects. Chemosphere. 2013.
2.Insertion/deletion-based approach for the detection of Escherichia coli O157:H7 in freshwater environments.Environmental Science & Technology.2014
Norgen Biotek成立于1998年,是一家著名全球化生物技术公司,其生产基于砖利技术的核酸和蛋白质纯化及富集产品用于研究和诊断。艾美捷科技是Norgen的中国代理商,为您提供优质的土壤DNA分离试剂盒。
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细胞吞噬分析试剂盒的工作原理
细胞吞噬是一种需要信号触发的过程。被吞噬的颗粒必须同吞噬细胞的表面结合, 但并不是能结合的颗粒都能够被吞噬。吞噬细胞表面有特化的受体, 被激活的受体向细胞内传递吞噬信号,随后会在颗粒周围形成肌动蛋白富集的膜突触,伴随着膜突触的两端融合,开始形成由膜包裹的吞噬小体(phagosome), 紧接着吞噬小体通过进一步的融合形成成熟的异噬性的溶酶体, 在异噬性的溶酶体中吞噬物被酶水解。水解后, 那些可溶性小分子可通过溶酶体膜进入胞质溶胶, 为细胞再利用或成为废物被排出。其中有一些病原体分子会被作为抗原提呈到细胞表面,以诱导必要的免疫应答。
Cell Biolabs细胞吞噬分析试剂盒,通过检测吞噬细胞对底物的吞噬实现体外吞噬能力的检测,底物包括红细胞、大肠杆菌和酵母聚糖颗粒,为筛选 TLR 配体、吞噬作用激活剂或抑制剂提供了强大的系统。
1、96孔板细胞吞噬分析试剂盒(红血球细胞底物)
在FcR介导的细胞吞噬作用中,红血球细胞在被吞噬前,首先被IgG调理成对吞噬作用易感,吞噬发生后,将胞外未被吞噬的红血球细胞清除掉,然后将吞噬细胞裂解后,用专利红细胞底物进行检测,以判定细胞的吞噬能力。*适用于贴壁吞噬细胞和悬浮吞噬细胞的检测。
实验原理流程图:
2、96孔板细胞吞噬分析试剂盒(大肠杆菌)
以酶标大肠杆菌颗粒作为吞噬病原体,吞噬发生后,将胞外大肠杆菌颗粒进行封闭,清除,然后对吞噬的大肠杆菌颗粒进行比色检测,以判定细胞的吞噬能力。*适用于贴壁吞噬细胞和悬浮吞噬细胞的检测。
实验原理流程图:
3、96孔板细胞吞噬分析试剂盒(酵母聚糖底物)
以预先标记好的酵母聚糖颗粒作为吞噬病原体,吞噬发生后,将胞外酵母聚糖颗粒进行封闭,清除,然后对吞噬的酵母聚糖颗粒进行比色检测,以判定细胞的吞噬能力。*只适用于贴壁吞噬细胞的检测
实验原理流程图:
同上图
Cell Biolabs作为细胞学分析检测试剂盒生产商,为生物技术和研究类客户提供基于细胞功能研究以及疾病等方面的产品和技术服务。主要涵盖细胞研究、细胞信号通路和蛋白质生物学、代谢研究、病原体和毒素、干细胞研究等领域。艾美捷科技是Cell Biolabs的中国代理商,为您提供优质的细胞吞噬分析试剂盒。
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新型肿瘤细胞分离试剂盒实验原理
癌症患者及动物肿瘤模型的肿瘤活检标本常常含有异质的细胞群,包括正常组织、血液和癌细胞。目前肿瘤研究的主要瓶颈还停留在“从肿瘤组织中纯化出高纯度的肿瘤细胞”。
目前实验室里主要采用显微切割技术与密度梯度离心法纯化肿瘤细胞,但这样的效果往往不是很理想,总是存在肿瘤细胞不纯、分离效率较低、分离后肿瘤细胞状态差等缺点。目前,也有采用流式细胞仪进行肿瘤细胞分离的,但是成本较高。
Cell Biolabs新型肿瘤细胞分离试剂盒,操作简便且性价比高,无需特殊的技能,也无需昂贵的仪器,轻松分离克隆性肿瘤细胞。
许多实体瘤包含正常细胞和癌细胞的异质群体。这些细胞群的分离是准确评估正常细胞与肿瘤细胞之间真正的基因型和表型差异的关键。我们的CytoSelect克隆性肿瘤细胞分离试剂盒使用专有的半固体琼脂培养基来促进实体瘤细胞形成菌落。菌落在6孔板或35mm培养皿中生长。通过大小过滤将这些菌落从单个(即正常)细胞中分离出来。来自这些菌落的活细胞可以很容易地回收用于进一步分析。
克隆性肿瘤细胞分离试剂盒实验原理:
大多数实体瘤细胞均能在软琼脂上生长并形成克隆,利用该原理,可以将少量的肿瘤细胞从大多数非恶性细胞内分离出来。该克隆性肿瘤细胞分离试剂盒首先对实体瘤进行消化获得单个细胞,然后将细胞置于半固体软琼脂中培养6-8天,待形成克隆后,使用细胞筛获得肿瘤单细胞,以达到有效分离肿瘤细胞的克隆和不能形成克隆的单细胞。另外,由于肿瘤干细胞具有相似的特征,因此该肿瘤细胞分离试剂盒除了能用于实体瘤细胞的分析,也可以应用于肿瘤干细胞的分离。
实验流程图:
实验结果图:
克隆形成、分离和重新铺板:小鼠肺肿瘤被切除、切碎和消化后,按照500,000个细胞/孔接种到琼脂基质悬浮液中。图A显示了培养7天后的克隆集落形成(红色箭头显示集落,黑色箭头显示单细胞)。图B显示获得的克隆集落(单个细胞已被去除)。图C展示了培养3天后重新铺板的克隆集落(没有预先进行胰蛋白酶消化)。图D展示了培养1天后重新铺板的克隆形成菌落(在铺板前对菌落进行胰蛋白酶消化/滴定以产生单细胞悬浮液)。
Cell Biolabs作为细胞学分析检测试剂盒生产商,为生物技术和研究类客户提供基于细胞功能研究以及疾病等方面的产品和技术服务。主要涵盖细胞研究、细胞信号通路和蛋白质生物学、代谢研究、病原体和毒素、干细胞研究等领域。艾美捷科技是Cell Biolabs的中国代理商,为您提供优质的肿瘤细胞分离试剂盒。