来宝网 2021/7/13点击879次
血浆/血清游离RNA或外泌体RNA是某些癌症和疾病的潜在生物标志物。如何从收集与保存的血浆和血清样本中分离出RNA(cf-RNA)呢?艾美捷慢慢道来...
血浆游离RNA提取试剂盒(cat#55000)
从不同体积的血浆中纯化cf-RNA。该血浆由EDTA收集的血液中制备而来。然后将3ul纯化的RNA用作RT-qPCR反应中的模板,以检测miR-21(图A)和5S rRNA转录物(图B)。miR-21和5S rRNA转录物的相对含量随着样上样量的增加而线性增加。
将纯化的cf-RNA洗脱至不同的体积。然后将3ul纯化的RNA用作RT-qPCR反应中的模板,以检测miR-21。随着洗脱体积的增加,miR-21的相对量增加,表明在非常低的洗脱体积中血浆cf-RNA仍然有比较好的有效浓度。
血浆/血清RNA提取试剂盒各品牌横向对比
血浆中miRNA有效性和一致性检测。Norgen试剂盒与Q、A、E试剂盒从血浆中分离miRNA。使用miR-21特异的引物进行茎环RT-qPCR。与其他分离方法相比,只有Norgen试剂盒能够显示miR-21转录本高一致性和回收率的产品。使用Norgen试剂盒从200μL血浆中回收miRNA高于使用竞争对手A试剂盒从600μL纯化的RNA中回收的miRNA。
艾美捷血浆游离RNA提取试剂盒的特色与优势:
1.分离所有大小的游离和外泌体RNA,包括microRNA;
2.多种血浆和血清输入量(50µL-5mL);
3.没有苯酚提取物;
4.没有载体RNA;
5.结合并洗脱所有RNA,无论大小或GC含量如何,无偏差
6.将游离的RNA和外泌体RNA浓缩至灵活的洗脱体积;
7.短时间内纯化高质量的RNA。
8.纯化的血浆/血清RNA可用于很多下游应用,包括PCR,qPCR,甲基化敏感的逆转录qPCR,逆转录PCR,RNA印迹,RNA酶保护和引物延伸,表达阵列测定和NGS。
文献参考:
1.MicroRNA molecular profiling from matched tumor and bio-fluids in bladder cancer.Molecular Cancer. 2015.
2.Serum microRNA-34a is potential biomarker for inflammation in nonalcoholic fatty liver disease.Asian Biomedicine. 2016.
3.Circulating MicroRNAs: Association with Lung Function in Asthma.PLOS ONE. 2016.
4.Circulating nucleic acids damage DNA of healthy cells by integrating into their genomes.Journal of Biosciences. 2015.
Norgen Biotek成立于1998年,公司总部位于加拿大,是一家著名全球化生物技术公司,生产基于专利技术的核酸和蛋白质纯化及富集产品用于研究和诊断。目前该公司的产品多达700余种,提供一流的样品制备试剂盒,应用于基因组和蛋白组等不同的领域。艾美捷科技是Norgen的中国总代理商,为您提供优质的产品+服务。
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罗丹明标记鬼笔环肽——快问快答
作为一种实验室工具,鬼笔环肽的用途已被证实,并在于它抑制微丝去聚合的能力。因此,鬼笔环肽稳定的微丝被用作鉴定和表征不断增加的微丝相关蛋白的底物。此外,罗丹明鬼笔环肽可用于染色细胞中的肌动蛋白细胞骨架,也可作为用于运动测定的微丝的荧光标记物/稳定剂。罗丹明鬼笔环肽以冻干粉形式提供。当用500µl甲醇重新配制时,其浓度为14µM(200 x储备)。
Figure 1. A Swiss 3T3 fibroblast stained with rhodamine phalloidin (PHDR1).
罗丹明标记鬼笔环肽用途包括:
1.固定细胞染色F-肌动蛋白
2.体外稳定肌动蛋白丝
3.肌动蛋白丝的体外可视化
名称 | 罗丹明标记鬼笔环肽 |
Cat# | |
纯度 | 色谱纯度>99% |
生物活性 | 微丝稳定性能等同于或优于任何其他环肽。在70nm的phalloidin中,微丝在室温下稳定一周以上。 |
保存建议 | 推荐常温运输,建议保存于4°C。 |
关于罗丹明标记鬼笔环肽的两个问题:
1.能用荧光标记的phalloidin染色活细胞中的F-肌动蛋白吗?
没有,鬼笔环蛋白不能用来染色活细胞中的F-肌动蛋白。Phalloidins用于固定细胞中的F-肌动蛋白染色。荧光鬼笔蛋白只结合到F-肌动蛋白的天然四级结构,这提供了一个低背景。phalloidin结合的正确固定条件是PBS中3.7%(v/v)多聚甲醛10min,因为它保留了phalloidin高亲和力结合所必需的四级蛋白质结构。甲醇固定破坏了天然构象,因此不适用于F-肌动蛋白与phalloidin染色。为了监测活细胞中肌动蛋白的动态,微量注射罗丹明标记的肌动蛋白(Cat.)建议使用APHR或AR05)。
2.荧光标记的phalloidin中哪一个最稳定/最亮?
Acti染色最亮、最稳定的是Acti染色488(绿色荧光)。
Cytoskeleton公司成立于1993年,专注于生物化学和细胞过程研究中的纯化蛋白和便捷试剂盒开发与生产。公司提供药物筛选、信号转导、蛋白质转录后修饰(PTM)、细胞骨架研究相关的系列试剂盒和产品,尤其以细胞骨架相关研究见长,既能满足于样品较少的科学研究,也可以用于小规模筛选研究和高通量大规模筛选研究。艾美捷科技是Cytoskeleton的中国总代理商,为您提供优质的罗丹明标记鬼笔环肽。
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【FGF 2】重组人碱性成纤维细胞生长因子说明书
碱性成纤维细胞生长因子是成纤维细胞生长因子(FGF)家族的一员。FGF家族成员具有广泛的有丝分裂和细胞存活活性,参与了胚胎发育、细胞生长、形态发生、组织修复、肿瘤生长和侵袭等多种生物学过程。该蛋白可作为内皮细胞迁移和增殖的修饰物,同时也是血管生成因子。它在体外作为多种中胚层和神经外胚层衍生细胞的有丝分裂原,因此被认为参与了器官发生。描述了编码不同亚型的三种可选拼接变体。HPR结合生长因子是体内血管生成因子,是多种细胞类型体外的强有丝分裂原。这两种生长因子在组织分布和浓度上存在差异。
名称 | 【FGF 2】重组人碱性成纤维细胞生长因子 |
Cat# | |
描述 | 成纤维细胞生长因子2人重组蛋白(FGF-2)是一种单、非糖基化、含有154个氨基酸的多肽链,分子质量为17.2kDa。 |
说明 | 在大肠杆菌中产生的成纤维细胞生长因子-2重组人(FGF-2)是一个单一的、非糖基化的多肽链,含有154个氨基酸,分子量为17.2kDa。 FGF-b通过专有色谱技术纯化。 |
来源 | 大肠杆菌 |
外表 | 无菌过滤白色冻干(冻干)粉。 |
配方 | 用20mmTris-HCl、pH7.4和1M NaCl中的浓缩溶液(1mg/ml)冻干蛋白质。 |
用法 | 仅供实验室研究使用。不得作为药品、农产品、农药、食品添加剂和日用化学品使用。 |
保存建议 | 人碱性成纤维细胞生长因子(FGF 2)冻干粉末在室温可保存3周,或置于-18℃冻存用于长期保存.重新溶解后可以在4℃冷藏保存至少2-7天以上;如果想延长保存时间,建议分装(加载体蛋白如0.1% HSA或 BSA)后置于-18℃冻存.请避免反复冻融. |
ProSpec 是一家全球著名细胞因子蛋白生产和研发的公司,具有20多年的生产经验,专注于蛋白(重组及合成)生产研发。我们的核心产品包括:干扰素、白介素、骨蛋白、肿瘤坏死因子、成纤维生长因子、瘦素、干细胞因子、催乳素、表皮生长因子、胰岛素样生长因子、神经生长因子、集落刺激因子、激素、酶、病毒抗原以及各种重组蛋白等。 艾美捷科技是ProSpec的中国代理商,为您提供优质的【FGF 2】重组人碱性成纤维细胞生长因子。