来宝网 2021/6/3点击2199次
“点击化学"的基本思想就是利用碳-杂原子成键反应快速实现分子多样性，一般由叠氮化物（azide）和炔烃（alkyne）作用形共价键，具有高效稳定，高特异性等优点。反应不受PH影响，能在常温条件下的水中进行,甚至能在活细胞中进行。
根据引入基团的种类，点击化学试剂可以分为以下几种：
一、叠氮修饰试剂
1.AmdU（5-叠氮甲基-2'-脱氧尿苷）
叠氮基甲基脱氧尿苷（AmdU）是一种含有叠氮化物的核苷，可通过细胞聚合酶掺入新生DNA中。随后可以用炔烃或环炔烃修饰以此方式连接到DNA的叠氮基团。
2.叠氮化物-PEG2-醛
具有叠氮基和脂族醛部分的连接基。
3.叠氮化物-PEG3-OH
叠氮化物PEG3 OH是一种双官能分子，具有叠氮基，伯醇和介于两者之间的亲水性连接基。
4.叠氮丁酸NHS酯
用于肽和蛋白质的叠氮基标记的活化酯
5.生物素PEG3叠氮化物
叠氮化生物素亲和探针可利用生物素进行点击化学标记。
6.氯-PEG3-叠氮化物
氯-PEG3-叠氮化物是带有反应性氯化物的异双功能连接子，用于各种亲核基团的烷基化
7.碘-PEG3-叠氮化物
碘-PEG3-叠氮化物包含高反应性的碘化物官能团，其可以使各种以C-，O-，N-，S-为中心的亲核试剂和其他亲核试剂烷基化。
二、炔基修饰试剂
1.乙炔酰肼
含有炔基和酰肼功能的双功能试剂。它与醛和酮反应。然后可以通过CuAAC反应将炔基与各种叠氮化物偶联。
2.炔烃马来酰亚胺
马来酰亚胺试剂，用于将炔烃官能团连接到蛋白质，肽和带有SH（硫醇）基团的其他分子，包括半胱氨酸残基。
3.炔烃NHS酯（己酸NHS酯）
炔烃NHS酯用于带有炔基的生物分子标记，用于铜催化的Click化学。
4.生物素炔烃
生物素炔烃是一种反应性亲和标记，可以通过点击化学（Click Chemistry）附着到生物分子上。
5.DBCO NHS酯
偶氮苯并环辛炔（DBCO，ADIBO）试剂，用于应变促进的无铜Click化学（spAAC）。该试剂具有NHS酯功能，可将环辛炔连接到各种分子上。
6.EdU（5-乙炔基-2'-脱氧尿苷）
EdU是一种核苷，可通过细胞酶掺入复制的DNA中。之后，可以通过与荧光染料叠氮化物的点击化学反应来开发细胞中包含的DNA，从而揭示细胞增殖。
7.己酸STP酯
炔基活化酯，用于修饰氨基。STP酯基是NHS酯官能团的绝佳替代品。
8.戊酸STP酯
一种用于将炔烃引入肽/蛋白质的活化酯。
Lumiprobe Corporation是美国一家高品质生物技术公司，专业提供分子生物学研究用的活性荧光染料。从2006年起，公司开始生产并销售生命科学研究和诊断学应用的优质化学药品。主要产品有：活性染料（ReactiveDye）和SYBRGreen I染料，定制合成荧光双标记引物。产品主要应用：点击化学（CLickChemistry）、蛋白质组学研究中的双向荧光差异凝胶电泳（2DDIGE）和实时荧光定量PCR（ReaLtimePCR）。Lumiprobe是通过ISO 9001认证的生命科学应用标准和定制试剂制造商。
艾美捷作为Lumiprobe公司在中国的金牌总代理，厂家充分认可艾美捷的成绩，现全面深化合作，开启地区特约经销商招募工作！
文章来源：https://www.amyjet.com/merchants/Lumiprobe-join.html
————————————————————————————————
Mabtech丨B细胞ELISpot检测试剂盒方案
B细胞ELISpot是对分泌的免疫球蛋白进行直接检测的有力工具。可用来直接计数抗体分泌细胞（ASCs）和长期记忆B细胞。相对于常用的细胞流式而言，B细胞ELISpot能在十万个细胞中实现对单个抗原特异性B细胞进行定量检测，因而具有极高的灵敏度。B细胞ELISpot的主要应用于检测B细胞对感染和疫苗接种引起的反应。
B细胞ELISpot检测需要捕获和检测抗体或抗原，采用夹心法对抗体分泌细胞ASCs进行计数。总Ig B细胞ELISpot（A）捕获和检测所有的ASC抗体，会以两种方式同时进行。一种是反向ELISpot（B），利用标记抗原进行检测；另外一种是传统的ELISpot (C)：将抗原包被在孔板上，利用标记抗体进行检测。不管是哪种方式，每一个斑点都只对应一个细胞。
反向ELISpot在检测抗原特异性细胞方面具有几大优势：它产生的斑点更加清晰，同时不存在抗原变性的风险；此外，它还大大减少了每次检测所需的抗原数量。
Mabtech B细胞ELISpot研究工具适用多种种属，产品优质，发表多篇高分文章。
1.Mouse IFN-γ ELISpot PLUS kit (ALP)
小鼠干扰素Y 酶联免疫斑点法PLUS（ALP）非常适合需要方便、灵敏分析的用户。该试验是为计数分泌小鼠干扰素的细胞而设计的-γ. 试剂盒包括预先涂有单克隆抗体、生物素化检测抗体、链霉亲和素ALP和即用BCIP/NBT-plus底物的ELISpot平板。
预涂板减少了分析时间，最大限度地减少了变异性。小鼠干扰素-γ ELISpotPLUS试剂盒也可用于链霉亲和素HRP和TMB底物。
2.Human IFN-γ ELISpot PRO kit (ALP)
人干扰素Y 酶联免疫斑点法PRO（ALP）具有预涂层板和一步检测功能。该试剂盒可以对分泌人干扰素的细胞进行计数-γ 包含单克隆抗体预包被的ELISpot板、一步检测的ALP结合抗体和BCIP/NBT+底物。人T细胞多克隆激活剂（mAb-CD3-2）作为细胞因子分泌的阳性对照。预涂板和一步检测使分析更加快速，变异性最小化。
艾美捷 Mabtech公司于1986年创办于瑞典，是一家欧洲的集研究，开发，销售，技术支持为一体的高科技免疫生物技术公司。Mabtech公司始终专业致力于研发新的单克隆抗体，生产创新的免疫试剂和销售高品质的全配套的免疫试剂盒。公司核心业务是致力于优化发展酶联免疫斑点法技术 (ELISpot)、荧光免疫斑点法技术 (FluoroSpot) 和酶联免疫吸附试验技术 (ELISA) 等免疫学方法。公司开发和生产多种针对细胞因子，免疫球蛋白和载脂蛋白的单克隆抗体，用于生命科学研究中的体外应用。Mabtech的试剂盒可用于研究感染性疾病，癌症，过敏，移植等免疫反应，通常用作疫苗试验中的监测工具。此外，还生产用于兽医和心血管研究的试剂盒。
文章来源：https://www.amyjet.com/featured/elispot-2.shtml
