来宝网 2021/3/5点击1209次
T淋巴细胞特异性识别抗原后，可被双活化信号刺激后，通过信号转导启动有关基因转录，进而发生增殖，这是淋巴细胞的基本功能，反映了其对抗原的识别和发生免疫应答的能力。
流式细胞术，是最常用的检测T淋巴细胞活化增殖的方法。接下来一起看看，如何使用流式，简单快捷的检测活化的血样中T淋巴细胞的增殖反应？
作为专业的流式抗体与解决方案，艾美捷科技推荐流式科研与诊断方案领导者EXBio的T淋巴细胞增殖反应检测试剂盒（T-cell BlastoFlowEx Kit）、
T淋巴细胞增殖反应检测试剂盒 #ED7642 旨在测量活化的全血样本中T淋巴细胞的增殖反应。 该试剂盒使用抗CD3和抗Ki67抗体混合物检测增殖的淋巴细胞。
T淋巴细胞增殖反应检测试剂盒实验流程：
1.从培养箱中取出试管，取下并丢弃管盖。每管中加入25 ul EDTA溶液，混合。
2.在37℃下孵育10分钟。
3.加入2ml的PBS，混合。400g离心细胞5分钟，移除上清液。
4.轻轻摇动管子扰乱沉淀。加入2ml的稀释固定和裂解溶液，混合。室温下孵育10分钟。
5.400g离心细胞5分钟，移除上清液。
6.加入0.5ml稀释的破膜溶液，混合。室温下孵育10分钟。
7.加入2ml的PBS。400g离心细胞5分钟，移除上清液。
8.加入50 ul的CD3/Ki-67 PE抗体预混液，混匀，室温下孵育至少30分钟。
9.加入2ml PBS。400g离心细胞5分钟，移除上清液。
10.用0.1-0.3ml的1％甲醛PBS溶液或者稀释的固定和裂解液（1份固定裂解液液+9份PBS的缓冲液）重悬细胞。在2-8℃下暗室条件下储存处理后的样品，直到分析。
T淋巴细胞增殖反应检测试剂盒结果展示：
1.用巨细胞病毒 -IE-1蛋白抗原肽体外刺激巨细胞病毒阳性供体全血
2.用巨细胞病毒 pp65抗原肽体外刺激巨细胞病毒阳性供体全血
3.全血在植物血凝素（PHA）管（货号：ED7634）中刺激，用T细胞BlastoFlowEx试剂盒处理并在流式细胞仪中进行分析。 CD3 + /单细胞的目标亚群显示为PE荧光的直方图。根据刺激阴性对照管（货号：ED7637）确定Ki-67阴性峰和Ki-67阳性峰之间的区分线。
文章来源：艾美捷科技
