加压对柱层析效果的影响
来宝网 2011/4/12点击2274次
| 加压对柱层析效果的影响 |
| 为了提高效率，节省时间。现在过柱子的时候大都采用加压的方式。但是如果直接使用加压球加压的话，由于加压体系比较小，随着洗脱剂得不断减少，其实体系的压力也在逐渐减小，然后再加入洗脱剂，周而复始。也就是说，柱子始终处于一种压力变化之中，这样的话对成份的分离应该是有不良影响的。 在这里我主要想和大家讨论两个问题： 1.这种压力变化对柱层析效果的影响到底有多大？ 2.如何使压力可以尽量保持恒定？ 我现在采取的是在加压球上接一个比较大的，有一定伸缩性的容器，用以扩大压力体系。 先说说我的观点： 有三种常用的手工过柱方式：减压柱(VLC，一般用干法装柱)；常压柱(就是最普通的，分为干法装和湿法装）；加压柱(分为flash柱和中压柱)。 加压的方式有：气泵法和恒流液泵法。 气泵法： (1)鱼缸增氧泵，出口压强约0.01MPa（即0.1大气压），适用于200-300目硅胶，flash柱。 (2)水产用空气压缩机，有不同规格，出口压强0.02-0.08MPa，适用于硅胶H，flash柱。 (3)另外说明，使用气囊的确有压力不稳的问题。故推荐使用气泵，仅由于添加溶剂，短时间的压力不稳，对分离影响不大。 恒流液泵法：恒流输液泵又称蠕动泵。可以吸取溶剂以恒定流速加到密闭的柱上。注意不是衡压。适用于手工填充的任何规格的柱，以及预制的中压液相色谱柱。如果配上自动部分收集器，就可以半自动操作了。如果再配上监测器和记录仪，就是一台自动的液相系统了。 |
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