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酶标仪实际上就是一台微孔板专用分光光度计：光源发出的光波经过滤色器，进入微孔中的待测标本.该单色光一部分被标本吸收，另一部分则透过标本照射到光电检测器进行测量。 

目前常规酶标仪比较普遍使用的光源为卤素灯等。LED作为一种新光源以其自身许多优势慢慢被许多酶标仪所采用。 

卤素灯泡为白炽灯的一种，卤素灯的玻璃外壳中充有一些卤族元素气体。其优点为经济，简单。但缺点为卤素灯最佳能量是在1000nm，但酶免检测常用的波长是340-600nm,只占高峰值的10-20%能量而已，所以有效效能非常低。因卤素灯工作过程中产生大量热量，仪器需要设计良好散热系统，这也解释了为什么卤素灯寿命短及随着时间/使用次数，效能会大幅下降的特性。 一般简单的吸收光检测，使用卤素灯酶标仪是没问题的，但要确保性能效果，需要至少一年更换一到两次灯泡。 

氙灯是利用氙气放电而发光的电光源。灯内放电物质是惰性气体氙气。优点为一般无需预热，随开随用，寿命比卤素灯长，只产生少量热量，所以效能及寿命比卤素灯好。缺点是价钱高。但一般灵敏度需求高的研究如荧光相关的研究，及高端多功能酶标仪都推荐用氙灯。

蓝光LED为2014年诺贝尔得奖研究，LED(发光二极管）是指利用发光二极管作为光源的技术。在同等效率下，LED灯寿命是传统卤素灯的10倍以上，只产生极少量的热量，免去了频繁的更换灯泡和等待灯泡预热所带来的麻烦，其光源能量强（可达所选的波长90%或以上）、稳定性好，所以有助于提高检测的灵敏度，线性度，准确性和精确度，其价钱十分大众化，非常适合一般常规酶标仪使用。