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微粒研究中的流式分析方法

来宝网 2014/6/20点击1232次

 

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微粒研究中的流式分析方法

 
 
循环微粒(circulate microparticle, cMP)是细胞激活、损伤或凋亡后从细胞膜脱落的直径小于1μm的小囊泡。在糖尿病、心血管疾病、艾滋病、慢性炎症性疾病中,发现循环微粒水平升高,且它的一些生物学活性如细胞间生物活性信号的传导,免疫调节血管生成组织修复等,与疾病的发生发展息息相关。对于它的认识还在不断地探索,其研究也越来越多。
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循环微粒流式分析方法视频讲座

 
循环微粒与凋亡小体、外来体不同,凋亡小体是细胞凋亡时以出芽方式形成的,直径大于 1μm;而外来体是由细胞活化后释放的囊泡颗粒,以外分泌的形式释放出来,直径大小为10.0nm ~ 100nm 。循环微粒的直径约为 0.1μm - 1μm,它们与母细胞有相似的基本特征。
 

目前微粒的检主要通过ELISA和流式细胞仪进行检测。ELISA方法易受其他可溶性抗原的干扰,而全血或者血浆的储存时间和方式、样本的处理方式、不同的检测方法等均会影响微粒检测的结果。流式细胞仪检测方法提供了更有效、快捷的分析微粒分析能力,现已有多种流式细胞标记物可用于检测微粒,它们主要用于检测微粒的活化状态及其细胞来源。但流式细胞仪检测的微粒由于波长的限制,直径小于0.3μm-0.5μm的微粒难以检测。

 

Apogee流式细胞仪

 

灵敏度100nm, 分辨率10nm: 利用Apogee A50突出的高灵敏度和分辨率,Apogee A50可以清晰的将直径相差10nm以上的微粒样本进行分群、计数、分析。

 

快速的数据获取性能,可高达100,000 events/sec,高浓度微粒样本的分析能力。

 

高灵敏、多通道荧光检测能力:cMP特定抗原荧光抗体的灵活使用,微粒功能、来源的精确分析。

 

Overcoming Limitations of Microparticle Measurement by Flow Cytometry”-Romaric,  Philippe, SEMINARS IN THROMBOSIS AND HEMOSTASIS/VOLUME 36, NUMBER 8 2010 

 

微粒检测适用于以下多种疾病研究:

 

心血管疾病

血栓性疾病

急性冠脉综合征 Acute coronary syndrome 

肝素诱导性血小板减少症
Heparin-induced thrombocytipenia 
Myeloproferative syndromes
 )

动脉粥样硬化 Atherosclerosis 

贫血(Sickle cell disease

静脉栓塞Venous thrombosis

阵发性睡眠性血红蛋白尿症(Paroxysmal nocturnal hemoglobinuria )

中风Stroke 

 

… 

 

自体免疫疾病

心血管危险因素

Antiphospholipid syndrom

糖尿病 Diabetes

红斑狼疮 Lupus

高血压 Hypertension

TTP

代谢综合征 Metabolic syndrome 

ITP

慢性肾功能不全 Chronic renal insufficiency

PAR 

血脂紊乱 Dyslipidemia

 

传染、炎症性疾病

肿瘤

败血症 Sepsis 

HIV

 
 
 
 
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