来宝网 2013/7/19点击1208次
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Union BioMetrica COPAS 大颗粒流式系统应用
C13C4.5/Spinster,一种进化上保守的蛋白作用于脂肪代谢而对线虫生育能力做出调控 |
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C13C4.5/Spinster, an evolutionarily conserved protein that regulates fertility inC. elegans through a lysosome-mediated lipid metabolism process
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Mei Han, Hao Chang, Peng Zhang, Tao Chen, Yanhua Zhao, Yongdeng Zhang, Pingsheng Liu, Tao Xu, Pingyong Xu
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Protein & Cell May 2013,Volume 4,Issue 5,pp 364-372
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中科院生物物理所徐涛教授团队采用Union BioMetrica COPAS 大颗粒流式系统于本年在国际知名刊物 “蛋白与细胞” 中发表——C13C4.5/Spinster,一种进化上保守的蛋白作用于脂肪代谢而对线虫生育能力做出调控。(Protein & Cell, May 2013,Volume 4,Issue 5,pp 364-372)。
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脂滴在几乎所有的物种都存在的细胞器,它的主要作用是储存中性脂肪。了解脂滴的调控中模式,将有利于解决肥胖和其他脂肪相关疾病。在本研究,研究员选择了11种可能跟线虫 (Caenorhabditis elegans.) 脂质代谢相关的候选RNAi控制序列。使用Union BioMetrica COPAS 大颗粒流式细胞仪,配备BODIPY 493/503 激光进行分析, 研究员发现其中有6个候选序列对脂肪储存负向控制,有3个候选对脂肪储存是正向控制。研究员选择了其中一个负调节RNAi C13C4.5作为后续研究。
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C13C4.5主要表达于线虫肠道。研究员发现,C13C4.5是维持脂滴代谢的重要基因。生化分析结果发现,在敲除C13C4.5基因的线虫中,50%的三酰基甘油(TAG)丢失。受激拉曼散射(SRS)信号显示C13C4.5突变型与野生型相比,突变型49.6%的脂肪含量在肠道的近端区域, 而野生型86.3%的脂肪含量在肠道前端区域。C13C4.5基因敲除线虫与野生型比较,其脂滴的大小和信号强度平均值显著下降。LMP-1标记的膜结构在C13C4.5突变型线虫肠道也增大。最后C13C4.5(ok2087) 突变型中也发现生育缺陷。总而言之,这些结果表明,C13C4.5可能是通过干扰溶酶体的形态和功能而调节线虫脂滴脂肪含量和大小,并间接对生育机能做出调控。
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模式动物如线虫,斑马鱼等、模式植物种子、大体积细胞(干细胞团,3D细胞球队)及微球的分选在生命科学研究中有着非常广泛的应用,但是由于这些对象体积太大,普通流式细胞仪难以对其进行分选,而手工镜下分选耗时耗力、效率低下、准确性难以保证,Union Biometrica公司出品的COPAS蠕虫/胚胎流式分选系统/多参数生物微粒分析与分选系统, 是市面上唯一能对大颗粒进行分析与分选的流式细胞仪。
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