来宝网 2019/3/22点击2001次
支原体是一种大小仅为0.2~0.3 um,无细胞壁,可透过一般过滤膜(0.22-0.45 um)的原核生物,在细胞培养过程中,支原体感染发生率达到63%,因而细胞培养过程中被支原体污染是一个世界性的难题。当细胞(特别是传代细胞)被支原体污染后,细胞内的DNA、RNA及蛋白表达发生改变,而细胞的生长率一般并未发生显著的影响,而且普通显微镜完全无法观察到支原体,因而细胞被支原体污染一般难以察觉。
支原体污染会对细胞培养造成严重危害。它们被证明可以引起多种多样细胞变化,严重的情况下会破坏细胞系。目前支原体的检测方法包括琼脂培养实验、PCR检测法及Hoechst染色。这些方法有的花费时间长,有的准确性不高。而BMG公司的CLARIOstar酶标仪结合MycoAlert分析,提供了快速并灵敏的检测支原体污染的相对简便的方法。
MycoAlert分析采用化学发光技术,指示支原体的存在。下图是加入底物之后,使用CLARIOstar酶标仪检测发光强度,支原体阳性对照相对于阴性对照而言,发光强度明显增加。
判断样本是否有支原体污染通过计算MycoAlert的比率来判断。CLARIOstar酶标仪自带的分析软件MARS,自动计算MycoAlert的比率,并且自动显示每个样本是好是坏,样本是否有支原体污染一目了然。
CLARIOstar酶标仪具有超高的检测灵敏度,即使MycoAlert阳性对照被稀释16倍,依然很轻易的检测出支原体的存在。
BMG公司是德国专业酶标仪制造者,最新推出的CLARIOstar Plus酶标仪,在化学发光检测上能检测到几个amol 的ATP, 动态范围达到8个数量级。CLARIOstar Plus酶标仪配备的在位注射器,支持同步注射和信号检测,不会错过任何时间点的信号变化,非常适合快速发光的检测。CLARIOstar酶标仪结合MycoAlert分析,只需要短短十几分钟就能检测细胞培养物是否有支原体污染,快速、灵敏、简单,无论是对细胞治疗还是细胞生产,或者是药物筛选都是非常使用的质量控制工具。
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