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De-Plasma™ 用于消除各类培养细胞中的支原体污染 ，也可用于预防培养细胞的支原体污染。

描述：

De-Plasma™是大环内脂、喹诺酮、四环素化合物三种抗生素的混合物，与市场上其他同类产品相比，这3种成分的混合物几乎无细胞毒性，但是效价更高。能够有效的抑制所有已知的支原体种类和相关的无细胞壁原核生物。

De-Plasma™的每种抗生素的作用方式并不一样，四环素类和大环内酯类通过干扰在原核生物在核糖体上的转录而阻断蛋白的合成。喹诺酮类通过抑制细菌DNA旋转酶和拓扑异构酶IV阻断DNA的复制。由于真核生物无DNA旋转酶和拓扑异构酶IV，所以De-Plasma™不会对真核细胞产生影响。

使用方法：

De-Plasma™  可以直接加到装有培养基的瓶子中或是装有细胞的培养瓶中。推荐将De-Plasma™ 配成1000 x的储存液（或5mg/ml）：在50mg的小管中加1ml水，摇动之后转移到大于10ml的容器中，再加入9ml的水配置成浓度为5.0mg/ml的10ml储存液。储存液4度可以保存3个月。

De-Plasma™ 的 工作浓度： 5 μg/ml

净化期： 4 代（根据细胞的生长状态大约需要 2 到 3 周）

细胞状态的维持和预防用量： 2.5μg/ml 。

为了提高De-Plasma™的有效性，我们建议：

l 使血清的浓度高于10%以提高细胞的生长率。

l 充分混匀培养基和De-Plasma™。

l 吹散细胞簇，防止细胞成团。

l 保证细胞密度比平时高5% 到10%。

l 每天在倒置显微镜观察细胞状态。

 

原代细胞系实验步骤：

1、将细胞加入含有5 μg/ml De-Plasma™ 的培养基中。

2、用含5 μg/ml的De-Plasma™ 的新鲜培养基传3代。对于某些生长较慢的细胞，建议2-3天更换一次培养基。

3、 通过TOKU-E’s PCR 支原体检测试剂盒来检测支原体的清除效果。

4、如果3代以后支原体还未消除，用含40 μg/ml的De-Plasma™ 的培养基再进行一次传代培养。

5、再次用TOKU-E’s PCR 支原体检测试剂盒验证支原体的去除情况。

根据对上百种细胞的应用测试显示，TOKU-E已被证明是对De-Plasma™ A 和B无抑制作用的。

 

无支原体污染的细胞可以加入 2.5 μg/ml 的 De-Plasma™ 用于预防：

1、将细胞加入含有2.5 μg/ml的 De-Plasma™ 培养基中。

2、保证细胞在De-Plasma™ 存在下生长状态正常。

3、为了长期维持无支原体污染，建议持将细胞加入含有2.5 μg/ml 的De-Plasma™ 中培养。

4、通过TOKU-E’s PCR支原体检测试剂盒来验证支原体的清除效果。