来宝网 2011/11/14点击4102次
特别推荐：
产自德国Candor bioscience公司高品质的阻断剂替代品——LowCross-Buffer® 低交叉反应缓冲液 
德国Candor Bioscience专业生产免疫优化试剂，如阻断剂替代品LowCross-Buffer，辣根过氧化物酶保护液LowCross-HRP 和HRP Protector，抗体（蛋白）稳定剂Antibody Stabilizer，封闭液Blocking Solution，液体板稳定剂Liquid Plate Sealer，脱离缓冲液Stripping Buffer。这些产品销往世界各地的诊断试剂公司，包括罗氏诊断。下面我们重点推荐该公司的LowCross-Buffer® 。
LowCross-Buffer® 是HAMA-阻断剂替代品；可以最大程度提高结果的可靠性，能够最大限度的减少以下因素的干扰：
人抗小鼠抗体（HAMA）
类风湿因子（RF）
基质效应
干扰经常是由人抗小鼠抗体（HAMA），类风湿因子（RF）以及高含量的胆红素，甘油三酯等引起的。这些干扰不可能完全由HAMA阻断剂处理。HAMA阻断剂只对HAMA有效果。相比之下，LowCross-Buffer® 作为一种实验缓冲液，它能够有效地阻止包括由HAMA引起的大量干扰因素，所以LowCross-Buffer?可以作为HAMA阻断剂的替代品。LowCross-Buffer® 有助于阻挡免疫分析中微弱或中等的亲和交叉反应所带来的干扰，像一个“亲和门卫”。LowCross-Buffer® 能够最大限度的降低所有的干扰，提高实验的质量和结果的可靠性。全球诊断和制药公司成功地利用LowCross-Buffer® 作为最大限度减少各种干扰因素影响的，降低成本的高效解决方法。
LowCross-Buffer® 被广泛地应用于酶联免疫吸附试验（ELISA），免疫印迹（Western Blotting），蛋白质芯片，免疫组织化学以及侧向层析检测，此外，它在荧光磁珠分析和SPR（表面等离子谐振）分析中也有应用。
LowCross-Buffer® 可用来替代标准的样本稀释缓冲液或者抗体稀释缓冲液。抗HAMA和类风湿因子干扰效果明显：
在CE认证的酶联免疫吸附试验（HAMA-ELISA，medac，Germany），LowCross-Buffer® 抗HAMA和类风湿因子干扰的效果已经被证实。实验使用商品化的人源性HAMA和RF阳性样本 (in. vent diagnostic, Germany)进行，如下图所示。
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图1：LowCross-Buffer® 可以将HAMA和RF阳性样本中的干扰降至实验的背景水平范围内(<40ng/ml，根据HAMA-ELISA说明书）。
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图2蛋白芯片分析中基片表面与检测抗体的非特异性结合减少。使用LowCross-Buffer后使信噪比从3，4提高到17，3。（data from N. Dankbar, university of Münster)
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图3：兔血清中CRP 的ELISA实验
LowCross-Buffer通过去除基质效应来提高实验的灵敏度（carried out by A. Zellmer, CANDOR Bioscience).
ELISA实验中，用兔血清作为基质，加入给定浓度的CRP（C反应蛋白）做标准曲线。分别用PBS/BSA标准缓冲液和LowCross-Buffer稀释兔血清，用ELISA检测，包被的捕获抗体为C2克隆，生物素标记的检测抗体（C6克隆）显色。CRP的一个特性就是可以与许多蛋白结合。LowCross-Buffer可以减少CRP与兔血清中内源性蛋白的结合，从而提高检测结果的灵敏度。
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图4：Western blotting 检测细胞角蛋白4,5,6（done by Dr. D. Sperling, MACHEREY-NAGEL, Düren).
这个图比较了用LowCross-Buffer® and TTBS (Tween/Tris-buffered salt solution)检测的差别。LowCross-Buffer® 可以完全阻止非特异性结合。角质蛋白4,5,6 分子量在56 -60 kDa 之间。使用LowCross-Buffer®后该蛋白可以很明显得被检测到。泳道1和1‘的检测来源为肝细胞，泳道2和2‘为HeLa细胞。M为蛋白分子量标记，用品红染色。印迹膜为硝酸纤维素膜。泳道1和2可以清晰的在56 -60 kDa 之间看到特异性条带。在泳道1‘和2‘条带很杂，背景值很高，条带不特异，有杂蛋白的干扰。
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图5：LowCross-Buffer在抗豚鼠IgG的ELISA实验中可以预防假阳性的结合降低假阳性的干扰。
(done by Dr. C. Specht, PARA Bioscience, Gronau).
分别用PBS和LowCross-Buffer按不同浓度梯度稀释抗体，结果如图所示。
1-6和7-12是做的两组平行实验。
A1-12是特异性对照组，H1-12是空白对照组
使用 LowCross-Buffer® 在《IVD Technology》杂志发表的文章：
http://www.candor-bioscience.de/en/pdf/download/ivd-technology-march-2009.pdf
Roche Diagnostics公司使用LowCross-Buffer发表的文章：
K. Stubenrauch, U. Wessels, U. Essig, R. Vogel and J. Schleypen (2010), Evaluation of a generic immunoassay with drug tolerance to detect immune complexes in serum samples from cynomolgus monkeys after administration of human antibodies. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis,52(2):249-54.
K. Stubenrauch , U. Wessels, J.T. Regula, H. Kettenberger, J. Schleypen and U. Kohnert (2010), Impact of molecular processing in the hinge region of therapeutic IgG4 antibodies on disposition profiles in cynomolgus monkeys. Drug Metab Dispos. 38(1):84-91.
（需要以上两篇文章的全文，请来电来函索取）
现提供LowCross-Buffer免费试用装，欢迎索取。
