来宝网 2013/3/15点击1632次
Ingezim谷蛋白半定量抗原检测试剂盒
R.30.GSQ.K2
Ingezim 谷蛋白半定量抗原检测试剂盒是基于抗醇溶蛋白R5单抗制备的用于样品中谷蛋白检测的一种半定量免疫酶试验方法。检出限为10ppm。
一、技术原理
1. 用单抗(针对Gliadin、Secalin和Hordein的特异单抗)包被微量板,之后,加入待检样品并孵育15分钟。
2. 如果样品中含有谷蛋白抗原,将会与结合在微量板上的特异抗体结合,形成MAb-Gliadin抗原复合物。
3. 当向微量孔加入过氧化物酶标记的抗Gliadin特异抗体,即MAb-PO并孵育15分钟时, 酶标单抗就会与样品中的抗原结合。
4. 加入底物作用5分钟后,可以通过颜色反应判定是否含有谷蛋白及其含量。
二、结果的解释
样品的OD值与半定量点(SemiQ point)的OD值比较。该试验方法为国际食品法典委员会(CODEX)认定的食品样品中谷蛋白含量检测的I型方法。
三、标定
用该半定量方法(Ingezim Semi Q)与Ingezim谷蛋白参考试剂盒同时检测133份样品,检测结果符合率为94%。
四、敏感性
该方法敏感性为可检测样品中最低含量10ppm的谷蛋白,5ppm的麸朊(醇溶朊)。
五、特异性
试验中用于抗原检测的单抗的特异性决定于免疫印迹技术。单抗能特异性识别小麦、黑麦和燕麦(分别为麸朊、黑麦醇溶蛋白和大麦醇溶蛋白)中的醇溶谷蛋白。
五、 试剂盒组成
1. 32孔微量板
2. SemiQ Point(半定量溶液)
3. 酶标抗体(过氧化物酶结合物)
4. 洗液
5. 稀释液
6. 底物溶液(TMB)
7. 终止液
8. 提取液