其它公司多糖多酚植物RNA提取试剂盒失败原因和解决方案

很多植物RNA的样品由于含有大量的多糖、多酚、代谢产物、色素等成分，造成RNA提取过程中氧化、褐化、降解、由于植物品种的多样性造成情况更加复杂。手工的CTAB类的方法提取因为时间太长，太繁琐，手工方法不在讨论之列。一直以来没有一款好的试剂盒包括qiagen、promega等进口试剂盒也无法满足科研工作者对植物RNA提取的要求。

下面我们来分析一下植物RNA为什么不能提取成功的原因：

市面上最常见的RNA提取试剂盒无非是两种：第一种：TRIzol改良类方法（包括溶液型的和离心柱型的）、第二种：直接裂解过柱子的方法（离心柱）

第一种试剂盒失败的原因1：RNA市面上面最流行的方法就是Trizol，或者Triol改良，或者Trizol加离心柱一类的改良方法。trizol也就是异硫氰酸胍/苯酚/氯仿原理一步法的方法最适合的对象是动物源性的组织细胞，针对普通多糖多酚低的植物性的材料，TRIzol类原理产品也可以提取。但是多糖、多酚、次级代谢产物丰富的情况下，trizol类方法无法防止多糖多酚对于RNA/DNA分相的干扰，要么残留大量DNA，要么残留大量多糖、多酚或者次级代谢产物，氧化破坏RNA，或者残留这些多糖多酚，色素代谢产物等抑制下游的反转录等反应。限于技术水平的限制，市面上绝大多数的国产厂家是使用trizol的方法进行改良，无论是不是加了离心柱。但是实践证明，改良不能从根本上解决问题。判断是否试剂盒使用这种改良的方法非常简单：是否裂解液含有苯酚的味道和使用氯仿，如果使用到了氯仿就是TRIzol方法的改良。

第二种试剂盒失败的原因：直接裂解过柱子的方法是目前最先进的方法，但是也是技术含量最高的方法。这个方法采用裂解液（不含苯酚，氯仿）直接裂解，RNA/DNA同时过柱子，然后在柱子上面直接分离RNA/DNA，所以，这种方法的优点第一在于，避免了使用trizol在多糖多酚下不能成功分离RNA/DNA的弊端、第二在于，不使用有毒的苯酚氯仿。但是正是因为其技术先进，所以难度很高，国内厂家包括进口公司有两个技术难点一直没有突破。第一，裂解液的成分必须针对去除多糖多酚进行研发添加去多糖多酚，代谢产物成分。否则会同样碰到多糖多酚干扰提取的问题。第二、和trizol原理不同，直接过柱法DNA/RNA同时加到吸附柱上去。如何去除DNA是第一个难点。否则会残留大量DNA。两个技术难点的没有掌握导致了国内公司包括的第二种试剂盒失败。国外公司因为没有掌握第一难点，裂解液里面没有去除多糖多酚成分，所以包括qiagen的盒子也常常不能成功提取植物RNA样品。

本人领衔和研发团队配合经过3年的不断研发改良，针对多糖多酚植物的特点，和这两种试剂盒失败的原因，开发出了EASYspin植物RNA快速提取试剂盒，第一采用直接过柱子方法，彻底抛弃了TRIZOL苯酚，氯仿原理方法，使用无毒原料，并且添加了有自主知识产权的去除多糖多酚成分解决了多糖多酚和代谢产物对于RNA的破坏和干扰分离。第二突破了直接过柱子的方法DNA去除的技术难点，解决了DNA残留过多问题。经过实践过程中，几十种国内试剂盒提取失败和进口试剂盒提取失败的例子，使用我偶们开发的试剂盒提取，除了一例因为离心柱子堵塞导致失败外，全部成功。而且，20分钟提取步骤非常简单，非常快速，无毒苯酚氯仿。全部提取成功的RNA可以成功完成下游反应试验。
部分成功样品：

棉花、海棠、黑加仑、虎杖、大豆、草莓、冬青、月季、蔷薇、沙棘、冬枣、芦荟、仙人掌、报春花、水稻、玉米、唐菖蒲、樱桃、白玉兰、毛白杨、樱花、葡萄、紫菜、绿藻、香蕉等等，其中qiagen无法提取的黑加仑、promega无法提取的海棠、均可用该产品成功提取。

推荐：北京艾德莱生物的EASYspin 植物RNA提取试剂盒为独家产品，世界领先水平，不使用苯酚，氯仿有毒性物质，采用离心柱型操作，添加有自主创新的多糖多酚去除成分，是多糖多酚样品的特效产品，20分钟内得到高质量RNA。成功提取Promega无法提取的海棠叶片、Qiagen无法提取的黑加仑。是国产试剂赶超世界先进水平的一个典型例子。

EASYspin 植物RNA快速提取试剂盒

目录号：RN09

货号#	规格	价格
RN0901	20 次
RN0902	50 次

试剂盒组成、储存、稳定性：

试剂盒组成	保存	20次	50次
裂解液RLT	室温	20 ml	50 ml
去蛋白液RW1	室温	15 ml	40 ml
漂洗液RW	室温	5 ml	10 ml
漂洗液RW	室温	第一次使用前按说明加指定量乙醇
RNase-free H2O	室温	10 ml	10 ml
PLANTaid	室温	2 ml	5 ml
RNase-free 吸附柱RA和收集管	室温	20 套	50套

本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。

储存事项：

所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。
不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。

产品介绍：

独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，植物RNA助提剂PLANTaid帮助结合多糖多酚并通过离心去除,然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除，最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

产品特点：

离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
不需要使用有毒的苯酚，氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
快速，简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。
独有的植物RNA助提剂可以有效结合多糖多酚,提高清除效果。
多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9～2.0，基本无DNA残留,可用于RT-PCR，Northern-blot和各种实验。

北京艾德莱生物科技有限公司优质领先产品招商！公司以研发立足，不断推出质量优异，价格适中产品。通过技术进步带动成本降低，给广大经销商，代理商，贴牌商，终端客户创造价值。
优势产品：
PCR扩增和RT-PCR相关产品：独家采用全自动大规模发酵罐生产的医药级高纯度高活性DNA 聚合酶、2 x Taq MasterMix 、可以反复冻融活性不降低并且活性远大于一般商品化DNA聚合酶。MMlv H minus 反转录酶、Taq Plus、PFU、LA Taq、荧光定量PCR MIX、原装进口dNTP等等

核酸分离相关产品：
RNA提取各种RNA提取：包括血液、组织、细胞、动物、植物、酵母、真菌、细菌、等全系列产品。其中TRIpure（TRIzol）获得国家科技部中小企业创新基因奖励80万元，完全达到或者超过进口invitrogen产品。EASYspin 植物RNA提取试剂盒为独家产品，世界领先水平，不使用苯酚，氯仿有毒性物质，添加有自主创新的多糖多酚去除成分，是多糖多酚样品的特效产品，成功提取Promega无法提取的海棠叶片、Qiagen无法提取的黑加仑。是国产试剂赶超世界先进水平的一个典型例子。

DNA提取：各种系列产品，包括动物，植物、细菌、组织、全血、细胞、噬菌体、土壤、粪便、凋亡ladder,产品线非常齐全。而且形式多样，包括离心柱型和溶液型，小量，中量，大量齐全。大量全血基因组提取（溶液型）原理，配方包括操作步骤说明书和Qiagen、Roche、Promega完全一样、广泛运用于全国各大医院、血液中心，疾控中心、法医鉴定、HLA分型等各种实验部门和项目。

质粒提取：经典成熟产品，完全达到Qiagen的水平，并在产品线的完善丰富程度上超过进口公司。包括离心柱型和溶液型齐全，大量小量齐全，普通、高纯和无内毒素齐全、价格从高、中、低齐全、其中全国独家产品大型大量质粒提取试剂盒可提取大量提取无内毒素转染级质粒，，并且可以提取50-100Kb的大质粒，价格为同类产品中行业最低，广泛运用于各大学和科研院所。是体现本公司实力派产品之一。

PCR产物回收：经典成熟产品，PCR产物清洁典型回收率可达95%-99%，胶回收可达80%，是进口产品的完全替代，而且可以根据客户具体实验需求进行吸附膜定制。

T载体：是国内T载体产品线最齐全的公司、独创的生产工艺和开发能力确保了产品质量超过进口，具体表现在典型克隆产物蓝斑率低于10%，白斑率高于90%，重组效率大于90%。其中pSURE-T simple、pGEMX-T EASY为本公司原创设计、开发构建的T载体，未经允许，不得拷贝复制本公司质粒，本公司保留任何法律权利。

DNA marker：最大的特点有两个：产品线齐全、质量稳定，可靠、反复冻融条带无变化、常温放置几个月无降解、另外一个就是，业内价格最低，优势明显。

蛋白质研究相关产品：最大特点，是Western blot 的相关产品线非常齐全、从蛋白抽提，BCA蛋白定量，到蛋白电泳，跑胶，蛋白染色，染膜，转膜，到底物显色ECL发光检测、应有尽有。

招商电话:13691030050
传真:010-82795296
WEB:http://www.aidlab.cn/
邮箱:info@aidlab.cn qq：328153626

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